一、分析意义
有机酸广泛存在于植物体中,如在果蔬中主要含有苹果酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸、乙酸和草酸等。它们属于弱酸类,常以游离态及钾、钠、钙盐的形式存在于植物体内,其成分及含量与植物品种、栽培条件及生长状况密切相关。有机酸作为酸味成分,其适宜的含量可增加果蔬的风味,但过量时又显示出不良的品质。因此,测定果蔬的酸度及其与糖含量的比值,能判断果蔬的成熟度和品质;而且有机酸在食品的加工、贮存、品质管理、评价以及生物化学等领域,被认为是重要的成分,常要对农产品中的总酸量、特定的有机酸进行定量测定,乃至分析全部有机酸的组成。
二、方法选择的依据
酸度的测定包括总酸度(可滴定酸度)、有效酸度(氢离子活度、pH值)和挥发性酸。总酸度是所有酸性成分的总量,通常用标准碱来测定并以样品中所含主要酸的百分数表示,但有的农产品由于缓冲作用和色素的影响,往往难以判断滴定终点,在这种情况下,可以使用电位滴定法,但是人们味觉中的酸度,主要不取决于酸的总量,而是取决于离子状态的那一部分酸(游离酸),一般以氢离子活度(pH值)来表示,称为有效酸度。测定 pH值的方法很多,其中以pH计较为准确、简便。至于各种有机酸的分离和定量,通常用柱层析法、纸层析法、气相色谱法和羟酸分析仪法。
三、总酸度的测定(中和滴定法)
1、方法原理
样品中的有机酸用碱滴定时,被中和生成盐类。反应如下式:
用酚酞作指示剂,它在PHxq 8.2达到终点。最后以NaOH的毫摩尔数来计算有机酸的含量。
2、试剂
(1)氢氧化钠标准溶液[c(NaOH) =0.1mol·L-1〕:取过饱和氮氧化钠溶液5mL,用无二氧化碳水稀释至1L,用苯二甲酸氢钾标定其浓度,隔绝二氧化碳保存;
(2)酚酞指示剂:0.1g酚酞用乙醇溶解至100m。
3、操作步骤
在小烧杯中称取捣碎均匀试样10g~20g,用约150mL水将其移入250mL容量瓶中,充分摇匀后稀释定容。用干滤纸过滤,取滤液50mL,加入酚酞指示剂3滴~4滴,用氢氧化钠标准溶液滴定至微红色1min内不褪色为终点。
4、结果计算
式中:c——标准溶液NaOH的物质的量浓度,mol·L-1;
V——NaOH标准溶液的用量,mL;
K——换算为适当酸的系数,g·mol-1:苹果酸柠檬酸64,含1分子水的柠檬酸70,乙酸60,酒石酸75,乳酸90;
10-3——将mL换算成L的系数;
ts——分取倍数;
m——样品的质量,g;
100——换算为质量百分数,%。
5、注意事项
(1)本试验所用的蒸馏水应经煮沸除去二氧化碳。
(2)若颜色过深,可先加入等量蒸馏水稀释后再滴定。终点不易辨认时,可用原样作对比,判明终点,或必胜电位或电导滴定点。
四、挥发性酸的测定(蒸馏滴定法)
挥发性酸主要是指乙酸、蚁酸、丁酸和痕量的甲酸等,霉烂的果蔬、籽粒,未成熟的种子和果实,常含有较多的挥发性酸,它的含量是农产品品质好坏的一个重要指标。挥发性酸包括游离态和结合态两部分,前者在蒸馏时较易挥发,后者比较困难。测定挥发性酸的方法有直接法和间接法。直接法是用碱液滴定由蒸馏或其它方法所得的挥发性酸;间接法是将挥发性酸蒸发除去后,滴定残渣的不挥发酸的酸度,再由总酸度减去此残渣酸度即得挥发酸含量。一般用直接法较为方便。
1、 方法原理
挥发性酸可用蒸汽使之分离,加入磷酸可以使结合的挥发性酸离析。挥发性酸经冷凝收集后,再用标准碱滴定。
2、 仪器及设备
水蒸汽蒸馏装置(图41-1)
1、 试剂
(1)磷酸溶液[ψ(H3PO4)=10%]:10mL磷酸(H3PO4,p=1.69g·cm-3,化学纯)稀释至100mL;
(2)氢氧化钠标准溶液[c(NaOH) =0.1mol·L-1〕:取过饱和氮氧化钠溶液5mL,用无二氧化碳水稀释至1L,用苯二甲酸氢钾标定其浓度,隔绝二氧化碳保存;
(3)酚酞指示剂:0.1g酚酞用乙醇溶解至100m。
参考资料:土壤农业化学分析方法