8、响应面提升试验设计与結果
(1)响应面试验设计
依据Box-Behnken结构设计,开展四要素三水准实验,提升酶輔助超声波获取阿尔泰金银花黄酮类物质的提炼加工工艺标准。实验結果见表2。以黄酮类物质获取率是指标值,根据Design-ExpertV8.05手机软件对表中实验统计数据开展多元线性回归线性拟合,得到黄酮类物质获取率(Y)对酶加上量(A)、乙醇浓度(B)、获取時间(C)和获取溫度(D)四要素的二次多种重归仿真模拟方程式为:Y=18.03-0.15A-0.55B-0.35C-0.12D 0.39AB-0.59A2-0.93B2-0.42C2-0.41D2。
0.43AC 0.018AD-0.42BC 0.012BD-0.072CD
对该模式开展方差分析,結果如表3所显示,该回归分析F值14.88,P<0.0001,方程式实体模型做到极明显;决定系数R2=0.9320,校准指数AdjR2=0.8639;失拟项超过0.05,失拟不明显,表明线性回归方程线性拟合情况优良;变异系数C.V为1.63%,说明实体模型的再现性非常好,因而还可以使用该实体模型提升阿尔泰金银花黄酮类物质的酶輔助超声波获取加工工艺。由各要素A、B、C、D的F值(或P值)尺寸能够得到各要素对黄酮类物质得率危害尺寸次序为B>C>A>D。B、C的P值均低于0.01,表明乙醇浓度和获取時间对黄酮类获取危害极明显。AB、AC、BC的P值低于0.01,表明酶加上量和乙醇浓度、获取時间,乙醇浓度和获取时间之间有显著的配对t检验;而AD、BD、CD的P值超过0.05,说明她们中间的功效对黄酮类物质获取率沒有显著的危害。不一样因素配对t检验的响应面分析图见图8。根据DesignExpert8.0.5手机软件剖析得到阿尔泰金银花黄酮类物质纤维素酶輔助超声波获取的最好工艺技术标准为:酶加上量1.42%,乙醇浓度47.10%,获取時间38.19min,获取溫度39.28℃;在这里加工工艺标准下,阿尔泰金银花基础理论预测分析获取率是18.16%。
(2)认证实验
为检测响应面法提升后的加工工艺稳定性,考虑到实验过程的可行性分析,融合单要素试验結果,将以上获取加工工艺标准调整为:酶加上量1.4%,乙醇浓度47.0%,获取時间38.0min,获取溫度39.0℃。在这里前提下,开展3组平行面实验,所得的阿尔泰金银花黄酮类物质获取率平均值为18.02±0.24%,与标准偏差的相对偏差为0.8%,线性回归方程估计值与真实值相符合,表明应用响应面法提升获得的建模主要参数精确靠谱,能真正反应各要素对阿尔泰金银花黄酮类物质获取率的危害。
三、探讨
文中讨论了纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和中性化胰蛋白酶对超声波获取阿尔泰金银花黄酮类物质的协助功效,結果发觉他们均能提升黄酮类物质的获取率,但比较之下,纤维素酶在水溶液pH=4时功效较大 。在提炼全过程中,纤维素酶水解反应可毁坏植物细胞的植物细胞,推动了其胞内所含黄酮类类物质的很多外渗,再融合超声波的功效,水溶液中化学物质浓度值扩大,获取率获得很大提升 伴随着料液比的扩大,黄酮类物质的获取率也持续扩大,在1:40之后,获取率不会再提升,趋向轻缓。根据此,依据Box-Behnken结构设计,挑选对获取率危害很大的要素:酶加上量、乙醇浓度、获取時间和获取溫度,开展四要素三水准实验,响应面提升阿尔泰金银花黄酮类物质的纤维素酶輔助超声波获取加工工艺,最好获取加工工艺标准为:pH为4,料液比1:40,超声波输出功率90W,酶加上量1.4%,乙醇浓度47.0%,获取時间38.0min,获取溫度39.0℃,在这里加工工艺标准下阿尔泰金银花黄酮类物质获取率可以达到18.0%之上,高过早期流回获取加工工艺科学研究得到的获取率17.05%;且该办法简便高效率、低成本、便于实际操作。科学研究结论能为阿尔泰金银花以及黄酮类物质的深层次开发设计给予科学论证。
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