为完成枙子油中关键活性物质玫瑰花茶酸的精确定量分析，选择超声波輔助液液萃取和固相萃取2种前解决办法开展系统软件讨论，关键调研了溶油实验试剂、料液比、提纯实验试剂类型、提纯实验试剂浓度值、液液萃取時间、液液萃取溫度及其液液萃取频次等要素。

在2种前解决办法的最佳情况下，超声波輔助液液萃取得到的玫瑰花茶酸成分高过固相萃取，且超声波輔助液液萃取实际操作简易、用时短、耗能低。因而，最佳前解决标准明确为：超声波輔助液液萃取，以N，N-二甲基甲酰胺（DMF）为溶油实验试剂，料液之比0.5 g油：5 mL DMF，100%工业甲醇为提纯实验试剂，室内温度超声波2 min，提纯1次，检验到的枙子油中玫瑰花茶酸成分的平均数为69.65 μg/g（RSD=4.45%）。

在这个基础上，对食用油开展加标回收试验，均值加标回收率为86.61%（RSD=1.16%），展现了方式的必要性和可靠性。该试验创建的办法可用以枙子油中玫瑰花茶酸的HPLC迅速、精确定量分析检验。

玫瑰花茶酸化学式为C20H24O4，归属于胡罗卜素。玫瑰花茶酸是宝贵的药用价值資源，在避免心脑血管疾病层面具备一定作用，根据提高脂类和碳水化合物的代谢，预防血脂高和主动脉粥样硬化。除此之外，玫瑰花茶酸还有着防止老年性痴呆病、降低肌肤损害、抗焦虑、保护肝脏、抗癌等功效。

现阶段，大多数将玫瑰花茶做为获得玫瑰花茶酸的来源于，而藏红花价格价格昂贵，是西班牙、土尔其、沙特等地种植的一种木本植物。枙子具备各种生物活性，是除玫瑰花茶之外，唯一带有玫瑰花茶酸的绿色植物。玫瑰花茶在中国难得少有栽种，而枙子相对性划算、适应能力强、栽种存活率高，是产自于国内的关键草本植物資源之一。

玫瑰花茶酸成分是枙子品质的主要评价方法之一。现阶段，有关枙子中玫瑰花茶酸成分的检查方式已经有一些报导，如：张永利等选用酶打法将栀子果中的玫瑰花茶素转换为玫瑰花茶酸，并且用紫外线光度法开展检验。陈雁等选用HPLC法检验栀子果中的玫瑰花茶酸和玫瑰花茶素。栀子果具备20%～25%的可食人体脂肪，可生产加工成枙子油，相近茶油和植物油等商品，归属于我国适用、提倡的大健康产业新式草本植物油。

CAI X等根据HPLC-DAD/ESI-MS发觉枙子油中带有玫瑰花茶酸。植物油中的少量活力营养元素是点评植物油质量的主要指标值。而玫瑰花茶酸做为一种枙子油独有的结构性成份，或许还可以做为点评枙子油营养成分质量的主要参照指标值。GB 509.149—2016《食品安全国家标准 食品中栀子黄的测定》中牵涉到液态中玫瑰花茶酸的统计分析方法，将生抽等液态用工业甲醇融解后立即气相检验，但该法并不适合用以食用油。

因为食用油不能溶解在乙醇中，因此 燃料先要历经溶油实验试剂解决，再用有机化学气相色谱分析在其中的玫瑰花茶酸。因而，怎样合理溶油并高效率获取、检验当中的玫瑰花茶酸是方式的关键所属，目前，食用油中玫瑰花茶酸的定量分析检验方式末见报导。

超声波輔助液液萃取法是一种传统化的试品分离出来技术性。该办法不用不必要仪器设备，用时短、高效率，但针对试品的分离纯化很有可能不足彻底。如：刘金铭等选用超声波輔助液液萃取获取食品类中的活力成份。

固相萃取法针对试品的清洁功效更强，能够减少试品栽培基质影响，提升检验敏感度，但固相萃取SPE小柱价钱较高。如：黄轩等选用C18固相萃取柱对植物油净化处理，检验当中的乙基麦芽酚。

文章内容系统软件较为了2种前处置技术性，挑选获得了枙子油中玫瑰花茶酸的最佳获取方式，创建了枙子油中玫瑰花茶酸的HPLC迅速、精确定量分析检验方式 ，为枙子中玫瑰花茶酸的探讨打下了方法学基本，对枙子身心健康作用油的开发设计及质量点评带来了关键专用工具。

1 原材料与方式

1.1 实验试剂与仪器设备

玫瑰花茶酸标准物质（纯净度≥98%）；Methyl Alcohol（HPLC级）、Acetonitrile（HPLC级）；酒精、工业甲醇、等保、乙腈、甲酸、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）、乙醚、乙醚；正己烷、吡啶；CNWBOND Diol二醇油固相萃取SPE小柱；枙子油：浙江省骄栀高新科技有限责任公司；原香食用油：金太阳粮油食品股权有限责任公司。

BAS224S电子分析天平，DS-2510DTH超声波清洗器，D-37520超速离心机，SHB-Ⅲ-A冷却循环水式常用机械泵，Essentia LC-16安捷伦仪器高效率液相色谱。

1.2 实验方法

1.2.1 规范试品贮备液的制取

玫瑰花茶酸标准物质贮备液的制取：精确称量0.60 mg（精准至0.1 mg）玫瑰花茶酸标准物质，用吡啶融解充分后，添加工业甲醇（色谱仪级）并迁移到50 mL容量瓶中，搅拌，滴定剂，得到12 μg/mL的玫瑰花茶酸规范贮备液。

1.2.2 HPLC色谱仪标准

离子交换柱为正相反柱头Kinetex 5u XB C18（250 mm×4.6 mm，5 μm，Phenomenex）。色谱仪标准参考GB 509.149—2016《食品安全国家标准 食品中栀子黄的测定》：流动性相为甲酸-乙酸铵缓冲液（A）-乙腈（B）；过柱梯度方向：0.0～1.0 min，20%B；1.10～8.0 min，20%～60%B；8.0～8.1 min，60%～70%B；8.10～13.0 min，70%～98%B；13.10～15.0 min，98%～20%B；15.10～20.0 min，20% B；流动速度为1.0 mL/min；气相量为10 μL；柱温为35 ℃。

1.2.3 超声波輔助液液萃取

1.2.3.1 溶油实验试剂类型及料液比

称量0.5 g枙子油于烧瓶中，各自添加5 mL正己烷、DMF、乙醚、乙醚溶油。待液压油所有融解后，添加10 mL 100%的工业甲醇，常温下标准，马上超声波2 min。超声波后，经8000 r/min离心式10 min，分层次后汲取有机相，用工业甲醇滴定剂到25 mL容量瓶中。各自取2 mL样液，经0.45 μm尼龙66滤纸过虑后，开展高效液相剖析。挑选好溶油实验试剂以后，再对料液比开展提升：即各自添加2.5、5、7.5、10、12.5 mL DMF。

1.2.3.2 提纯实验试剂类型及浓度值

称量0.5 g枙子油于烧瓶中，添加5 mL DMF，待液压油所有融解后，各自添加10 mL浓度值100%的甲酸、乙腈、工业甲醇、酒精、等保，马上超声波2 min，超声波后经8000 r/min离心式10 min，分层次后汲取有机相，工业甲醇滴定剂到25 mL的容量瓶中。各自取2 mL样液，经0.45 μm尼龙66滤纸过虑后，开展高效液相剖析。挑选好提纯实验试剂以后，再对提纯实验试剂浓度值开展提升：即各自添加浓度值70%、80%、90%、100%的工业甲醇。

1.2.3.3 溫度及時间对获取枙子油中玫瑰花茶酸的危害

称量0.5 g枙子油于烧瓶中，添加5 mL DMF，待液压油所有融解后，添加10 mL浓度值100%的工业甲醇，维持時间2 min不会改变，各自在30、60、90 ℃标准下开展前解决，随后经8000 r/min离心式10 min，分层次后汲取有机相，工业甲醇滴定剂到25 mL的容量瓶中。各自取2 mL样液，经0.45 μm尼龙66滤纸过虑后，开展高效液相剖析。時间标准为：30 ℃时，各自在2、12、22、32 min标准下开展前解决。

1.2.3.4 提纯频次

明确溶油实验试剂、料液比、提纯实验试剂类型及浓度值、超声波溫度和時间等要素后，对提纯频次开展提升：称量0.5 g枙子油于烧瓶中，添加5 mL DMF，待油样所有融解后，添加10 mL 100%的工业甲醇，马上超声波2 min，超声波后经8000 r/min离心式10 min，分层次后汲取有机相，工业甲醇滴定剂到50 mL的容量瓶中，得到提纯1次的试品；称量0.5 g枙子油于烧瓶中，添加5 mL DMF，待油样所有融解后，添加10 mL 100%的工业甲醇，马上超声波2 min，超声波后经8000 r/min离心式10 min，分层次后汲取有机相到50 mL容量瓶中。

再度往离心式后的油看中添加5 mL DMF，待油样所有融解后，添加10 mL 100%的工业甲醇，马上超声波2 min，超声波后经8000 r/min离心式10 min，分层次后汲取第二次的有机相到置放于第一次有机相的50 mL的容量瓶中，并且用工业甲醇滴定剂。此为获取2次的试品。同样可获得，获取3次的试品。各自取2 mL样液，经0.45 μm尼龙66滤纸过虑后，开展高效液相剖析。