（3）模型方程的建立与显著性检验

根据多元回归分析拟合试验结果(表4和表5)可得到：

苦养蛋白得率(Y1)的二次回归方程：

Y₁=7.85+0.48A+0.35B+0.28C—0.27AB+0.058AC+0.34BC—1.15A₂一1.81B₂一1.67C₂；

苦养黄酮得率(Y₂)的二次回归方程：

Y₂=1.13+0.073A+0.068B+0.15C+0.19AB—0.010AC—0.12BC—0.28A²一0.16B²—0.13C²，

并进行方差分析。

由方差分析可知，回归模型极显著(p＜0.0001)，提取苦荞蛋白方程失拟项为0.5607＞0.05；提取黄酮的失拟项为0.0894＞0.05，二者都表明失拟项不显著，且苦养蛋白的R²=0.9845，R²_Adi=0.9646； 黄酮的R²=0.9829，R²_Adi=0.9610，表明该模型与实际值拟合性很好，可以利用二者的回归方程确定苦荞蛋白和黄酮类物质的最佳提取工艺条件。根据回归模型的方差分析也表明对苦养蛋白影响极显著的因素有A(粒度)、A₂、B₂、C₂，影响显著的因素有B(pH)、C(温度)，AB、AC、BC的交互影响均不显著。对苦养黄酮类化合物影响极显著的是C(温度)、A²、B²，影响显著的有AB、AC的交互作用，A(粒度)、B(pH)、BC、C²影响不显著。从单因素水平分析可以得出，各个因素对苦荞蛋白影响的主次顺序为粒度＞pH＞温度，对苦养黄酮影响的主次顺序为温度＞粒度＞pH。

（4）响应面分析

依照Box—Behnken中心组合设计原理和试验数据得出的各因素间的交互作用如图6和图7，根据图6和图7的响应面图及等高线图能够比较直观地反应各个因素之间的交互作用及其对响应值的影响。从各因素之间交互的图形可以看出各因素间交互作用的强弱，其中曲线走势越陡说明其影响越显著；曲线走势越平滑说明其影响越小。提取苦荞黄酮和蛋白的响应面都存在极值，即响应面有最高点峰值。通过分析可知，当粉碎粒度为63.60目，pH为9.15，提取温度为67.26℃，液料比为30∶1mL/g，超声时间为40min时为超声同步提取苦荞蛋白和黄酮类化合物的最佳提取工艺条件。回归模型预测理论中蛋白得率为7.90％，黄酮得率为1.17％。对结果进行验证性实验，考虑到实际操作的可行性，将苦荞蛋白和黄酮类化合物的最佳同步提取工艺条件修正为：液料比为30∶1mL/g，超声时间为40min，粉碎粒度为60目，pH为9.15，提取温度为67.2℃，在此条工艺条件下进行超声辅助苦荞蛋白和黄酮的同步提取。

（5）验证试验

在粉碎粒度为60目，pH为9.15，超声时间为40min，提取温度为67.2℃，液料比为30∶1mL/g工艺条件下重复提取三次，得到苦荞蛋白得率为7.79％，苦荞黄酮得率为1.14％。验证试验结果与模型的预测值相吻合，表明模型可靠，适用于苦荞蛋白和黄酮类物质的同步提取。

三、结论

本试验通过响应面法确定超声辅助苦荞中荞麦蛋白和黄酮类化合物的最佳同步提取条件为：

液料比为30∶1mL/g，超声时间为40min，粉碎粒度为60目，pH为9.15，提取温度为67.2℃。

在此工艺条件下苦荞蛋白得率为7.79％，苦荞黄酮得率为1.14％。为蛋白和黄酮类化合物的同步提取研究提供了一定的理论依据，为苦荞麦产品的研发提供新的途径和技术支撑。

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