2.7.3 偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）

为了更好地进一步剖析导致不一样批号试品中间差距的成分，在PCA的根基上开展PLS-DA解决。实体模型区别主要参数R2Y=0.966，模型预测主要参数Q2=0.91，说明创建的实体模型合理平稳。一样可将16批试品分成3类，进一步认证了HCA和PCA的結果；以PLS-DA实体模型中必要性投射（VIP）值>1.0挑选不一样批号试品间的差异成份，VIP值的尺寸说明了对试品归类的贡献的水平。据图5得知，共寻找八个成份，各自为：13号峰（黄芩异黄烷苷）、11号峰（人参皂甙Rg1）、花了7天时间峰（毛蕊大豆异黄酮葡萄糖水苷）、24号峰（7,2'-二甲基-3',4'-二叔丁基异黄烷）、六号峰（松香醇二红提苷）、16号峰（毛蕊大豆异黄酮）、20号峰（芒柄花黄素）、11号峰（绿原酸），说明这8种成份对黄蛭益肾胶襄品质差别危害很大。8种成份各自来自于黄芩、三七、益母草颗粒、墨旱莲、菟丝子，在其中五个成份属于君药黄芪药材，进一步表明黄芪药材对黄蛭益肾胶襄的品质危害很大。

3 探讨

本试验各自调研了超声波获取方式的差异获取有机溶剂（50%工业甲醇、70%工业甲醇和工业甲醇）、获取時间（30、45、60 min）和获取料液比（1∶5、1∶10、1∶15）等影响因素，从获取的色谱仪信息内容整体性、色谱仪峰的回应、实际操作方便性等层面考虑到，明确供试品水溶液最好制取方式为加10倍量工业甲醇超声波获取30 min。较为了4种不一样流动性相系统软件（工业甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.05%硫酸铵水、乙腈-0.1%硫酸铵水），乙腈-0.05%硫酸铵水做为流动性相所得的色谱仪峰形、回应及分离度均不错；选用DAD探测器对检验光波长开展调查，发觉在210 nm处的图普信息内容较多，峰回应较高；因为试品中正负极大的成份较多，优先选择考虑到吸水性型离子交换柱，各自挑选Waters Atlantis T3(250 mm×4.6 mm,5μm）、Inter Sustain AQ-C18(250 mm×4.6 mm,5μm）、Waters Symmetry Shield RP18(250 mm×4.6 mm,5μm）、Waters XBridge®Shield RP18(250 mm×4.6 mm,5μm），同一色谱仪标准下气相，结果显示Waters XBridge®Shield RP18(250 mm×4.6 mm,5μm）离子交换柱的分离出来实际效果不错，峰总数较多且分离度不错，故选用这款离子交换柱。

本科学研究创建了黄蛭益肾胶襄的指纹图谱，16批试品中明确24个一共有峰，根据HPLC-Q-TOF-MS/MS评定了化学物质，并根据呈阳性中药材和呈阴性中药制剂试品核对所属到7味中药材。相似性点评结果显示16批黄蛭益肾胶襄相似性在0.925～0.995，整体上品质比较均一。但根据HCA、PCA和PLS-DA有机化学运作模式，16批黄蛭益肾胶襄一共有纷纷总面积出现差别，进而导致试品两者之间的品质差别。根据聚类算法图得知，16批试品被分成3类，融合试品生产批号信息内容，3类间的不同很有可能与制造時间、药物存储、原中药材品质相关。以PLS-DA实体模型中的VIP值挑选出8种差异成份，可当作操纵黄蛭益肾胶襄品质的重要，这几类成份各自来源于黄芩、三七、菟丝子、益母草颗粒、墨旱莲，提醒制造业企业之后在药物制造中应当主要关心之上成份的转变及其这几剂原中药材的品质。

本实验过程简易，可行性分析高，应用性强，根据指纹图谱的根基上基本解析了药物物质条件，为黄蛭益肾胶襄所含化学成分的进一步剖析打下基础，为更为科学研究、高效率地操纵药品安全给予参照根据。黄蛭益肾胶襄所含药味诸多，本试验指纹图谱所属到的中药材仅7味，也有枸杞子、薏米仁、淮山药等中药材成份未在这里指纹图谱結果中反映，主要是因为这类中药材所包括成份多见水溶等大正负极成份，色谱仪分离出来难度系数很大，对于该类化学物质的剖析事后拟选用HILIC方式开展剖析。黄蛭益肾胶襄中的黄芩、川牛膝、三七等中药材一样包括很多人参皂甙类成份，该类成份在紫外线中沒有消化吸收，日后可融合挥发光透射（ELSD）或电喷雾器（CAD）探测器进行其化学成分分析，以求健全其化学成分分析。