3、仪器
①抽提装置,见图。
②具塞离心管。
③离心机。
④布氏漏斗。
⑤具塞锥形瓶。
4、操作方法
准确称取样品5.00g于具塞锥形瓶中(高水分食品可加适量硅藻土使其分散),加入60mL氯仿-甲醇混合液(干燥食品可加入2~3mL水)。连接提取装置,于65℃水浴加热,从微沸开始计时提取lh。提取结束后,取下锥形瓶,用布氏漏斗过滤,将锥形瓶及布氏漏斗用氯仿-甲醇混合液清洗,洗液一并收集于具塞锥形瓶中,置65~70°C水浴,回收溶剂,至物料呈浓稠态,但不能干涸,冷却。加入25mL石油醚和15g无水硫酸钠于具塞锥形瓶中,立即加塞振荡10min,将醚层移入具塞离心管中,以3000r/min离心5min 。用移液管迅速吸取上层清液10mL于已恒重的称量瓶中,蒸发除去石油醚后,于95~105°C烘箱中烘至恒重。
5、说明及注意事项
①本法适用于结合态脂类,特别是磷脂含量高的食品,如鱼、贝类、蛋类、肉、禽及其制品等食品酸度测定,对于含水量高的样品更为有效。
②溶剂回收到残留物尚具有一定的流动性,不能完全干涸,否则脂类难以溶解于石油醚,从而使测定结果偏低,最好在残留物有适量水时停止蒸发。
③无水硫酸钠必须在石油醚之后加入,以免影响石油醚对脂肪的溶解。根据残留物的多少,可加入无水硫酸钠5~15g。
五、罗紫-哥特里法
1、原理
利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜,使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中,而脂肪游离出来,再用乙醚-石油醚提取出脂肪,蒸馏去除溶剂后,残留物即为乳脂肪。
2、试剂
①25%氨水(相对密度0.91)。
②96%乙醇。
③乙醚(不含过氧化物)。
④石油醚(沸程30~60°C)。
3、仪器
罗紫-哥特里抽脂瓶,见图。
4、操作方法
精确称取样品(牛乳10.00mL,乳粉1.00~5.OOg,用10mL水,600C分数次溶解)于抽脂瓶中,加入1.25mL氨水,充分混匀,置600C水浴加热5min,再振摇2min,加入10mL乙醇,加塞,充分摇匀,于冷水中冷却后,向抽脂瓶中加入25mU乙醚,振摇0.5min,加入石油醚25mL,再振摇0.5min。敞口静置约30min。当上层液澄清时,读取醚层体积。从管口放出一定体积醚层倒入已恒重的脂肪烧瓶中。蒸馏回收乙醚和石油醚,挥千残余醚后,置95~105℃烘箱中干燥2h,冷却,称量。
5、计算
式中:
m2——烧瓶和脂肪的质量,g;
m1—一烧瓶的质量,g;
m0——样品的质量,g;
V1——放出醚层体积,mL;
V——读取醚层总体积,mL。
6、说明及注意事项
①本方法为乳及乳制品脂类定量的国际标准法,被ISO、FAO/WHO采用。本方法适用于各种液状乳(生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等)、各种炼乳、乳粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制品,也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。
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