猕猴桃亦称羊桃、阳桃，猕猴桃科，属于浆果，落叶木质藤本植物果实，维生素 C 含量丰富。食用猕猴桃有降低血中胆固醇浓度、预防心血管疾病、促消化、降血脂、防治动脉硬化、改善心肌功能、防治心脏病、防癌抑肿瘤、增强体质等功能。铁是人体必需微量元素之一，与人类健康有着密切的关系。铁离子血红蛋白的重要组成成分，也是部分氧化还原反应所需酶激活剂。罗莹[1]以磺基水杨酸与铁的络合物为例，研究了磺基水杨酸和铁可用于检测络合铁中铁离子的浓度。

本实验采用抗坏血酸为还原剂，邻二氮菲为显色剂，用可见法测定汶川县三江镇猕猴桃中铁元素的含量，并进一步探还原剂加入量、显色剂加入量、放置时间、反应温度等因素对实验结果的影响，最后绘制出来了汶川猕猴桃标准亚铁的标准曲线。本方法操作简便，实用范围广，准确度高、精密度好，重现性好，回收率高。

1 实验材料与操作

1.1器材及材料选取

材料：猕猴桃 500 g(汶川县三江镇农户)：FW-100 高速万能粉碎机；T6 新世纪紫外分光光度计；
DHG-9075AD 电热恒温鼓风干燥箱；DL-1 万用电热炉；BSM120.4分析电子天平；SX2-4-10 马弗炉。

试剂：铁标准溶液(0.010 mg/mL)：称取 0.0441 g 铁粉溶于浓盐酸 7.0 mL，转移至 1000 mL 容量瓶中，移取 10.0 mL 铁标准溶液于 100 mL 容量瓶中，稀释并定容至刻度线，即可获得 0.010 /mL 的铁离子浓度。乙酸—乙酸钠缓冲溶液：称取 0.32 g 无水醋酸钠于烧杯中，加入少许蒸馏水，并加入 5.0 mL 质量分数为 98 %的乙酸，努力搅拌。搅拌均匀后，转移到 100 mL 容量瓶中，稀释并定容到刻度线，即得。邻二氮菲溶液(1.5 g/L)：准确称取0.15 g邻二氮菲溶于约2 mL无水乙醇中，充分混匀后，移入 100 mL 容量瓶中并定容到刻度线，并避光保存。抗坏血酸溶液(5 g/L)：称取 0.5 g 抗坏血酸溶于一定量的蒸馏水中，转移至 100 mL 容量瓶中并定容到刻度线，即可。

1.2 样品处理

准确称取 1.0000 g 烘干的猕猴样品于瓷坩锅中，慢慢用小火在可调式电炉上炭化至无烟，随后移入马弗炉中，用 800 ℃灰化2 h，再冷却。在可调式电炉上小火加热，需要重复多次确保能消化完全。灰化后放冷，用浓度为 4 mol/L 盐酸将灰化留下的灰分，然后将该消化液移入 25.0 mL 容量瓶中并定容至刻度，摇匀，待测。

1.3标准曲线绘制

准备 6 个 25 mL 的容量瓶，分别移取 0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL 的 0.010 mg/mL 铁的标准溶液，然后再分别依次加入 5.0 mL 乙酸—乙酸钠缓冲溶液、1.00 mL 抗坏血酸、2.00 mL邻二氮菲溶液，加完溶液后用蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，大约放置 15 min 后于 510 nm 处测各溶液的吸度，以蒸馏水做参比，浓度溶液做空白对照，扣除空白溶液吸光度后，以吸光度为纵坐标，铁浓度为横坐标，绘制标准曲线图，并计算出该曲线图的线性回归方程及相关系数。该实验数据表明该曲线线性回归方程为：Y=78.159X，线性相关系数 R=0.9999，线性相关良好。

1.4 样品测定

准确移取事先处理好的猕猴桃消化液 5.0 mL，置于 25 mL 容量中，随后依次加入 1.0 mL 抗坏血酸溶液、5.0 mL 乙酸—乙酸钠缓冲溶液、2.0 mL 邻二氮菲溶液，摇匀，加完溶液后用蒸馏水稀释至刻度线，静置 15 分钟。用紫外可见分光光度计在 510 nm 波长处以 0.00 mL 铁标液为空白进行参比校正，测定样品的吸光度，并通过标准曲线求出样品中铁的含量，平行做三次取平均值。实验测得该猕猴桃中铁的含量为 0.1383 mg/g。

2 影响因素的讨论与结论

2.1 还原剂加入量对实验测定的影响

取 7 个 25 mL 容量瓶，在每一个容量中准确移取 2.00 mL 铁的标准溶液，然后再依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸钠缓冲溶液 2.00mL 邻二氮菲，最后依次分别加入 1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、6.00 mL、7.00 mL 抗坏血酸，最后定容至刻线，摇匀放置 15 min 后于 510 nm 处测其吸光度。

2.2 显色剂加入量对实验测定的影响

取 7 个 25 mL 容量瓶，在每一个容量中准确移取 2.00 mL 铁的标准溶液，然后依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸钠缓冲溶液、2.00 mL 抗坏血酸、最后分别加入 1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、6.00 mL、7.00 mL 邻二氮菲，定容至刻度线，摇匀，放置 15 min 后于 510 nm 处测其吸光度。

2.3 放置时间对实验测定的影响

取 7 个 25 mL 容量瓶，在每一个容量中准确移取 2.00 mL 铁的标准溶液，然后再依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸钠缓冲溶液 2.00 mL 抗坏血酸，2.00 mL 邻二氮菲溶液，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀，分别放置 15 min、20 min、25 min、30 min、35 min、40 min、45 min 后于 510 nm 处测其吸光度。

2.4 反应温度对实验测定的影响

取 7 个 25 mL 容量瓶，在每一个容量中准确移取 2.00 mL 铁的标准溶液，然后再依次加入 5.00 mL 乙酸-乙酸钠缓冲溶液 2.00 mL 抗坏血酸，2.00 mL 邻二氮菲溶液，最后用蒸馏水定容至刻度线，摇匀，分别放在 15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃、35 ℃、40 ℃、45 ℃恒温水浴锅中，放置 15 min 后于 510 nm 处测其吸光度。

3 结语

本方法以抗坏血酸为还原剂，邻二氮菲为显色剂，在 510 nm波长处测得三江猕猴桃中铁元素含量为 0.1383 mg/g，说明三江猕猴桃中铁元素含量较高，该种猕猴桃铁含量仅次于红枣中的铁元素，缺铁的大众朋友可以多吃该种猕猴桃来补充铁元素含量。本方法操作简便，实用范围广，准确度高、精密度好，重现性好，回收率高，为消费者和猕猴桃加工企业提供参考依据。

声明：本文所用图片、文字来源于《中国食品检测》，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系

相关链接：维生素，酶，亚铁