2.2.2 蛋白二级结构预测分析与剖析

根据线上PredictProtein软件对AT遗传基因不一样复制编号的蛋白开展亚细胞定位发觉2个蛋白质均精准定位在细胞核；TMHMM跨膜螺旋式区分析表明,2个蛋白质均为膜外蛋白质，无跨膜结构工程。SOPMA构造预测分析说明,AT蛋白质中，无规律打卷占有率最大,均在43%上下,次之为x-螺旋式,约占35%，拓宽链约占18%,β-拐角约占4%，两蛋白质有一定差别(表4)。

2.2.3 蛋白三级构造预测分析与剖析

经SWISS-MODEL同宗模型发觉,114、148均融入酰谷丙转氨酶实体模型,但其构像略不一样(图1,2）。

2.3 过表达与RNAi影响资产重组质粒图谱

AT遗传基因的2个复制114与148过表达重组质粒见图3-A。AT遗传基因的2个复制114与148RNAi重组质粒见图3-B。

2.4 转基因水稻拟南芥检验

经潮霉素挑选T0转基因水稻拟南芥种籽后(图4),对T1开展pCambia1300-35s-114、pCambia1300-RNAi-114、pCambia1300-35s-148及pCambia1300-RNAi-148媒介潮霉素评定,结果显示(图5),目地质粒T-DNA均已插进拟南芥基因,说明拟南芥转基因水稻取得成功。

由表5得知,与野生型拟南芥种籽油酸各成份对比,影响114遗传基因(114R)表述会造成 聚醚和脂肪酸成分极明显的提升,提升力度分別为10.25%,38.33%,而软脂酸和a亚麻酸是极明显的降低,降低力度分別为10.57%,17.90%,明显降低脂肪酸的成分,花生仁烯酸的成分也是有降低,可是差别不明显；过表达114遗传基因(35s-114)会造成 软脂酸、脂肪酸和脂肪酸成分的明显提升,提升力度各自做到15.52%,37.88%,12.33%,而聚醚、a亚麻酸和花生仁烯酸含万方数据量做到极明显的降低,力度分別为50.22%,10.86%,29.93%。

在对饱和脂肪与不饱和脂肪剖析中,影响114遗传基因会使饱和脂肪成分降低,对不饱和脂肪无明显危害；过表达114遗传基因会提升不饱和脂肪油酸的成分,而对饱和脂肪无明显危害。