一、方法选择的依据

淀粉可直接被酸水解生成葡萄糖；或被酶水解生成麦芽糖和糊精，再经酸水解生成葡萄糖，可测定葡萄糖含量(还原糖)再计算出淀粉含量。另外，淀粉经分散和酸解后具有一定的旋光性，也可用旋光法测定淀粉含量。这里要指出的是，酸水解法不仅使淀粉水解，而且也能分解半纤维素，结果产生了具有还原力的木糖、阿拉伯糖等单糖，使淀粉测定结果偏高。

有人曾以鼓皮、小米壳、玉米及甘薯等试样用糖化酶法及直接酸水解法测定淀粉含最，结果糖化酶法均较直接水解法为低，因为直接酸水解法中淀粉与半纤维家均被水解为还原糖，而糖化酶法仅能糖化淀粉，半纤维索则不起作用，因此半纤维素留于滤渣中，将糖化后的滤液与滤渣分别水解后滴定糖，二者结果之和与直接酸水解法滴定糖的结果相接近。用直接酸水解法测定淀粉，易将半纤维素误作淀粉，以致得出错误的结果。本节除介绍经典的酶水解法外，还推荐谷物种子粗淀粉测定的国家标准法—旋光法。

二、谷物种子中粗淀粉的测定(CaC12-HOAc浸提-旋光法)

1、方法原理淀粉是多糖聚合物，可用CaC12-HOAc(相对密度1.3,pH2.3)为分散和液化剂，在一定的酸度和加热条件下，使淀粉溶解和部分酸解，生成具有一定旋光性的水解产物可用旋光计测定。用此法时，各种淀粉的水解产物的比旋指定为203。全国谷物淀粉分析方法标准化研究协作组认为，本法结果的重复性好，操作简便、快速。

2、仪器及设备旋光计：电热恒温甘油浴(±1°C)。

3、试剂

（1） CaCl2-HOAc溶液：溶解5份重的CaC12•2H2O(分析纯)于6份水中，调节其相对密度(20℃时)为1.30。此溶液约含CaC12330g•L-1。再向此溶液中加入冰HOAc(每1000mL约加1.3mL冰HOAc)，用pH计测试调节至pH2.3，过滤至清澈为止。

（2）硫酸锌溶液：称取ZnSO4•7H2O 30g溶于100 mL水中。

（3）亚铁氰化钾溶液：称亚铁氰化钾(K4Fe (CN )6•3H2O，分析纯)15g溶于100 mL水中。

4、操作步骤

（1）待测液制备称取磨细谷物样品2.500g，放入250 mL三角瓶中(同时测定水分)，加入CaCl2-HOAc溶液10mL和6个～8个小玻璃球或大粒石英砂，轻轻摇匀，不要让样品粘在瓶底。再用CaC12-HOAc溶液50mL沿瓶壁淋洗附着在瓶壁上的样品，盖上小漏斗，放在1180±10C恒温油浴中，使之在5 min内达到恒温，继续恒温加热25 min。在加热过程中不要搅拌，使其自然分散水解(可用玻棒将瓶壁附着物推至液面以下)。煮毕立即取出，置于流水冷却槽中充分冷却(约15min)，然后用30mL左右水分次无损地冲洗全部内容物转入100mL容量瓶中，加入硫酸锌溶液1mL，充分摇匀后再加入亚铁氛化钾溶液1mL，再摇匀，如有泡沫，可加几滴乙醇消除之，用水定溶，用中速滤纸过滤，弃去初滤液(15mL±20mL)。取澄清液待测。

（2）测定：测定先用清亮的待测液洗旋光管2次～3次，然后将溶液装满管中，使管口液体呈一凸起，将活动的圆玻璃片与旋光管垂直方向插入盖上(可避免留有气泡)。将管盖扭紧，检查管中是否有气泡。然后测读旋光仪上的旋光度或检糖计上的0S,取3次测读的平均数。

5、结果计算

式中：

     α—旋光角度的读数；  

     L—旋光管长(dm)；  

    m—样品质量(g)；  

     203—淀粉的比旋；

        H—样品水分含量，%。

6、注意事项

（1） CaC12-HOAc溶液的酸度必须调节至pH2.3(用酸度计调试)，若pH＞2.5，易使分散液粘稠，难于过滤；若pH＜2.5，易引起淀粉进一步水解而降低比旋。

（2）样品中含有水溶性糖类，须先用80%乙醇洗糖，但绝大多数谷物种子中水溶性糖含量甚微，一般可忽略不计，不必进行脱糖手续。

（3） CaC12-HOAc溶液应在放入甘油浴前约5mi。加入，以防样品枯附在瓶底，影响分散效果

（4）试验证明，在加热初期搅拌，淀粉易结块；但在放入甘油浴前必须轻轻摇动，使样品均匀分散在CaC12-HOAc介质中，勿使样品粘在瓶底，必要时可用铲形玻棒将其搅开，加热后使其自然水解，测定结果的重复性较好。

三、麸皮、小米壳、玉米、甘薯、草本植物(牧草等)的茎叶中淀粉的测定(淀粉糖化酶一酸水解法)

1、方法原理淀粉先经淀粉酶水解成麦芽糖及糊精，再经酸水解，最后成葡萄糖。测定所得到的葡萄糖量，就可计算淀粉含量。

2、仪器及设备恒温箱(保温60℃以下孵化器。

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