2前处理技术

食品基体中分析痕量OPEs时，脂质、蛋白质、色素、糖类、脂肪酸等共提取基质成分会引起干扰。因此选择合适的前处理技术，有效去除食品基质中的杂质，并提取多组分OPEs十分重要。

OPEs样品前处理通常由提取和净化两个部分组成，常见的提取、净化方法包括加速溶剂萃取(ASE)、基质固相分散萃取(MSPD)、MAE、超声辅助萃取(UAE)、QuEChERS、SPE、凝胶固相萃取(GPC)、分散固相萃取(d-SPE)等方法均有应用。表2中总结了食品基质中OPEs的前处理方法。

2.1食品样品中OPEs的提取技术

2.1.1加速溶剂萃取

ASE(也被称为加压液相萃取PLE)是通过在高温高压条件下提高样品溶解能力，使分析物高效率扩散达到提取目的，从而节约提取时间、减少溶剂损耗。ASE技术在提取食品、生物样品中OPEs时，脂质也作为共提取物被提取，因此对提取液的净化提出更高要求。Gao等采用ASE技术，使用10%乙腈水溶液作为提取剂，在150℃下，对1g鱼肉样品提取5min，提取液经酸化硅胶吸附脂质后，采用固相微萃取(SPME)进一步净化。在优化条件下，7种OPEs在0.900~5000ng/g范围内相关系数达到0.9900~0.9992(RSD<9.0%)，检出限为0.010~0.208ng/g，回收率为80%~107%。Brandsma等在70℃、1500Pa条件下，以二氯甲烷-丙酮(1∶1，v/v)作提取剂，ASE方法循环提取3次，结合氨基固相萃取小柱净化，利用HPLC-MS/MS分析测定水生生物中10种OPEs，检出限为0.200~29.000ng/g，回收率为74%~128%。

2.1.2微波辅助萃取

MAE技术是利用微波加热以及可控的压力和温度条件来加速溶剂对固体样品中目标物的萃取过程。微波对介电性质不同的物料呈现出选择性加热特点，溶质和溶剂的极性越大，对微波能的吸收越大，升温越快，萃取越迅速。作为一种高效、简便和快速的提取技术，MAE已广泛用于蔬菜、谷物、肉类等多种食品基质中。借鉴García-López等从灰尘和淤泥中提取OPEs的方法，Ma等选用MAE提取结合GC-MS方法对鱼类和家禽类生物样品中14种OPEs进行提取和测定。比较了丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸乙酯-二氯甲烷(1∶1，v/v)、乙酸乙酯-丙酮(1∶1，v/v)以及正己烷-丙酮(1∶1，v/v)6种提取溶剂，并对提取溶剂体积、提取温度和时间进行了考察，结果表明10mL正己烷-丙酮(1∶1，v/v)在130℃下提取20min效果最佳。Zhang等同样选用正己烷-丙酮(1∶1，v/v)作提取溶剂，在130℃下对大米中OPEs提取20min，方法的回收率为84%~110%。

MAE和ASE均是通过控制压力以及温度条件，减少溶剂消耗并加快提取速率，主要区别是加热方式不同，但两种提取方式回收率基本相似。此外，MAE常使用极性溶剂为提取溶剂，最大限度吸收微波能，达到萃取目的，有时为了提取非极性目标物，也可加入非极性溶剂。

2.1.3基质固相分散萃取

MSPD集提取和净化于一体，样品与吸附材料研磨，通过剪切力分散样品，增大萃取样品的表面积，OPEs会根据各自的极性分布在有机物的表面。Campone等采用MSPD方法，对鳕鱼和三文鱼中13种OPEs进行测定。通过条件优化，将0.5g样品与2g弗罗里硅土(Florisil)和1g无水硫酸钠在研钵中分散，然后转入1g氧化铝的固相萃取柱中。使用5mL正己烷-二氯甲烷(1∶1，v/v)除去脂质，并用10mL正己烷-丙酮(6∶4，v/v)洗脱分析物，方法回收率为70%~110%，RSD<9%。Castro等基于MSPD结合LC-MS/MS同时分析测定贻贝样品中18种OPEs。通过条件优化，最终选取Florisil和乙腈分别作为吸附剂和洗脱溶剂，有效降低了脂质干扰。该方法回收率为69%~122%，检出限为0.060~5.000ng/g，定量限为0.190~17.000ng/g，RSD<24%。

由于MSPD提取条件比较温和，因此共提取物干扰少;通过选择合适的分散剂、吸附剂以及洗脱溶剂，可极大提高OPEs的萃取效率。此外，与传统的提取方法相比，MSPD减少了溶剂消耗，并且成本较低。

2.1.4超声辅助萃取

UAE基于一种绿色提取技术，广泛应用于提取基体成分复杂的食品和环境样品，该技术提取率与传统的提取技术(例如:索氏提取(SE))相当。Santín等采用丙酮-正己烷(1∶1，v/v)作提取溶剂，考察了振荡、ASE、UAE3种方法提取鱼肉中16种OPEs。结果表明，振荡萃取时间较长，ASE萃取脂质含量较高。最终选取0.25g鱼样加入15mL萃取剂超声辅助萃取15min，重复萃取两次，结合SPE和d-SPE净化后，进行LC-MS/MS分析测定，RSD<10%。Aznar-Alemany等将UAE与液液萃取(LLE)结合使用，分析了贻贝样品中7种OPEs，方法的最低检出限和定量限分别为0.190ng/g和1.030ng/g。Wang和Kannan等使用0.5%甲酸乙腈溶液作提取剂，结合d-SPE技术净化和HPLC-MS/MS检测，对多种复杂食品基质中OPEs进行分析，方法检出限为0.010~0.170ng/g，其中TnBP、TBOEP、TCIPP在食品中含量相对较高。Guo等通过奶粉中9种OPEs的分析研究表明多次循环萃取可以提高萃取效率，并且准确性和重现性较好，基质效应显著降低。

为了最大限度地提高提取率，需对UAE提取条件进行优化，例如溶剂类型、超声处理的温度和时间、样品粒度、固/液比例等。虽然升高温度会通过降低溶剂黏度来增加溶剂向基质中的渗透，但是干扰化合物的共提取也会增加，同时OPEs可能会发生降解现象。

2.1.5QuEChERS方法QuEChERS方法

近年来广泛应用于食品中痕量有机物的检测，该方法主要通过有机溶剂提取、分散固相萃取净化两部分组成，有机溶剂一般为甲醇、乙腈、正己烷等常用提取试剂或其组合，分散固相萃取常选用N-丙基乙二胺(PSA)、十八烷基(C18)、石墨化炭黑(GCB)、氧化铝(Al2O3)、基于氧化锆的Z-Sep和Z-Sep+等吸附剂。Guo等对奶粉中OPEs进行提取分析，选用无水MgSO4和无水醋酸钠(CH3COONa)进行盐析，比较了乙腈、0.5%的甲酸乙腈溶液、乙腈-甲醇(3∶1，v/v)、0.5%甲酸乙腈-甲醇(3∶1，v/v)、乙腈-甲苯(3∶1，v/v)5种提取溶液，以及PSA、GCB、C183种吸附剂的含量。结果表明，选用0.5%甲酸乙腈提取溶剂、100mgPSA吸附剂时，提取效率最佳，检出限可达0.100~0.250ng/g，定量限为0.500~1.500ng/g，回收率为74%~102%。Poma等以乙腈作提取溶剂，MgSO4进行盐析，Z-Sep作吸附剂，结合FlorisilSPE柱进行净化，采用GC-EI-MS方法对瑞典市场中12类53种食品中的8种OPEs进行测定，方法检出限为0.050~3.000ng/g，回收率为53%~71%。丁锦建等基于QuEChERS方法建立了快速分析多种食品中10种OPEs。该方法以0.1%甲酸乙腈溶液为提取剂，PSA和C18为吸附去除基质干扰，采用同位素稀释质谱法进行分析定量，定量限为0.050~0.420ng/g，回收率为73%~106%。

近年来，QuEChERS与UAE结合提取食品基质中OPEs，避免了有机溶剂的浪费，还常结合SPE方法去除食品基质中的脂质等干扰。Xu等将QuEChERS法与UAE结合，选用5mL乙腈-甲苯(9∶1，v/v)作提取溶剂，C18和Z-Sep混合吸附剂，提取多种食品基质中9种OPEs，提取溶剂利用率达到90%~95%，并且可有效去除脂质和色素等干扰物。该方法浪费因子(wastefactor，WF)约为5%~10%，同时节省大约90%的内标溶液，而传统QuEChERS方法的WF通常在50%~90%之间，WF的降低显著提高了OPEs检测灵敏度。Sapozhnik-ova和Lehotay等使用QuEChERS方法提取10g鱼样品中OPEs，但10mL提取物中仅取1mL进一步净化(WF=90%)，实际有效样品量仅1g，导致灵敏度降低。Zheng等采用QuEChERS结合UAE技术，以5mL乙腈-甲苯(9∶1，v/v)作为提取溶剂，以Z-Sep为吸附剂，并使用SPE柱多次净化提取，利用GC-MS对电子回收站附近鸡蛋中10种OPEs分析测定，方法定量限为0.110~0.600ng/g，回收率为76%~172%。

声明:本文所用图片、文字来源《色谱》2020年12月，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系

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