一、方式选用的根据
木薯淀粉可立即被酸水解反应转化成葡萄糖水;或被酶水解反应转化成麦牙糖和麦芽糊精,寄内酸水解反应转化成葡萄糖水,可测量葡萄糖水成分(还原性糖)再估算出木薯淀粉成分。此外,木薯淀粉经分散化和酸解后具备一定的旋光性,也可以用旋光测定方法木薯淀粉成分。这儿要强调的是,酸水打法不但使淀粉水解,并且也可以溶解木质素,結果形成了具备复原力的麦芽糖醇、阿拉伯糖等单糖,使木薯淀粉测量結果较高。
有些人曾以鼓皮、小米手机壳、苞米及红薯等试件用糖化酶法及立即酸水解反应测定方法木薯淀粉含最,結果糖化酶法均较立即水解反应法为低,由于立即酸水打法中木薯淀粉与半化学纤维家均被溶解为还原性糖,而糖化酶法仅能糖化木薯淀粉,半化学纤维索则失灵,因而木质素留于沉淀中,将糖化后的渗沥液与沉淀各自水解反应后滴定管糖,二者結果之和与立即酸水打法滴定管糖的結果相贴近。用立即酸水解反应测定方法木薯淀粉,易将木质素误作木薯淀粉,以至得到问题的結果。这节除详细介绍經典的酶水解反应法外,还强烈推荐谷类种籽粗木薯淀粉测量的国家行业标准法—旋光法。
二、谷类种籽中粗木薯淀粉的测量(CaC12-HOAc萃取法-旋光法)
1、方式基本原理淀粉是含糖量高聚物,可以用CaC12-HOAc(密度1.3,pH2.3)为分散化和汽化剂,在一定的酸值和加温情况下,使木薯淀粉融解和一部分酸解,转化成具备一定旋光性的溶解物质可以用旋光计测量。用此方法时,各种各样木薯淀粉的溶解物质的比旋特定为203。全国各地谷类木薯淀粉统计分析方法规范化科学研究学组觉得,此方法結果的可重复性好,实际操作简单、迅速。
2、仪器设备及机器设备旋光计:电加热控温凡士林浴(±1°C)。
3、实验试剂
(1) CaCl2-HOAc水溶液:融解5份重的CaC12•2H2O(分析纯)于6份水里,调整其密度(20℃时)为1.30。此水溶液约含CaC12330g•L-1。再向此水溶液中添加冰HOAc(每1000mL约加1.3mL冰HOAc),用pH计检测调整至pH2.3,过虑至清亮才行。
(2)磷酸二氢钠水溶液:称量ZnSO4•7H2O 30g溶解100 mL水里。
(3)亚铁氰化钾水溶液:称亚铁氰化钾(K4Fe (CN )6•3H2O,分析纯)15g溶解100 mL水里。
4、操作流程
(1)待测液制取称量研磨谷类试品2.500g,放进250 mL三角瓶中(与此同时测量水份),添加CaCl2-HOAc水溶液10mL和6个~八个小玻璃弹珠或粒大石英沙,轻轻地混匀,不必让试品粘在瓶底。再用CaC12-HOAc水溶液50mL沿瓶壁渗滤粘附在瓶内壁的试品,盖紧小布氏漏斗,放在1180±10C控温油浴中,使之在5 min内做到控温,再次控温加温25 min。在升温历程中不必拌和,使其当然分散化水解反应(可以用玻棒将瓶壁附属物送到液位下列)。煮毕马上取下,放置水流制冷槽中充足制冷(约15min),随后用30mL上下水份次高质量地清洗所有内容物转到100mL容量瓶中,添加磷酸二氢钠水溶液1mL,充足混匀后再添加亚铁氛化钾水溶液1mL,再混匀,若有泡沫塑料,可加少量酒精清除之,自来水定溶,用中等速度过滤纸过虑,弃去初渗沥液(15mL±20mL)。取回应液待测。
(2)测量:测量先用清澈的待测液洗旋日光灯管2次~3次,随后将水溶液放满管内,使支管液态呈一突起,将运动的圆玻璃镜片与旋日光灯管竖直方位插进盖紧(可防止留出汽泡)。将管盖拧紧,查验管内是不是有汽泡。随后测读旋光仪上的旋光度或检糖计上的0S,取3次测读的平均值。
5、結果测算
α—旋光视角的读值;
L—旋日光灯管长(dm);
m—试品品质(g);
203—木薯淀粉的比旋;
H—试品水份成分,%。
6、常见问题
(1) CaC12-HOAc水溶液的酸值务必调整至pH2.3(用酸度计调节),若pH>2.5,易使分散化液浓稠,难以过虑;若pH<2.5,易造成木薯淀粉进一步水解反应而减少比旋。
(2)试品中富含水溶糖原,须先用80%酒精洗糖,但绝大部分谷类种籽中水溶糖成分微乎其微,一般可忽略,无须开展脱糖办理手续。
(3) CaC12-HOAc水溶液应在放进凡士林浴前约5mi。添加,防止试品枯附在瓶底,危害分散化实际效果
(4)实验证实,在加温前期拌和,木薯淀粉易结团;但在放进凡士林浴前务必轻轻地摇晃,使试品匀称分散化在CaC12-HOAc物质中,勿使试品粘在瓶底,必需时可以用铲形玻棒将其搅开,加温后使其当然水解反应,测量效果的可重复性不错。
三、麦麸、小米手机壳、苞米、红薯、木本植物(青饲料等)的叶茎中面粉的测量(木薯淀粉糖化酶一酸水打法)
1、方式基本原理木薯淀粉先经过胃蛋白酶水解反应成麦牙糖及麦芽糊精,寄内酸水解反应,最终成葡萄糖水。测量所取得的葡萄糖水量,就可测算木薯淀粉成分。
2、仪器设备及机器设备恒温箱(隔热保温60℃下列创业孵化器。
申明:文中常用照片、文本来源于土壤层农牧业化学成分分析方式,著作权归原作全部。