5、显色反应時间危害

取50ml容量瓶一只，添加CAT样液(酶促反应低于2U／mL)1.00mE、H202栽培基质液2.00mL，25℃水浴反映30min后马上添加1.5mL盐酸停止反映，加碘酸钾5mL，60℃水浴加热40min，制冷，加木薯淀粉3mL，滴定剂，以纯净水作参比液，在光波长600nm处测OD值A，与此同时进行酶试剂空白OD值A₀测量，依据△A(△A=A₀一A)明确过氧化氢酶活力E。其他情况不会改变，只更改反应速度，测量5～70min内A值(图3)。30min内OD值与時间有线性相关。不难看出，H₂O₂空气氧化KI具备零级反应的特性，生成物初始浓度值立即影响了反应速率，40min后反映彻底。因此显色反应時间确认为40min。

6、酶促反应時间危害

取过氧化氢酶切削液10.00mL作检测液，其他情况不会改变，更改酶促反应時间，测量△Ao以時间t为横坐标轴，△A为纵轴作酶促反应曲线图。由图4得知：在反映原始环节的0～30min内，In△A与时长正相关，合乎酶促催化反应一级反应特点。30min后，△A趋向稳定。因而，明确酶促反应時间为30min。

7、工作中曲线图

取过氧化氢酶标液0.00—20.00mL作检测液，在最好情况下进行△A测量，制作工作中曲线图(图5)。过氧化氢酶魅力E(U／mL)在0.002～0.04U／mL范畴内与△A呈优良的线性相关：△A=0.06843 16.9866E(U／mL)，r=0.9970。按实验方法平行测定空缺10次，相对标准偏差s为0.01，检出限为0.0018U／mL，最少检测量做到0.15U。

8、影响实验

取10.00mL过氧化氢酶标液作检测液，依照实验方式调查生物组织并存氧化性化学物质影响状况。結果发觉，2倍于基底液浓度值的葡萄糖水、葡萄糖、乳清蛋白、半乳糖不危害酶比活度测量，数据误差低于5％。

9、试品剖析

H₂O₂是蛋白质食物细胞的新陈代谢正中间物质，因此肝部中有着较多的CAT，试验选择鱼肝部CAT萃取液做剖析。将购买鲜鱼杀掉，脱离肝部，用过滤纸吸走，秤重，按1:10(w／V)添加1～4℃冷0.25mol／L绵白糖液，匀浆，1500r／min下离心式5min，取上清液，用0.25mol／L绵白糖稀释液50倍，制取酶粗液，1～4℃自然环境中储存。取酶粗液1.00mL进行活力测量，平行面六次，测算均值和相对性相对标准偏差，测算利用率。

利用率操纵在96％～105％范畴内，表明粗酶液并存化学物质不危害酶促反应测量；依据测量結果可计算出来鱼肝CAT成分各自为550U／g(鲫鱼)和537U／g(鲤鱼)。