以紅花籽粕的水解度和复原力为实验指标值,以超声波時间、超声波溫度、pH、酶使用量为实验要素,期货操作要素实验,剖析各要素对红花籽粕的水解度和复原力的危害。
在单要素实验的根基上,对危害胰蛋白酶的水解度和复原力的首要要素超声波時间、超声波溫度、pH、酶使用量等开展L9(34)正交实验,以明确胰蛋白酶酶解的最合适的技术标准。正交试验要素水准见表1。
在光波长275nm下,测得OD值A,結果如表2。
以L-色氨酸浓度值为横坐标轴,吸光度数值纵轴得L-色氨酸规范趋势图1。
由图1得到L-色氨酸规范曲线方程为:Y=0.0175X-0.0024,R²=0.9998,R²>0.997说明L-色氨酸在0-60μg/mL浓度值范畴内线性相关优良。
剖析三种胰蛋白酶没经超声波解决和超声波处置的酶魅力的转变,依据(1)计算公式出酶魅力。
试验结果显示,蛋白酶k的活力增强了2.96倍,枯草枯草芽孢菌中性化胰蛋白酶提升了1.91倍,蛋白酶的活力增强了1.17倍,蛋白酶k的活力提升更快,实验效果证实在55℃标准下要超音波解决10min推动了酶的溶解,提升 了胰蛋白酶的魅力,由数据信息看得出蛋白酶k提高更快,因此 选择蛋白酶k开展加工工艺科学研究。
在酶使用量为2.9%、pH7.0、超声波溫度为55℃的标准下,各自测超声波時间为5min、10min、15min、20min、25min的情形下水解反应1h,其水解度和复原力結果如图2、图3所显示。
由图2,图3得知,超声波時间的更改水解度和复原力都遭受了危害,水解度在超声波時间为10min的情况下较大,以后的由于時间提高,复原力降低显著,可能是酶降解,水解度降低;复原力在超声波時间为15min的情况下较大,其复原力最強。综合性考虑到,觉得超声波時间10min更为适合。
在酶使用量为2.9%、pH7.0、超声波時间为10min的标准下,各自测超声波溫度为35℃、45℃、55℃、65℃、75℃的情形下水解反应1h,其水解度和复原力結果如图4、图5所显示。
由图4得知,起先伴随着超声波溫度的提升,红花籽粕的水解度扩大,在超声波溫度是65℃时,水解度较大,随后逐渐发生下降趋势,表明在65℃以内时可能是因为热转性导致的水解度较大;由图5得知,起先伴随着超声波溫度的提升,红花籽粕的复原力扩大,在超声波溫度是55℃时,复原力较大,随后逐渐发生下降趋势,可是降低不显著。综合性考虑到水解度、复原力等要素,觉得最好超声波溫度为65℃。