3、实验试剂

（1）氢氧化钠溶液水溶液即(NaOH)=200g·L^-1]：200g氢氧化钠溶液(NaOH，化学纯)溶解冷却水后稀释液至1L；

（2）二甲苯(CH₃C₆H₅)；

（3）胃蛋白酶(Diastasum)能使淀粉水解为麦牙糖，具备专一性，市售品可按使用说明应用，一般糖化工作能力为1：25(或1：50)，当气温超出85^oC或有酸减存有时就失去了活力。长期性存储后活力即将减少。配出的酶水溶液，活力减少更快，应现配现用，存储于电冰箱储存，在应用前解决其糖化工作能力开展测量，以明确酶的使用量，方式是：用已经知道量可溶性淀粉，加不一样量的胃蛋白酶水溶液，置55^oC～60^oC水浴中隔热保温1h后，用碘液枪查是不是存有木薯淀粉，以明确酶的魅力及水解反应试件时要添加的酶量。如无市面上胃蛋白酶，可以用麦芽糖替代。

制作方法如下所示：

取大麦麸200g，在水中泡浸12h，铺平于塘瓷盘里(约1cm厚)，维持一定环境湿度，令其出芽数日至幼苗约长1cm后，在25ºC～35ºC将麦芽糖及麦麸千燥并碾成粉，每100g粉末状添加20%乙醇溶液200mL泡浸24h，随后用亚麻布榨取过虑，渗沥液里加二倍于渗沥液量的酒精开展沉积，沉积经布氏漏斗旋蒸后，再置乳钵中与酒精一起碾磨，再旋蒸，沉积用酒精和医用乙醚清洗，最终在盐酸空气干燥器中干躁储备用。用时按胃蛋白酶同样方式，测量其糖化力。

（4）盐酸溶液[c(HCI)=6mol·L^-1]：取浓HCl 500mL放水至1L；

（5）聚磷酸盐缓冲液：称量Na₂HPO₄·2H₂O11.876g溶解1L水里。另称量KH₂PO₄9.079g溶解另1L水里。随后取Na₂HPO₄水溶液300mL与KH₂PO₄700mL混和就可以。

4、操作流程

称量吹干研磨并根据60目筛试件2.000g～5.000g，放置放有伸缩过滤纸的布氏漏斗内，先用医用乙醚50mL分5次洗去人体脂肪(试件人体脂肪较较少时，并不洗去)，再换约85%酒精100mL洗掉可溶糖原，将残余物移进250mL三角瓶中，加小量凉水使试件潮湿，快速添加约100mL开水，并放置开水浴中加温lh，使木薯淀粉彻底胶化。胶化时木薯淀粉粒的外膜裂开，水可透入木薯淀粉粒的內部，这时候木薯淀粉淀胶澎涨，产生稠状水溶液。

1h后取下三角瓶，制冷至约50ºC～55ºC，添加胃蛋白酶0.03g～0.05g。此胃蛋白酶须事前放水((3mL～5mL)，用玻棒碾磨，随后再添加，使它非常容易与水溶液混和，不然胃蛋白酶粉剂很有可能枯于三角瓶的内腔，或在液位上产生一小块，进而变弱了胃蛋白酶的功效。添加胃蛋白酶之后，马上添加聚磷酸盐缓冲液10mL，二甲苯5滴，用瓶塞塞紧，随后将三角瓶置放于45^oC～55^oC恒温箱中隔热保温2白天黑夜或更长。

隔热保温二白天黑夜后，取下小量标准溶液，放到盖玻片上，加2滴I₂-KI水溶液，用光学显微镜查验是不是也有木薯淀粉粒。若木薯淀粉并未彻底糖化，应将水溶液再次烧开，制冷至50^oC～55^oC，再添加木薯淀粉醇及二甲苯，变道后再次在恒温箱中水解反应。

糖化终止后，将水溶液制冷，洗入250mL容量瓶中，滴入中性化Pb(OAc)₂水溶液3mL～7mL以沉积蛋白，置放稍回应后，再试加Pb(OAc)₂至无絮状物沉积才行。放水滴定剂，搅拌后过虑。

取渗沥液100mL于250mL三角瓶中，加盐酸溶液（实验试剂4)10.0mL放进开水浴中3h，塞外含有空气冷凝管的瓶塞，使木薯淀粉经酶水解反应形成的麦芽糊精和麦牙糖寄内酸水解反应为葡萄糖水。

3小时后将內容物制冷，用烧碱水溶液(实验试剂1)中合至鲜红色并使测纸变成深蓝色才行(约需NaOH10mL)。将已中合的糖液洗入250mL容量瓶中，加饱和状态Na₂SO₄，除去过多的Pb，放水滴定剂，过虑，待测液预留。

5、結果测算

还原性糖（%）=[（P*V0*V）/m*V1]*10^-3

式中：P——精规范物质的量浓度，mg·L^-1；

Vo——滴定管10mL费林实验试剂所消耗标准葡萄糖水液的量，mL；

V₁——滴定管10mL费林实验试剂所耗费待测液的量，mL；

V——待测液的总容积，mL；

10^-3——将mL计算成L的指数；

m——试品品质，g。

木薯淀粉，%=还原性糖%×0.9

0.9——为木薯淀粉单元式量为162.1，葡萄糖水相对分子质量为180.1，二者之之比0.9。

6、常见问题

（1）马上原试件中单糖、双糖等可溶糖原去除，以保存木薯淀粉以及他食物残留。

（2）木薯淀粉在酸或酶中水解反应程序流程与碘的呈色反应如下所示：

水解反应程序流程：木薯淀粉→蓝麦芽糊精→红湖精→没有颜色湖精→麦牙糖→葡萄糖水

与碘的呈色反应：深蓝色深蓝色鲜红色没有颜色没有颜色没有颜色