②乳类脂肪虽然也属于游离脂肪，但它是以脂肪球状态分散于乳浆中形成乳浊液，脂肪球被乳中酪蛋白包裹，不能直接用乙醚、石油醚提取，需先用氨水和乙醇处理，氨水使酪蛋白钙盐变成可溶解的盐，乙醇使溶解于氨水中的蛋白质沉淀析出，然后再用乙醚提取脂肪。此法又称为碱性乙醚提取法。

③加入石油醚的作用是降低乙醚的极性，使乙醚与水不混溶，只抽提出脂肪，并使分层清晰。

④若无抽脂瓶时，可用容积为100mL的具塞量筒代替，待分层后读数，用移液管吸出一定量醚层。

六、巴布科克法和盖勃氏法

巴布科克法和盖勃氏法都是用来提取乳制品中的脂肪，因为样品不需要事先烘干，此法也叫湿法提取。因脂肪在牛乳中以乳胶体形式存在，要测定脂肪必须破坏乳胶体脂肪与其他非脂成分分离，一般用浓H2804分解非脂成分，用容量法定量，操作简便，是许多国家用于乳制品的常规分析。

1、原理

利用硫酸溶解乳中的乳糖与蛋白质等非脂成分，同时，乳中的酪蛋白钙盐在硫酸的作用下转变成可溶性的重硫酸酪蛋白，使包裹脂肪球的膜被软化破坏，脂肪游离出来，再利用加热离心方法，使脂肪完全迅速分离，在乳脂瓶中直接读取脂肪层，从而迅速求出被检测乳中的脂肪率。

2、试剂

①硫酸：相对密度(20ºC)1.816±0.003，相当于90％～91％。

②异戊醇：相对密度(20ºC)0.811±O.002，沸程128～132ºC。

3、仪器

①巴布科克乳脂瓶，见图。

②盖勃乳脂计，见图。

③盖勃离心机。

④标准移乳管(17.6mL，1lmL)。

4、操作方法

(1)巴布科克法：准确吸取17.60mL牛乳于巴布科克乳脂瓶中，沿瓶颈壁缓慢加17.5mL浓硫酸，将瓶颈回旋，使液体充分混合均匀，无凝块并呈均匀的棕色。将巴布科克乳脂瓶置于乳脂离心机上，以1000r/min的转速离心5min，加入60ºC以上热水使脂肪上浮至瓶颈，离心2min(1000r/min)。再加入60ºC水至4％刻度线，于离心机离心lmin，取出后在55～60ºC水浴中静置5min，使脂肪柱稳定，取出拭干，读取脂肪柱最高点怀最低点所占格数，即为样品含脂肪百分含量。

(2)盖勃氏法：在盖勃乳脂计中加入10mL硫酸(颈口勿沾硫酸)，然后沿管壁缓慢加入11.0mL牛乳，使样品和硫酸不要混合，加入lmL异戊醇塞紧盖子，用力振摇至呈均匀棕色液体，瓶口向下静置数分钟后，于65～70ºC水浴中静置5min，取出拭干，调节橡皮塞使脂肪柱在乳脂计刻度内，置于离心机，以800～1000r/min的转速离心5min，取出乳脂计，再置于65～70℃水浴(水浴水面应高于乳脂计脂肪层)中，5min后取出立即读数，脂肪层上下弯月形下缘数字之差，即为脂肪的质量分数。

5、说明及注意事项

①在巴布科克法中采用17.6mL吸管，实际上注入巴布科克乳脂瓶中只有17.5mL，牛乳的密度1.030g/mL，故样品质量为17.5×1.030=18g。巴布科克乳脂瓶的刻度共10大格(0～10％)，每大格容积为0.2mL，脂肪的平均相对密度为0.9，其脂肪质量为0.2×10(10大格)×0.9(脂肪相对密度)=1.8(g)，18g样品中含1.8g脂肪即瓶颈全部刻度表示的脂肪含量10%，每一大格代表1％的脂肪，故巴布科克乳脂瓶颈刻度读数即直接为脂肪的百分含量。

②硫酸的浓度及用量要严格遵守方法中规定的要求，硫酸浓度过大会使牛乳炭化成黑色溶液而影响读数；浓度过小则不能使酪蛋白完全溶解，会使测定值偏低或使脂肪层浑浊。

③加入硫酸的作用：溶解蛋白质；溶解乳糖；减小脂肪的吸附力。

④盖勃法中加入异戊醇是促使脂肪析出，并降低脂肪球的表面张力，以利于形成连续的脂肪层。

⑤65～70ºC中加热和离心的目的是促使脂肪离析。

⑥罗紫一哥特里法、巴布科克法和盖勃氏法都是测定乳脂肪的标准方法。但罗紫一哥特里法的准确度高于后两种方法，后两者中巴布科克法的准确度稍高于盖勃氏法，两者差异显著。

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