奶茶由于兼备茶的清香和乳的酥浓，以及繁多的配料，加上各式的营销手段，已然成为“网红饮品”，尤其受年轻人青睐。根据前瞻产业研究院发布的《中国奶茶行业市场需求与投资规划分析报告》统计数据显示，截至2018年第三季度末，全国现制茶饮门店数量达到41万之多，同比增长了78.26%，预计全国奶茶市场容量可接近千亿元。但是，现制奶茶并不是一种预包装食品，可能会导致其检测及市场的监管力度不够。目前对于其基础成分例如糖分、脂肪、反式脂肪酸、咖啡因的检测研究较多，而奶茶和果茶饮品制作过程中往往采用勾兑的方式进行调配，可能使用食品添加剂，若长期频繁超量食用含有添加剂的食品，将对人体健康造成损害，已有关于奶茶使用食品添加剂超标的报道。并且消费者对食品添加剂的关注度越来越高，现制奶茶和果茶作为“网红饮品”，消费量如此高，人们有权了解其食品添加剂使用情况。因此，检测现制奶茶和果茶饮品中的常见添加剂对保护消费者的健康和消费权益具有重要意义。食品添加剂种类繁多，基于奶茶和果茶的性状，建立了常见的防腐剂、甜味剂和色素同时测定的方法，并用于现制奶茶和果茶的检测。

食品添加剂的测定方法主要有高效液相色谱法、毛细管电泳法、液相色谱－质谱法、气相色谱法、电化学分析法等，其中高效液相色谱法最常用，仪器普及。目前报道的高效液相色谱检测方法大多针对同一种类的几种食品添加剂，分析品种少，且极少用于现制奶茶和果茶饮品。鉴于此，本研究拟采用高效液相色谱二极管阵列检测技术，建立同时测定奶茶和果茶饮品中10种常见添加剂的方法，包括苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、、糖精钠、安赛蜜、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、赤藓红，并对成都市内网红热门奶茶店现制现售的奶茶和果茶进行检测，为监管部门监管提供技术支持，同时为大众提供相关建议。

1材料与方法

1.1仪器与试剂Ultimate3000高效液相色谱仪(美国赛默飞世尔科技公司)。山梨酸标准品(99.4%，C16971500)，购自Dr.Ehrenstorfer公司;准确称取山梨酸标准品，用甲醇定容至刻度，配制成浓度为1.00mg/mL的标准储备液。脱氢乙酸标准品(99.9%，B00003452)，购自北京曼哈格公司;准确称取脱氢乙酸标准品，加8g/L的氢氧化钠溶液溶解，用水稀释定容，配制成浓度为1.00mg/mL的标准储备液。标准储备液，购自北京曼哈格公司:安赛蜜(1.00mg/mL，B0002740);糖精钠(1.00mg/mL，GBW(E)100008);苯甲酸(1.00mg/mL，GBW(E)100006)、柠檬黄(0.50mg/mL，GBW(E)100001);日落黄(0.50mg/mL，GBW(E)100003);苋菜红(0.50mg/mL，GBW(E)100002a);胭脂红(0.50mg/mL，GBW(E)100004a);赤藓红(0.50mg/mL，GBW(E)100191)。甲醇和乙腈(色谱纯)，乙酸铵、乙酸锌、亚铁氰化钾、氨水、磷酸二氢钠均为分析纯，实验用水均为超纯水(Mili－Q纯水系统)。奶茶和果茶样品随机购自成都市各奶茶饮品店。

1.2实验方法

1.2.1色谱条件色谱柱:Venusil MPC18柱(250mm×4.6mm，5μm);流动相A:0.02mol/L乙酸铵，流动相B:甲醇，梯度洗脱程序如表1所示。流速1ml/min;二极管阵列检测器，检测波长设为530nm、427nm、230nm;柱温:30℃;进样量20μL。

1.2.2标准溶液的配制与标准曲线绘制吸取适量各添加剂的标准储备液，用超纯水稀释并配制成浓度为0mg/L、0.20mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、5.00mg/L、8.00mg/L、10.0mg/L的混合标准系列溶液，进样高效液相色谱仪分析，以各添加剂浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。

1.2.3样品前处理奶茶样品:称取适量样品于容量瓶中，加甲醇至终浓度为50%并定容，涡旋振荡2min，10000rpm离心5min，经0.22μm微孔滤膜过滤后供HPLC分析。果茶样品:取适量样品，加氨水调节pH至中性，其余步骤同奶茶样品。

2结果与讨论

2.1色谱条件的优化

2.1.1检测波长的选择实验采用二极管阵列检测器检测，在波长190～600nm范围内对10种组分进行波长扫描，得到各组分的最大吸收波长，为确保各组分有足够的灵敏度以及尽量减少基质干扰，实验选择了230nm、427nm和530nm作为检测波长。230nm作为苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、安赛蜜、糖精钠的检测波长，柠檬黄、日落黄、苋菜红和胭脂红的检测波长为427nm，530nm波长下测定赤藓红。标准溶液色谱图见图1。

2.1.2流动相的选择乙酸铵和磷酸盐体系常用作着色剂、防腐剂、甜味剂的分离流动相。分别尝试以甲醇－乙酸铵溶液、乙腈－乙酸铵溶液、甲醇－磷酸二氢钠溶液、乙腈－磷酸二氢钠溶液作为流动相。实验发现，以乙腈作为流动相时，部分峰总有重叠;磷酸盐体系做流动相时，基线噪声较大。实验选择采用甲醇－乙酸铵溶液作为流动相，并进一步优化流动相比例。首先进行等度洗脱，当乙酸铵溶液比例小于10%时，大部分添加剂均能被分离，但赤藓红出峰至少需要1h。为了让各组分在适宜的时间内得到有效分离，实验采用梯度洗脱。通过反复调整梯度洗脱程序，最终确定的程序见1.2.1，在此条件下运行，10种添加剂和样品杂质在35min内得到了有效分离。

2.1.3柱温的选择实验考察了柱温为25℃～35℃时的分离情况。柱温小于30℃时，各组分分离较好，但分离时间稍长，峰型略展宽;柱温在32℃以上时，有部分峰重叠。实验选择柱温为30℃，此时各组分的分离度良好且峰型尖锐。

声明：本文所用图片、文字来源《现代预防医学》，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系

相关链接：流动相，磷酸盐，样品