相关性分析结果(表2)表明,“玫瑰香”品种火龙果的NAD-MDH和PEPC活性与苹果酸含量呈极显著正相关(P<0.01),NADP-ME活性与苹果酸含量呈极显著负相关(P<0.01):“大红一号”品种火龙果的NAD-MDH活性与苹果酸含量呈显著正相关(P<0.05),PEPC活性与苹果酸含量呈正相关,NADP-ME活性与苹果酸含量呈负相关。
采用RT-qPCR测定火龙果苹果酸代谢相关基因的相对表达量。MDP-ME基因主要参与调控苹果酸的降解,如图5a所示,NADP-ME的表达量在“玫瑰香”品种和“大红一号”品种火龙果中均呈现先下降后上升的趋势,在贮藏第8天,该基因在“玫瑰香”品种中的表达量显著高于“大红一号”,且相关性分析(表2)表明“玫瑰香”品种NADP-ME的相对表达量与酶活呈极显著正相关:“大红一号”品种的NADP-ME相对表达量与酶活呈显著正相关,表明NADP-ME基因的表达水平与火龙果果实贮藏过程中苹果酸含量密切相关,直接影响果实的口感和风味。
PEPC和NAD-MDH基因是果实发育过程中苹果酸代谢的关键基因,与苹果酸的合成相关。PEPC和NAD-MDH主要参与苹果酸的合成。由图5b可知,PEPC相对表达量在贮藏过程中呈现先上升后下降的趋势。细胞质内的丙酮酸被还原为乳酸,导致细胞质内可转化为苹果酸的丙酮酸含量降低,问接导致细胞质内的苹果酸含量的降低。在贮藏第6天,“玫瑰香”品种的NAD-MDH相对表达量达到峰值,与PEPC酶活性呈负相关:在贮藏第4天,“大红一号”品种的相对表达量达到峰值,与PEPC酶活呈正相关。如图5c所示,NAD-MDH相对表达量总体呈现先上升后下降的趋势,相关性分析表明,“玫瑰香”品种的NAD-MDH相对表达量与酶活呈极显著正相关:“大红一号”品种的NAD-MDH相对表达量与酶活呈显著正相关,这与Famiani等的研究结果一致。PEPC和NAD-MDH2个基因的相对表达水平与火龙果果实贮藏过程中苹果酸的积累密切相关,直接影响果实的口感和风味。
红肉火龙果采后品质劣变由果皮和果肉硬度下降及可滴定酸、抗坏血酸、总酚含量降低共同导致。苹果酸为红肉火龙果果实中有机酸的主要成分,其含量变化导致果实有机酸含量下降。负责苹果酸合成的NAD-MDH和PEPC的酶活性与苹果酸含量呈正相关。而负责苹果酸降解的NADP-ME则与苹果酸含量呈负相关。进一步研究测定苹果酸相关代谢酶NADP-ME、PEPC和NAD-MDH基因水平变化,发现苹果酸代谢相关基因水平的变化与酶活的变化趋势一致。火龙果采后贮藏过程中,PEPC和NAD-MDH的基因水平呈下降趋势,而NAD-MDH的基因水平呈上升趋势,使得果实中苹果酸合成受阻,降解加剧,最终导致苹果酸含量下降,火龙果在贮藏过程中品质变劣。