草鱼是在我国具体的淡水鱼类之一，被普遍作为很多鱼种产品的原材料。殊不知，鱼种带有充足的蛋白，易腐坏霉变，因而科学研究草鱼冷藏方式有着关键的实际意义。传统式的冷藏方式有冷藏、超低温、辐照度、高压、有机化学及微生物冷藏法。在其中可食膜因具备低碳环保、无毒性没害，可以提升 食物的产品质量和增加食品保质期等优势，促使大家对其愈来愈有兴趣。近些年科学研究较多的可食膜原材料有含糖量、蛋白、脂类或一些中性化生物大分子原材料的组成物，且大家更加偏向于从鱼身自身得到冷藏原材料。近几年来，很多专家对鱼皮膜愈来愈有兴趣，Gimenez等证实，根据在大鱿鱼果胶中添加一种碱性蛋白酶开展水解反应后，制取获得的大鱿鱼明胶纸的抗氧化明显增强。也有专家学者在冷藏储存削皮三文鱼时，用带有2％壳聚糖镀层对其开展冷藏，实际效果要显著好于三文鱼或比目鱼蛋白质粉镀层。而鱼鳞片做为草鱼生产制造生产过程的边角料，带有充足的胶原，其酶解物质具备抑止细菌生长发育和液汁外流的功效，根据鱼鳞片果胶制取可食膜遮盖鱼身，既能够变废为宝，又可以增加鱼种的保存期，维持鱼种原有的口味。

一直以来，大家较多应用生成抗氧剂开展食物的冷藏，但传统式生成的还原剂如叔丁基对甲基小茴香醚(BHA)、二丁基甲基二甲苯(BHT)等自身很有可能具备潜在的毒副作用，对身体造成不良影响。而近些年，具备抗氧化性活力的自然多酚类物质马郁兰提取液，愈来愈多的被使用到食物中，马郁兰提取液的抗氧化和抗菌性已被普遍确认。可是，针对马郁兰提取液运用于鱼鳞片膜是不是会产生机械设备隔绝，并根据花青素一蛋白的相互影响而降低活性物质的释放出来，有关科学研究仍较少。植酸作为一种金属材料抗氧化剂，在色调维护和抗氧化性层面充分发挥着关键功效，在鱼鳞片膜中添加植酸，也想要能够提升 鱼鳞片膜的抗氧化和感观特点。

目前为止，大家对鱼鳞片可食膜的分析还较少，对添加马郁兰提取液和植酸是不是能明显提升 鱼鳞片可食膜的抗氧化还不太清晰。根据以上缘故，本试验致力于讨论鱼鳞片果胶、马郁兰提取液及植酸对增加草鱼货架期的功效，以求为工业生产鱼鳞片果胶可食膜给予理论基础。

一、原材料与方式

1、关键实验试剂原材料

草鱼、马郁兰叶：当地销售市场选购；胃蛋白酶：北京市德国拜耳迪生物科技有限责任公司；植酸：北京医药临床实验核心；没食子酸、NaOH、酒石酸钾钠、KCL、硫代硫酸钠、工业乙醇、考马斯亮蓝、吡啶、正丁醇、丙二醛、1，1，3，3-四乙氧基丙烷气、凡士林、巯基乙醇、溴酚蓝、正丁酸、SDS、平板电脑记数琼脂粉：国药控股化学药品有限责任公司给予；硫酸铵、冰乙酸：西陇科学股权有限责任公司给予；三磷酸腺苷(ATP)、β-硫代巴比妥酸(TBA)：天津北辰华康试剂厂；牛血清蛋白：杭州市吴天生物科技服务项目有限责任公司给予。

2、要实验仪器

紫外线光度计(UV-2600)：尤尼柯(上海市)仪器设备有限责任公司，旋转蒸发器(SHB-3)：上海市申生高新科技有限责任公司；离心脱水机(SC-3612)：安徽省中科中佳仪器设备有限责任公司；组织捣碎机(PT-2100)：法国Kinematica企业；涡流切换阀(S025)：法国IKA企业；pH计(UB-7)、PL602-L电子分析天平：法国Sartorius企业；半少量蒸馏装置(KDY-9820)：北京市瑞邦兴业科技有限责任公司；电泳仪(MiniProtean11unit)：英国BIO-RAD企业；液相色谱(LC-10AT)配紫外线探测器：Et本安捷伦仪器企业；离子交换柱：VP-CDSC18(4.6mm×250mm×5μm)。

3、方式

（1）鱼鳞片果胶的制取

应用冷藏的新鮮草鱼鱼鳞片，在-18℃下储存不超过两个月，将清洗并干躁的鱼鳞片与双蒸水(1:10，w／v)混和，用1mol／LHCL调整pH至2.0，添加5％的胃蛋白酶(1:3000)后，放置60℃恒温水浴锅中反映6h，接着将水溶液放置开水浴中10min灭酶。用1mol／LNaOH将水溶液pH调至至7.0，用医用纱布过虑果胶水溶液并搅拌，将匀浆于3600r／min下离心式3min，将所得的上清液用旋转蒸发器于60℃转动挥发30min，将浓缩果胶水溶液(蛋白质成分：28.56mg／mL)于4℃下储藏，蛋白质成分选用双缩脲测定方法心，結果为三次测量的均值。

（2）马郁兰提取液的制取

关键选用Gomez等的办法制取马郁兰水提物，并对办法开展小量改善。精确称量10g马郁兰叶，碾磨碎后，在65℃下获取10min，将提取液放置旋转蒸发器中于60℃下水蒸气蒸馏30min，其花青素成分达2448.56μg／mL。花青素成分选用F01in-酚测定方法，以没食子酸为标准物质，用紫外线光度计于750nm下测量，結果为三次测量均值，总酚浓度值(μg／mL)以没食子酸计。

（3）镀层水溶液的配制及解决

在草鱼试品表层各自涂有四种含有12mg／mL凡士林的水溶液，全部膜水溶液的成份按以下占比开展配置。

F0组：对照实验，草鱼表层不涂层；Fl组：草鱼表层涂有鱼鳞片果胶液(25mg／mL)；F2组：

草鱼表层涂有含200μg／mL马郁兰提取液的鱼鳞片果胶液(25mg／mL)；F3组：草鱼表层涂有含200μg／mL植酸的鱼鳞片果胶液(25mg／mL)；F4组：草鱼表层涂有含20099／mL马郁兰提取液及200μg／mL植酸的鱼鳞片果胶液(25mg／mL)。

试品为在本地销售市场选购的新鮮去内脏器官草鱼，并清理整洁，F1～F4组试品各自泡浸在对应的4℃水溶液中1.5min，并与对照实验F0一起晾晒。接着将5组草鱼试品F0～F四分别放置聚丙稀拖盘中，并且用高压聚乙烯保鲜袋严实遮盖，包裝好后于4℃电冰箱内储存。每2天随机抽取草鱼试品开展微生物菌种、有机化学和感观剖析，每一个试品平行测定三次。

（4）SDS-聚合硫酸铁凝胶电泳测量

根据SDS-PAGE谱图剖析马郁兰提取液、植酸与黄原胶的相互影响。将果胶水溶液与双蒸水混和，随后与上样缓冲溶液(100mmol／LTris-HCL、1.6％SDS、8％凡士林、8mmol／L巯基乙醇和0.02％溴酚蓝)按1:1的比率混和，蛋白终浓度值1mg／mL。试品于100℃下热转性4min，并在添加4％浓缩胶和10％分离出来胶的电泳槽中开展剖析，操纵电流量在25mA，先后在各加样孔加样9μL。待溴酚蓝显色剂抵达疑胶底端边沿时可终止电泳原理，取下并砸开玻璃，取下疑胶，上色、褪色，直至蛋白质区带清楚，开展图象扫描仪，直至寻找光密度值有差别的杂带。

（5）试品储藏实验

①抗菌实验为了更好地调查膜的抗菌特性，将5g鱼类在灭菌室内环境中添加45mL无菌检测盐水并匀浆1min，匀浆后的试品用9mL无菌检测盐水逐步稀释液至适宜的浓度值，并且于36℃下塑造2天，用平板电脑计数法测量菌落总数。在数据分析以前，将病菌数转换为log10菌落形成企业／克(CFU／g)，每一个试品重3次，测算均值。

②挥发物盐基氮(TVB-N)成分的测量

TVB-N按半少量定氮法开展测量。每一个试品在贮藏期内反复测量三次。精确称量10.00g碾磨后的试品，并添加100mL双蒸水，匀称拌和并波动30min，在离心脱水机5000r／min离心式10min，获得上清液，过虑，滴定剂，选用半少量定氮法测出，每过2天测量一次。

③β-硫代巴比妥酸(TBA)值的测量

TBA值的测量选用Krik和Sawyer所运用的方式 。