由以上結果得知油荼叶提取液中的花青素与黄酮类可能是抑止5α-R的主要物质条件,选用UPLC-TripleTOF-MS/MS对COLE中的酚类开展定性研究,結果在COLE中中国共产党发觉22种酚类。图8为空气负离子方式下的总正离子图,表4为COLE中酚类评定結果。RichardA.等分析证实芦丁(IC50>100μmol/L)、原儿茶醛(IC50=23μmol/L)具备I型5α-R抑止活力。此外还发觉儿茶酸等茶氨酸类化合物,在无体细胞情况下展现出合理的5α-R抑制效果,但在5α-R的全体细胞剖析中抑制效果不显著。周琛媛等在具备高5α-R抑止活力的油茶树蒲丙烯酸树脂组Fr8中分离纯化(选用固相萃取的方法),根据质谱分析和磁共振检查的方式开展构造评定出F1为3-O-没食子酰基-4,6,–α/β-D-吡喃葡萄糖水(GeminD),F4为3,4,6-3-O-没食子酰基-α/β-D-吡喃葡萄糖水(GAG)。这种化学物质均在COLE中被发觉,他们是COLE充分发挥5α-R抑止活力的物质条件。
本分析以5α-R为科学研究靶标创建酶促反应管理体系,根据明确粗酶提取液、NADPH、T的适合加上浓度值提升该管理体系,明确反映管理体系如下所示:PBS缓冲溶液(pH7.4)300μL,0.76mg/mL的粗酶提取液500μL,2mmol/L的T50μL,试品50μL,2mmol/L的NADPH100μL,37℃下反映30min。依照该管理体系用HPLC法精确测量临床医学上采用的I型5α-R缓聚剂度他雄胺的5α-R抑止活力,結果测出其IC50为6.24nmol/L确认该法靠谱合理。根据可重复性实验确认该反映管理体系具备可靠性。随后用该法进一步测量、较为不一样油荼叶提取液5α-R抑止活力,在其中50%酒精油荼叶提取液的5α-R抑止活力最大(IC50=259.56μg/mL),证实50%酒精油荼叶提取液是不确定性的绿色植物來源的5α-R缓聚剂。最终选用UPLC-TripleTOF-MS/MS对油荼叶提取液中的成分开展了剖析评定,結果共发觉22种酚类,在其中原儿茶醛、芦丁、儿茶酸、3-O-没食子酰基-4,6,–α/β-D-吡喃葡萄糖水(GeminD),3,4,6-3-O-没食子酰基-α/β-D-吡喃葡萄糖水可能是COLE充分发挥5α-R抑止活力的物质条件。因而本科学研究证实了油荼叶提取液是自然的5α-R缓聚剂,在医治雄激素依存性病症领域有着优良的应用前景。