随着中药行业快速发展，中药加工企业数量不断增加，加工生产过程中产生大量中药渣，传统处理方法有焚烧、填埋、固定区域堆放等，处理药渣不仅需要投入大量资金，也造成中药资源大量浪费。

黄花蒿，别称青蒿（Artemisia annua），是我国传统中药，主要用于消肿、止汗、凉血等。青蒿中除含有抗疟成分青蒿素、青蒿酯钠、蒿甲醚外，还含有青蒿酸、双氢青蒿素、青蒿醇、青蒿乙素等功效成分。青蒿素等功效成分药理作用的深入研究，促使相关青蒿原料制药企业加大青蒿素等功效成分的提取，青蒿药渣量逐渐增加，残留功效成分和药用价值得不到充分利用。因此积极探索青蒿叶渣新的应用，增加青蒿产品种类及附加值，有助于提升青蒿叶渣资源利用率。

目前中药渣处理方式有重新提取药渣中有效成分、制成无公害化肥、作为食用菌栽培基质及饲料添加j等。针对中药渣难处理的问题，以污水处理厂厌氧污泥为接种物，发酵中药渣产生沼气，为中药渣的综合利用提供新思路。动物养殖方面，通过优化菌种及配比方式，将中药渣发酵生产功能性饲料，可以提高泌乳獭兔的生产性能及断奶仔猪的免疫力。研究发现，中药渣中含有丰富的粗脂肪、粗蛋白、多糖和多种微量
元素，是一种可循环的生物质资源和天然培养基。微生物分泌纤维素酶、蛋白酶及多种微量元素，可破坏植物细胞壁，大幅度提升发酵产物中功效成分含量。

综上所述，本研究采用固态发酵的方式，探索开发青蒿叶渣作为动物保健产品的可能性，为青蒿叶渣综合处理提供新思路，具有广阔的市场发展前景。

1 试验材料

1. 1 试验菌种

试验菌株见表 1。 

1. 2 仪器

恒温振荡器 THZ-98A；紫外分光光度计 UV-5100B；GCMS-QP20（日本岛津）；微量 XPE/微量分 析 天 平 ；漩 涡 震 荡 器 Vortex-1；真 空 浓 缩 机CONCENTRATOR PLUS（德国艾本德公司）；洁净 工 作 台 SW-CJ-2FD；无 氧 发 酵 袋（28 cm×40cm）。

1. 3 试剂

氢氧化钠、硫酸铜、酒石酸钾钠、石油醚均购买自北京化工厂；青蒿乙素、双氢青蒿酸标品购自成都埃法生物科技有限公司；青蒿叶渣由广西仙草堂有限责任公司提供。 2 方法

2. 1 种子液制备

里氏木霉、地衣芽孢杆菌、黑曲霉菌、枯草芽孢杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌、瑞士乳杆菌、丁酸梭菌、植物乳杆菌 B7、酵母菌和毕赤酵母菌按接种量 2% 接种于 30 mL LB（1% 蛋白胨，0. 5% 酵母粉，1% 氯化钠）培养基并连续活化 2 次，取第二次活化菌液，再次按接种量 2% 接种于 100 mL LB 培养基，酵母菌和毕赤酵母菌 30℃培养 24 h，其余菌株 37℃培养 24 h，丁酸梭菌种子液培养在厌氧发酵
瓶中进行。

2. 2 发酵

青蒿叶渣固体培养基成分：30 g 青蒿叶渣、5 g玉米浆、20 g 豆粕、3 g 红糖、2 g 石粉，以上 5 种物质
混合粉碎过 80 目筛，每组重复 3 次。单一菌株发酵：里氏木霉、地衣芽孢杆菌、黑曲霉菌、枯草芽孢杆菌、干酪乳杆菌、植物乳杆菌、瑞士乳杆菌、植物乳杆菌 B7、丁酸梭菌、酵母菌和毕赤酵母菌单一菌种种子液 40 mL 接种于固体培养基中，酵母菌和毕赤酵母菌 30℃发酵 7 d，其余菌株 37℃培养 7 d，丁酸梭菌在无氧发酵袋中发酵，每组重复 3 次。

优选菌混合发酵：根据粗蛋白、双氢青蒿酸和青蒿乙素试验结果，选取枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌和酵母菌作为进一步试验对象，各取 13 mL 种子液混合加入固体培养基中，37℃培养 7 d，混合菌固态发酵，每组重复 3 次。 

2. 3 粗蛋白和功效成分测定方法

青蒿叶渣固态发酵产物处理采用余正文对青蒿的处理方法］；发酵产物粗蛋白含量测定采用双缩脲法；发酵产物功效成分检测使用 GC-MS测定，采用 Tian 的检测方法。 

2. 4 饲喂实验

选取日龄 132 天、4 800 羽的罗曼灰鸡，平均分为 3 组，每组重复 3 次。对照组饲喂全价料，试验组青蒿叶渣混合菌发酵产物按 5% 比例添加到全价料中饲喂鸡群，15 d 后观察并比较 2 组鸡蛋色泽及粪便颜色，并进行筛粪处理。

2. 5 统计学分析

采用 GraphPad Prism 7 软件进行统计分析，数据采用 x±s 表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间进一步比较采用 LSD-test，P<0. 05 差异有统计学意义。

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