一切正常牛乳中的尿素溶液成分约200－300mg/L，近些年，一些非法商户为了能提升盈利室内空间，在牛奶中添加尿素溶液过高蛋白质含量，而浓度较高的尿素溶液会导致泌尿生殖系统代谢阻碍，造成人体电解质溶液失调，对身体产生危害。因而，测量牛奶中尿素溶液的成分十分关键。

现阶段，尿素溶液成分的检查办法具体有二乙酰一肟酶活性测定、流动性注入检测仪法、电化学发光法、液相色谱仪法等，对牛奶中尿素溶液的定量分析检验方式较少。小编根据参照和参考游泳馆水里尿素溶液成分的测量及牛奶前解决的方式 ，对牛奶中尿素溶液成分的测量开展了研究和探寻论述，依据二乙酰一肟与尿素溶液的反映基本原理，对危害尿素溶液显色反应的试验标准干了挑选科学研究，最终对该办法的正确度、利用率及检出限进一步认证，最后确认该办法可使用于牛奶中尿素溶液成分的检验。

一、原材料与仪器设备

1.试验原材料。

试验用乳购于商场中不一样牌子的成袋奶及农贸批发市场市场销售的散称奶。

2.关键仪器设备。

SP－756P紫外线由此可见光度计（上海市光谱仪器有限责任公司），普利赛斯ES225SM－DR电子分析天平（法国普利赛斯企业）。

3.实验试剂。

（1）尿素溶液国家标准物质（99.8％）：精确称量尿素溶液纯品国家标准物质100mg，溶解0.05mol/L盐酸中，轻轻地振摇，使尿素溶液彻底融解，并且于100mL容量瓶中滴定剂至标尺，使最后浓度值为1000mg/L，搅拌后将其转到深棕色瓶中，于－4℃冰柜中储存预留。

（2）尿素溶液规范应用液：汲取10.0mL的尿素溶液规范贮备液并且用纯净水稀释液至100mL，使其含量为100mg/L。

（3）二乙酰一肟水溶液（0.5％）：称量5.0g二乙酰一肟并溶解水里，用容量瓶滴定剂至1000mL。

（4）三氯化铁－氨基硫脲－盐酸混和实验试剂：将200mL的硫酸慢慢添加800mL水里，制冷后添加0.1g三氯化铁和1.0g氨基硫脲，用纯净水滴定剂至1000mL。

（5）亚铁氰化钾水溶液（10.6％）：称量10.6g亚铁氰化钾，放水融解滴定剂至100mL。

（6）乙酸锌水溶液（22.0％）：称量乙酸锌22.0g，放水融解并添加5.0mL冰乙酸，滴定剂至100mL。

二、实验方法

1.实验原理。

二乙酰一肟在弱酸性情况下水解反应转换为双乙酰，与尿素溶液在强碱标准下缩合反应变成鲜红色的二嗪化学物质。该结合
物色调的深度与尿素溶液成分正相关，在光波长525nm上有较大吸取峰。

2.测定法。

取搅拌试品10.0mL于100mL容量瓶中，添加亚铁氰化钾和乙酸锌水溶液各4.0mL，用纯净水滴定剂，振摇均
匀。置放30min后，取10.0mL上清液，添加2.0mL二乙酰一肟水溶液，再添加三氯化铁－氨基硫脲－盐酸混和实验试剂10.0mL，搅拌。将以上各管在开水浴中加温14min，置流动性水里制冷2min，并且用纯净水稀释液至
25mL。以纯净水作对照品，用1cm比色皿，于525nm光波长处测量OD值值。

3.试验标准。

（1）消化吸收光波长的明确。加入适量标液，在480nm－560nm范畴内开展全光波长扫描仪，結果见图1。

由图1得知，吸光度值在480nm－525nm范畴内慢慢提升，且在525nm处做到较大，在525nm－560nm范畴内又慢慢减少，从而明确最好消化吸收光波长为525nm。

（2）反映溫度的挑选。因为该反映在常温状态显色反应开展得比较慢，故考虑到在升温的水浴中开展反映，各自将恒温水浴锅的溫度设定为60℃、70℃、80℃、90℃、100℃，观查其显色反应，作出反映溫度与OD值的关系图，详细图2。

由图2能够看得出，试品OD值受气温干扰很大，伴随着气温的上升而持续扩大，在溫度贴近100℃时，OD值做到最大，因此 挑选沸水浴加热为最好的溫度标准。