4、opo结构脂肽成分的锌鳌合工作能力
分离出来获得4组opo结构脂肽成分的锌鳌合工作能力如图所示3所显示。Fl和F2成分主要表现出较高的锌鳌合工作能力,各自为39.27%和25.90%,彼此之间具备明显的差别(P<0.05)。F3和F4成分鳌合锌的水平相对性较低,各自为18.97%和16.77%(P>0.05)。这一結果进一步表明肽成分中酸碱性碳水化合物的成分对其鳌合锌的水平有关键危害。刘华等从牡蛎肉中剥离获得的包含较多酸性氨基酸的牡蛎肽具备较高的锌鳌合工作能力。
因为静电感应相互影响,ζ电势差在肽与锌鳌合全过程中起着非常重要的功效。肽成分的ζ电势差与其说锌鳌合工作能力展现极强的成反比关联,ζ电势差越低越易于将锌离子集聚在其带负电的表层。
5、肽-锌螯合物的肠胃可靠性及锌的离解率
将肽一锌螯合物在pH 2.0,37℃标准下经胃蛋白酶消化吸收2h,結果发觉锌离子在消化过程中会不一样水平的从螯合物中释放出(表2)。从表格中还可以看得出,在胃消化吸收环节,F1成分中锌离子的离解率最少为5.35%;次之为F2成分,为8.77%;F3和F4成分中锌离子离解率相对性较高,各自为10.58%和12.33%。有研究表明,金属离子螯合物在弱酸性情况下较非常容易离解。除此之外,胃蛋白酶的水解作用也会造成 锌离子的释放出来。在肠消化吸收环节,锌离子很多从螯合物中释放出。F1-F4成分中锌正离子的离解率各自为:29.21%、32.09%、36.74%和37.71%。尽管胰酶的水解作用推动了锌离子的离解,可是依然能够看到伴随着肽成分ζ电势差的提升,锌的离解水平逐步提升。
肽-锌螯合物在肠胃环节的消化吸收可靠性对其消化吸收特别是在关键。在胃消化吸收环节,螯合物的稳定好,则锌离子不容易被植酸融合;在肠环节锌离子的离解则有利于其消化吸收。本分析中ζ电势差较低的F1和F2成分在肠胃消化过程中锌离子离解率比ζ电势差较高的F3和F4成分低,表明肽的表层负电有益于肽-锌螯合物在肠胃消化过程中的可靠性。
6、肽-锌螯合物中锌的微生物使用率
历经肠胃消化吸收后的肽-锌螯合物在Caco-2细胞模型上仿真模拟肠消化吸收,4组肽-锌螯合物中锌离子的微生物使用率如图4所显示。F2组螯合物中锌离子的微生物使用率最大,为37.1%,次之为F3组螯合物,为29.5%,F1和F4组螯合物中锌离子的微生物使用率最少,在16%上下,且彼此之间并没有显著性差别(P>0.05)。仿真模拟肠消化吸收后肽-锌螯合物中锌的微生物使用率由两部份构成:一是以化合态消化吸收的锌,二是以螯合物方式消化吸收的锌。从图4能够看得出,4组螯合物经消化吸收后,分散锌的成分中间并沒有显著性差别,均在6%~8%中间,因而,F2和F3成分中以螯合物方式消化吸收的锌成分数最多,各自为29.8%和21.4%;F1和F4成分较少,各自为8.5%和9.4%。这一結果表明有相当于一部分锌离子是根据肽-锌螯合物的方式开展消化吸收,且消化率不一样,进而造成 4组螯合物中锌的微生物使用率不一样。
Caco-2细胞模型会生成与结肠鳞状上皮细胞类似的刷状缘酶系,肽-锌鳌合在细胞模型上实现消化吸收时,最先会遭受细胞模型表层刷状缘酶的水解作用,造成 螯合物的离解。除此之外,有研究表明,金属离子与肽产生的一氧化氮合酶能够当作一个总体共享资源肽的消化吸收装运途径进到体细胞和血液循环系统。本实验中,F1成分的善电势差最少,F4成分孝电势差最大,可是两成分中锌的微生物使用率反倒较低,表明过高或过低的毒电势差都不利肽-锌螯合物中锌的微生物使用率。
四、结果
以历经Sephadex C 25疑胶柱层析分离出来得到的opo结构脂肽成分制取肽-锌螯合物,选用身体之外胃酸-肠液-Caco-2体细胞的三段式消化实体模型,科学研究肽的外表正电荷特性对肽-锌螯合物的肠胃消化吸收可靠性和微生物使用率的危害。本科学研究结果是:opo结构脂肽成分的ζ电势差与其说鳌合锌离子的工作能力反比,ζ电势差越低,鳌合锌离子的水平越强,在肠胃消化过程中,由较低ζ电势差的肽产生的肽-锌螯合物具备更好的消化吸收可靠性,锌离子的离解率较低;而在之后的Caco-2体细胞消化吸收操作过程中,过高和过低的ζ电势差都是会危害肽-锌螯合物的消化吸收。本分析的效果能够为开发设计高效率补铁剂给予理论来源,具备一定的实际意义。