将上述带试样残渣的滤纸轻轻卷紧，移入另一个250mL容量瓶中，加入100mL彼得曼溶液，盖上瓶塞，剧烈振荡至滤纸碎成纸浆，将容量瓶置于60^oC±1^oC恒温水浴中，保温lh。

开始时每隔5min振荡容量瓶1次，振荡3次后再每隔15min振荡1次，取出冷却至室温，用水稀释至刻度，混匀。用干滤纸和干燥器皿过滤，弃去最初混浊滤液，所得滤液为浸出液Ⅱ[枸溶性磷(P₂O₅)浸出液〕。

有效磷的测定：有效磷的测定用移液管分别吸取10mL～20mL(P₂O₅小于20mg)浸出液I和浸出液Ⅱ一并放入400mL烧杯中，加入10mL HNO₃(1:1)溶液，用水稀释至100mL，加热至近沸，加入35 mL喹钼柠酮试剂，盖上表面皿，用文火加热煮沸30s，取下，冷却至室温，用预先烘干至恒重的4号玻璃坩埚抽气过滤，先将上层清液滤完，然后用倾泻法洗涤沉淀1次～2次(每次约用25mL水)，最后将沉淀移人坩埚中，再用水继续洗涤约3次～4次，将坩埚连同沉淀置于180℃士2^oC烘箱内，待温度达到180℃后烘干约45 min，移入干燥器中冷却，称重。直至生成沉淀，过滤、洗涤，最后取滤。

5、结果计算

式中: ω(P₂O₅)——过磷酸钙中有效磷(P₂O₅)的质量分数，%。

C_l——氢氧化钠标准溶液浓度，mol·L^-1。

C₂——盐酸标准溶液浓度，mol·L^-1。

V₁——溶解沉淀时，加入氢氧化钠标准溶液总体积，mL。

V^,₁——空白试验加入氢氧化钠标准溶液体积，mL。

V₂——滴定试液用去盐酸标准溶液体积，mL。

V^，₂——滴定空白用去盐酸标准溶液体积，mL。

10^-3——将mL换算成L的系数。

m——试样质量,g。

ts——分取倍数，即浸出液总体积(Ⅰ+Ⅱ)与吸取浸出液的总体积比。

2.73——溶解沉淀时每摩尔氢氧化钠标准溶液相当于磷(P₂O₅)的质量,g·mol^-1。

6、允许偏差

两次平行测定结果的允许差＜0.20%。

五、钒钼黄比色法

1、方法原理

用柠檬酸溶液[P(C₆H₈O₇·H₂O)=20g·L^-1〕一次浸提过磷酸钙中的有效磷〔其中包括Ca (H₂P0₄)₂,CaHPO₄和游离H₃P0₄],浸出液中的正磷酸盐与钒钼酸铵在酸性条件下形成黄色的三元杂多酸(P₂O₅·V₂O₅·22MoO₃·nH₂O)。本法原理及其优点：此法的优点是显色快，黄色很稳定，在24h内无显著变化;要求显色酸度范围很宽，极限是0.04mol·L^-1～1. 6 mol·L^-1,最好是0.5mol·L^-1～ 1.0mol·L^-1，在HNO₃,HCI、HCIO₄、H₂SO₄等介质中都可适用;干扰离子少，特别是Fe³⁺和Si的允许存在量远高于钼蓝法;操作简便快速，准确度和重复性较高，相对误差为1%～3% ；适测范困广，约为1mg·L^-1～20mg·L^-1 P，吸收波长选择:

比色时选用的波长(nm) 400 440 470 490

浓度范围(mg·L^-1P) 0.25～5.5 2.0～15 4.0～17 7.0～20

2、仪器及设备

振荡器；分光光度计。

3、试剂

（1）柠檬酸溶液[p(C₆H₈0₇·H₂O)=20g·L^-1］:称取20g结晶柠檬酸(C₆H₈O₇·H₂O，分析纯)，溶于水中，稀释至1L。

（2）磷(P₂O₅)标准溶液[p(P₂O₅)=100mg·L^-1]:准确称取1.9176g磷酸二氢钾(KH₂PO₄，分析纯，105℃供干)于400mL烧杯中，用少量水溶解，移入1L容量瓶，加水至约400mL，加浓HNO₃5mL，用水定容，混匀，此为1000mg·L^-1 P₂O₅贮备液，可久贮。准确吸取50mL贮备液于500 mL容量瓶中，用水定容，混匀，此为100mg·L^-1 P₂O₅标准溶液。

（3）钒钼酸铵溶液: A液。25g钼酸铵[(NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O，分析纯]溶于400 mL水中；B液。1.25g偏钒酸铵(NH₄VO₃，分析纯)溶于300mL沸水中，冷却后加入250 mL浓硝酸(HNO₃，p≈1.42g·mL^-1，分析纯)，再冷至室温。将A液缓慢地倾入B液中，不断搅匀，用水稀释至1L，贮于棕色瓶中，此溶液酸的浓度为c(HNO₃)=4 mol·L^-1。

4、操作步骤

（1）有效磷的浸提 称取混匀的过磷酸钙样品((1mm) 1.000g于250mL三角瓶中，加入100mL柠檬酸溶液，盖紧塞子，在20^oC～25℃下振荡30 min，用干燥滤纸和器皿过滤，弃去最初的滤液。

（2）有效磷的测定 吸取浸出滤液1.00 mL (含P₂O₅0.5mg～2mg)，放入50 mL容量瓶中，加水至约35mL，准确加入10mL钒钥酸按溶液(MO，用水定容，摇匀。放置20min后，在分光光度计上以470nm波长比色测定。同时做试剂空白试验，以空白溶液调节吸收值为零点，测定试液吸收值。

（3）工作曲线绘制 分别吸取100mg·L^-1P₂O₅标准溶液0(空白), 2.5mL, 5mL, 7.5mL,10 mL,15mL.,20mL于50mL容量瓶中，各加与吸取样液相同体积的空白溶液，加水至约35mL，同上2中步骤显色和比色，测得各瓶溶液的吸收值。标准系列溶液P₂O₅的质量浓度为0mg·L^-15mg·L^-1、10mg·L^-1、15mg·L^-1、20mg·L^-1、30mg·L^-1、40mg·L^-1，以吸收值为纵坐标，磷(P₂0₅)浓度为纵坐标，在普通坐标纸上绘制工作曲线。

5、结果计算

式中: ω(P₂0₅)——过礴酸钙中有效磷(P₂0₅)的质量分数，%；

P一一测得显色液中磷(P₂0₅)的质量浓度,mg·L^-1；

V——显色液定容体积，mL；

ts——分取倍数.

m——试样质量，g。

10⁶——将mg换算成g及mL换算成L的除数。

6、允许偏差

允许相对偏差＜3%。

7、注事事项

(1)对于浸出液有颜色或含有非正磷酸盐并可与钒钼酸形成有色络合物的肥料不宜用此法。

(2)试样与浸提剂的比例、浸提时间和温度等对有效磷的浸出量有很大影响，应按规定条件浸提。

(3)当试样含磷(P₂0₅)量低时，可多取滤液体积，但不能超过5mL，因为柠檬酸浓度过大(＞2000mg·L^-1)，对磷的显色有抑制影响。

(4)此处所用钒钼酸铵溶液是硝酸系统的。如在HC1、H₂SO₄介质中，则钒钼酸铵溶液应改用HC1, H₂SO₄系统配制，也能获得满意结果，比色液的酸度应为0.5 mol·L^-1 ～1.0 mol·L^-1。若酸度太高，显色住而不完全，甚至不显色;低于0. 2 mol·L^-1则易产生沉淀物，对比色有干扰。

(5)当室温低于15℃时显色较温，需要30min以上才能显色完全，稳定时间可达24h。

参考资料：土壤农业化学分析方法