(2)底物浓度值
底物浓度值对酶解实际效果的干扰如图2,底物浓度值越大酶解高效率越低,做到高还原性糖提取率所需的時间就越长。在反映开展到60h的情况下底物浓度值为10g/L的产率为67.25%,底物浓度值为70g/L的提取率仅有48.42%。在现实生产过程中,过高或过低的底物浓度值都不太适合用于工业化生产,因而挑选30g/L、40g/L、50g/L开展提升实验。
(3)pH
pH对还原性糖提取率的危害如图所示3所显示,从图上能够看得出,伴随着pH的减少外切酶的酶解实际效果越变越好。在pH为3时反映60h还原性糖得率能够达到73.38%。因此 挑选pH为3、4、5开展提升实验。
(4)加酶量
加酶量对酶解实际效果的干扰如图4,加酶量越大做到反映均衡的時间就越少酶解实际效果就越高。加酶量为20U/g时反映60h的还原性糖得率为42.18%,加酶量为100U/g,反映36h就可达70.13%。虽然加酶量越大酶解实际效果就越高,但综合性经济发展要素,挑选40U/g,60U/g,80U/g开展提升实验。
2、正交实验結果
应用Minitab开展正交实验剖析,依照一般线性模型开展方差分析。偏差剖析结果显示,各要素的层次次序为:D(加酶量)>C(底物浓度值)>B(pH)>A(溫度)。表3的方差分析结果显示加酶量D,底物浓度值C是明显的影响因素与偏差剖析結果相一致。充分考虑工业化生产中的社会经济要素,pH越贴近中性化加上的缓冲剂就越低,原材料费用就越低因而挑选pH=5;较低的环境温度需要的耗能就越低,因而挑选溫度为450C。融合标准差与偏差結果剖析菊粉外切酶酶解最好的技术标准为A1B3C3D3,即挑选450C的反映溫度,pH为5,底物浓度值50g/L,加酶量80U/g做为酶解的最好反映标准。
3、可重复性实验結果
依照正交实验的结果开展认证实验,在450C,pH=5,加酶量为80U/g,底物浓度值为50g/L的标准下反映60h。开展6组平行面实验結果如表4,反复6组平行面实验均值得率为83.63%。汪伦记等应用试验室自提纯菊粉外切酶能够达到73.52%的酶解率(界定与文中中得率界定同样)。菊粉酶来源于不一样,菊粉原材料原产地不一样可能是酶解率可能是酶解率区别的首要缘故。
三、结果
本实验选用菊粉外切酶酶解菊粉生产制造高果糖浆,根据单要素实验与正交实验,得到各要素危害还原性糖提取率的尺寸次序先后为:底物浓度值>加酶量>pH>溫度。最后确认最好酶解标准为:底物浓度值为50g/L,加酶量80U/g(底物),pH=5,溫度450C,在这里最佳情况下能够得到83.63%的还原性糖得率。可重复性实验表明,该方法具备优良的可重复性,能为工业化生产高果糖浆给予理论来源与参照。