2、菌种MCDA02的评定菌种MCDA02为革兰氏阳性菌呈阴性短链球菌(图2b),无芽胞。该菌种在LB固态塑造上塑造48h后:淡黄色,不全透明,表层光洁潮湿,环形,边沿整齐,核心稍凸起,易挑菌(图2a)。该菌种果胶酶、吲哚实验、氯化氢造成、VP实验、磷酸盐复原实验、尿素溶液酶、柠檬酸钠盐均呈呈阴性,抗霉素、触碰酶实验均为呈阳性(表1)。菌种MCDA0216SrDNA序列递交GenBank(登录名:MH454348),BLAST核对后发觉菌种MCDA02与Microbacteriumesteraromaticum的开放阅读框最大。运用MEGA9.0手机软件根据临接法搭建系统发育树(图3),菌种MCDA02与Microbacteriumesteraromaticum亲缘关系近期,将菌种MCDA02评定为Microbacteriumesteraromaticum。现阶段还没见酯香微链球菌产几丁质脱乙酰酶的报导。
3、发醇培养液成份对菌种MCDA02发醇产CDA的危害
(1)发醇培养液氮源对菌种MCDA02产酶的危害
氮源对菌种MCDA02发醇产酶的干扰如图4,选定的8种不一样的氮源中,木薯淀粉为氮源时该菌种产酶最大,次之为乳清蛋白,其相对性酶活也做到了70%之上,玉米粉相对性酶活最少仅有10%。因而最后采用木薯淀粉做为发醇培养液的氮源。
(2)发醇培养液氮源对菌种MCDA02发醇产CDA的危害
氮源对菌种MCDA02生长发育的危害如图所示5,选定的11种不一样的氮源中,加上蛋白胨时该菌种产酶最大,次之为玉米浆,其相对性酶活也做到75%之上,而其他氮源相对性酶活均为做到70%。因而最后采用蛋白胨做为发醇培养液的氮源。
(3)发醇培养液碳酸盐对菌种MCDA02发醇产CDA的危害
碳酸盐对菌种MCDA02生长发育的危害如图所示6,选定的9种不一样的碳酸盐中,加上ZnSO4时该菌种产酶最大,随后是KH2PO4,其相对性酶活达75%之上,加上CuSO4时相对性酶活最少,不够25%。因而最后采用ZnSO4为配置发醇培养液常用碳酸盐。
4、发醇前提对菌种MCDA02发醇产CDA的危害
(1)发酵时间对菌种MCDA02发醇产CDA的危害
发酵时间对菌种MCDA02生长发育的危害如图所示7,发酵时间在36h~48h时,产酶量明显提升。发酵时间处在48h~72h中间时,产酶量增速缓解。发酵时间做到72h时产酶量做到最高处,发醇72h后菌种MCDA02产酶量逐渐降低。
(2)发酵温度对菌种MCDA02发醇产CDA的危害
发酵温度对菌种MCDA02生长发育的危害如图所示8,在30℃时菌种MCDA02产几丁质脱乙酰酶的量最大。溫度超出30℃时,菌种的产酶量快速降低,溫度抵达40℃时,菌种MCDA02的相对性酶活低至10%上下。
(3)发醇培养液起止pH对菌种MCDA02发醇产CDA的危害
发醇培养液起止pH对菌种MCDA02生长发育的危害如图所示9,伴随着发醇培养液原始pH的上升,菌种产酶工作能力随着提高,pH为8.0时,产酶量做到最大。pH再次上升,菌种MCDA02产酶量减少,pH为10.0时,菌种MCDA02相对性酶活低至20%下列。
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