食用添加剂是当今食品产业中不可以缺失的一部分，人造黑色素、甜味素和添加剂做为主要的食用添加剂被普遍使用于食品生产生产加工。可是，伴随着其在食品企业的普遍应用，违反规定及超限定应用事情经常发生，所产生的食品质量安全难题也日益突显，安全管理难题已被纳入食品卫生安全整治工作中的关键內容。伴随着我们生活水平的提升及对身心健康的关心，红酒渐渐地替代了酒精含量较高的纯粮酒，变成 了许多 酒宴和聚会的“新欢”，消耗量展现日益增加的发展趋势，但红酒销售市场仍有很多违反规定应用添加物或是添加物超标准的状况，乃至有非法商人运用香料、黑色素、乙醇、甜味素等添加物开展勾调，生产制造假冒伪劣产品红酒商品，搅乱红酒销售市场，伤害顾客身心健康。

近些年，国家相关机构在对全国各地红酒的抽样检验流程中发觉，乱用添加物状况经常发生，因而红酒中违反规定运用的防腐剂也变成我国食品卫生安全监管抽样检验的重点项目建设。伴随着在我国食品类安全管理水准的提高，为提升工作效能，便捷监督机构和生产商对红葡萄酒中添加剂、甜味素和色素沉着的日常检测，开发设计敏感度高、适用范围广的高通量测序检验方式以合理地解决添加物在红酒中的乱用，及其面对突发性食品类安全事故具备关键的实际意义。

为确保食品卫生安全，必须 对红葡萄酒中食用添加剂的成分开展检验。现阶段，国家标准有对于红酒中添加剂、黑色素和甜味素等的检查方式 ，但这种规范大多数对于单一或某几类食用添加剂，且试品的前处理方式不尽相同，针对红酒中多种多样添加物则必须逐一测量，程序流程复杂，现场采样长，高效率很低，在实现大批量试品检验时，必须大批量的财力物力。

近些年，世界各国有关红酒中添加剂、甜味素和黑色素检验办法的文献资料报导许多 ，关键选用离子色谱法、气相色谱分析、高效率液相色谱仪、高效率液相色谱仪质谱等，尽管有关检验办法的消息许多 ，在检验敏感度和精确度层面均逐步提高，但经文献资料，大多数只对于某一类添加物开展检验，不利对红葡萄酒中多种类型添加物的规模性筛选。此外，包含在我国国家行业标准以内，现阶段较为常见的研究方法为液相色谱仪法，该方式无法给予总体目标化学物质的化学结构信息内容，抗干扰性相对来说较差，在具体试品剖析时很容易遭受栽培基质影响而造成阳性状况。

液相色谱仪与质谱分析液质质技术性可以在一定水平上减少栽培基质影响，针对必须高灵敏、宽应用领域的检验工作中来讲，已变成最合适的技术手段之一，慢慢运用于添加物的检验。本试验选用高效率液相色谱仪-串联质谱技术性，运用高效率液相色谱仪的强分离出来工作能力和质谱分析精确判定、高可选择性和高灵敏的特性，在较短的時间内就可以进行多组分的分离出来评定，创建了一种可一起测量并可以精确判定定量分析红酒中添加剂、甜味素和色素沉着的方式 。

一、原材料与方式

1、原材料、实验试剂与仪器设备

红酒样：购自零售商场和店铺。

实验仪器：LCMS-8050高效率液相色谱仪-串连质谱仪器（日本Shimadzu企业，实际配备为LC20ADXR×2输液泵，DGU-20A3R线上脱气轮，SIL20AXR自动进样器，CTO-20AC柱温箱，CBM-20A系统软件控制板，LCMS-8050三重四极杆质谱仪器，LabSolutionsVer.5.91色谱工作平台）；Milli-QReference超纯水器（英国Millipore公司）；超声波清洗器（KQ-500DE，昆山市超声波仪器设备有限责任公司）；AcquityUPLCHSST₃柱（100mm×2.1mm,1.8µm，英国Waters企业）；0.22μm尼龙滤膜（上海安谱仪器设备有限责任公司）。

实验试剂：工业甲醇、乙腈、甲酸、乙酸铵（HPLC级，Dikma企业）；甜蜜素（Sodiumcycamate）、安赛蜜（Acesulfame-K）、糖精钠（Saccharinsodium）、阿斯巴甜（Aspartame）、三氯蔗糖（Sucralose）、甜菊糖苷（Stevioside）、纽甜（Neotame）、阿力甜（Alitame）；诱惑红（Allurared）、赤藓红（Erythrosine）、苋菜红（Amaranth）、柠檬黄（Carmine）、焦糖色（Tartrazine）、日落黄（Sunsetyellow）、亮蓝（Brilliantblue）；脱氢乙酸（Dehydroaceticacid），英国Sigma-Aldrich企业，澳大利亚TRC企业和法国Dr.EhrenstorferGmbH企业，纯净度≥95%。

2、实验方法

（1）规范溶液的配制
各自精确称量16种添加物标准物质于10mL深棕色容量瓶中，自来水或工业甲醇融解并滴定剂，配置成浓度值为1mg/mL的单标贮备液，于-18℃下遮光储存。用工业甲醇稀释液并配置正中间浓度值的规范切削液，于4℃遮光储存。依据须要用流动性相逐步稀释液，配置成合理含量的混和规范切削液，现配现用。

（2）试品前解决方式

取红酒试品2.0mL于10mL容量瓶中，用超纯水系统滴定剂，超声波搅拌，过0.22μm滤纸，渗沥液供测量。

（3）色谱仪标准

离子交换柱：AcquityUPLCHSST3柱（100mm×2.1mm,1.8µm，英国Waters企业）。流动性相：（A）工业甲醇和（B）10mmol/L乙酸铵溶液，流动速度0.35mL/min；梯度方向过柱程序流程为：0min，工业甲醇的摩尔分数为10%；0～3min，工业甲醇的摩尔分数从10%升到90%，并维持2.5min，5.5～5.51min；工业甲醇的摩尔分数从90%降到10%；5.51min～6.5min，工业甲醇的摩尔分数维持10%。柱温为35℃；气相容积：2μL。

（4）质谱分析标准

分析仪：LCMS-8050；离子源：电喷雾器离子源（ESI）；扫描仪方法：正空气负离子与此同时扫描仪；离子源插口工作电压：0.5kV；做雾化气：N23.0L/min；干躁气：N210L/min；撞击气：氩气；DL溫度：250℃；加热器溫度：400℃；逐行扫描：多反映检测(MRM)；停留時间：15ms；时间延迟：3ms；16种添加物标准物质MRM主要参数见表1。

二、結果与探讨

1、试品前解决标准的提升

与别的剖析方式不一样，质谱分析通常具有一定的基质效应，当应用ESI源时，在离子化全过程中栽培基质成分与总体目标物市场竞争，更易发生栽培基质抑制效应。降低基质效应的办法一般有稀释液试品水溶液、提升净化处理流程、配置栽培基质配对标液等。本探讨选用立即气相方法做好剖析，以防止传统式的液液萃取、固相萃取方式利用率低、可重复性差，且会采用大量的溶液的缺点，但充分考虑红酒中带有一定占比酒精和糖原，为降低基质效应对测量的危害，需对试品开展稀释液解决。稀释液的办法能够减少酒精对色谱仪峰形危害，变弱基质效应，可是会减少方式的方法检出限。历经对流行知名品牌的红酒各自稀释液2～15倍开展检验，不一样稀释倍数试品检测比照，最后明确稀释倍数为5倍。