1 原材料与方式

1.1 供试土壤层

实验地坐落于江西鹰潭市余江县邓家埠稻谷原种场(116°55'E，28°15′N)，该区域归属于典型性中亚热带气候润湿温带季风气候区，月均值最高温度与最低温度各自为29.9℃ 和 5.5℃，年平均溫度 17.6℃，全年度有效积温 6 480℃，年平均降水量 1 727 mm，全年度雷暴日 289 d。本地轮种方法为：早稻–晚稻–冬天休闲娱乐。本实验供试水稻田土壤层归属于江河冲积物生长发育而成的潴育型水稻土，供试原材料早稻种类为中早 33，晚稻种类为农香 98，株行间距 20 cm × 20 cm。2008 年晚稻栽种前，土壤层基
础养分含量为有机碳 19.20 g/kg、全氮 1.64 g/kg、全磷 0.30 g/kg、全钾 27.26 g/kg、碱解氮 139.04 g/kg、速效性磷 5.76 mg/kg、速效性钾 81.60 mg/kg，pH 为 4.94。

1.2 试验设计 

实验选用两要素彻底任意区组的裂区设计，主区解决：①冬天还田(WS)；②春天还田(SS)；副区解决：①秸秆综合利用，实验期限内全过程不加上矿质氮 (N0)；②基本上肥，还田时不加上矿质氮(NB)；③还田时加上早稻底肥使用量的 30% 矿质氮(N30B)；④还田时加上早稻底肥使用量的 60% 矿质氮 (N60B)；⑤秸杆清除(CK)； 3 次反复，共 30 个住宅小区，住宅小区总面积为 10 m × 8 m。

秸秆综合利用解决是将晚稻获得的所有麦草破碎至5 ~ 10 cm，匀称分散化于田面，并按主区解决各自在冬天(12 月中下旬)或春天犁田(明年 4 月中下旬)时将田面秸杆翻进住宅小区土壤层土壤层中，秸秆综合利用量为 7 500 kg/hm2。秸杆清除解决是将晚稻获得的所有麦草移除住宅小区，秸杆不还田，秸杆解决与清除解决的留茬高宽比均为 10 cm上下。 

早稻肥料施加量基肥为 N 180 kg/hm2，磷钾肥为 P2O5 75 kg/hm2，钾肥为 K2O 150 kg/hm2，常用的化肥基肥为尿素溶液，磷钾肥为钙镁磷肥，钾肥为氯化钾；磷钾肥做为底肥一次性施入，钾肥按底肥︰抽穗肥︰穗肥 = 3︰ 4︰3 施入。基本上肥的 NB 解决按底肥︰抽穗肥︰穗 肥 = 5︰3︰2 施入，其他施于基肥及其底肥氮前施的解决其基肥使用计划方案实际见表 1。

1.3 抽样与测量

2013 年晚稻获得后，在稻谷冬闲期(11 月至第二年4 月)内共取 4 次样，各自于 1—4 月的 10 号按时完成抽样(冬天秸杆翻地在 2014 年 1 月 10 日)，记作：冬闲Ⅰ、冬闲Ⅱ、冬闲Ⅲ 和冬闲 Ⅳ；在 2014 年早稻生长期(4 月中下旬至 7 月中下旬)的分蘖期、拔节期、齐穗期和成熟各取一次。

试品收集于 0 ~ 15 cm 的土壤层土壤层，每一个住宅小区按“S”形 5 点取样并搅拌。土样置放于冰块中，快速带到试验室，拣去土壤层中的由此可见根茎、秸杆等残渣后，放置电冰箱 –20℃ 冷藏储存，用以土壤层酶促反应的测量。

1.4 测量新项目及方式

绵白糖转化酶(INV)活力的测量：选用改善的二氟苯水杨酸钠酶活性测定测量绵白糖转换酶的活性。土壤层与绵白糖在 50℃下塑造 3 h，测量其还原性糖释放出来总数，绵白糖转换酶促反应以1克土壤层每钟头葡萄糖水mg数表明(mg/(g·h)，50℃，3 h)。

β-葡萄糖苷酶(BG)、β-纤维二糖苷酶(CEL)、β-木甘酶(BXYL)、多酚氧化酶(PHOX)和乳酸脱氢酶(PEOX)的活力剖析选用莹光小型板无损检测技术。4-羟甲基-7-香豆素(MUB)在 365 nm 光波长处激起，能在
460 nm 处检验到莹光，它与某种化学物质(比如 β-D-纤维二糖)融合莹光特点消退，根据酶的水解反应特点将 MUB释放出，根据检验莹光量来表现酶的活性。

最先对 96 孔小型板依照不一样测量的酶开展序号、系统分区，灰黑色和乳白色小型板(在其中，灰黑色小型板测量非氧化还原反应酶促反应，乳白色小型板测量氧化还原反应酶促反应)分成缓冲溶液 缓冲溶液区、缓冲溶液 规范底物区、缓冲溶液 莹光底物区、待测液 缓冲溶液区、待测液 规范底物区、待测液 莹光底物区；次之为制取土壤层乳浊液实验试剂：称量等同于 1 g 沙质土的鲜土，放置 250 ml杀菌乳白色塑料瓶子中，添加缓冲溶液 125 ml，波动制取成土壤层乳浊液做为待测液；随后将配制好的缓冲溶液、被测液用 8 安全通道移液器依照次序添加早已序号系统分区的小型板中，最终将配制好的规范底物添加小型板，快速添加莹光底物水溶液，将小型板放进 25℃ 的恒温箱黑喑塑造，在其中教室黑板塑造 4 h 后上机操作测量(测量前面10 μl 0.5 mol/L NaOH 水溶液完毕反映)，白版塑造 20 h上机操作测量。

1.5 数据分析

酶促反应测量每一个试品设定 8 个平行面，运用平行面标值求平均值，每一个试品得到一个测量值，随后运用SPSS19.0 手机软件开展解决间的方差分析。