荼叶是中华传统绿色植物来源于健康饮品，具备久远的食用历史时间。荼叶中含有各种营养物质和挥发物化学物质，其关键活性物质成分随产区不一样而有一定的差别，相关成分的类别和成分变成荼叶质量的关键点评根据。依据荼叶收集和制造方式的不一样还可以分成绿茶叶、绿茶、黄茶、绿茶（乌龙）、黑荼和白牡丹茶6类别。荼叶中最首要的清除自由基活力成份为茶氨酸（Teapolyphenols，TP），茶氨酸是一大类多甲基酚类的统称，此外，荼叶中还含有有咖啡因、碳水化合物、茶多糖和各种维生素等营养元素。茶氨酸约占荼叶体力劳动的20%～30%，是普洱茶中最重要抗氧化性健康保健成份。茶氨酸关键包含黄烷醇类、花色苷类、黄酮类化合物、多糖类、黄酮醇类和酚酸类等，在其中关键的挥发化学成分是儿茶酸类物质约占60%～80%，包含儿茶酸、表儿茶素、表没食子儿茶酸没食子酸酯、表儿茶素没食子酸酯、表没食子儿茶酸、没食子酸和咖啡碱等。荼叶中茶氨酸类型和成分随时节差异而转变 ，春天荼叶中表没食子儿茶酸没食子酸酯（epigallocatechingallate，EGCG）成分要高过秋天。茶氨酸具备抗氧化性、调整免疫力、祛毒、防辐射和消除疲劳等各种作用，但其构成及成分随种类、采收时节期及原产地等各个方面的危害。茶氨酸一般从普洱茶中获取，在其中儿茶酸类物质占茶氨酸的60%～80%，次之是黄酮类化合物、多糖类，别的酚类物质较少。

茶氨酸除存有在荼叶、茶树花等多种多样油茶树資源中。沙棘中茶氨酸依据获取加工工艺不一样成分能够做到11.3%～16.9%。茶氨酸也是核桃仁和枇杷果中活力成份。毛枝连蕊茶中绿叶子和枫叶主茎叶子中可溶性糖、茶氨酸和总花青苷。

茶氨酸可溶于开水、乙酸丁酯、酒精，微溶解植物油脂，难溶有机溶液。茶氨酸具备一定的吸水性，可开展络合反应、氧化还原反应反映等。纳米技术磁珠能够 完成茶氨酸的迅速获取分离出来。荼叶中茶氨酸在提炼全过程中尤其是加温时很有可能受到损坏，在定性分析的环节中需创建稳定的统计分析方法完成定量分析。

儿茶酚中不一样成份成分是开展荼叶质量等绿色植物辨别的重要环节。茶氨酸为多酚类物质具备纯天然抗氧化能力，在提炼全过程中很有可能会产生氧化还原反应反映，因此 适合的提炼加工工艺前提对茶氨酸的定量分析检验尤为重要。光度法是测量多酚类物质成分的常见方式，关键包含紫外线光度法。关键活力成份茶氨酸、总皂苷、黄酮类物质和总含糖量。茶氨酸能够 选用红外光谱法开展判定和定量分析检验。液相色谱仪质谱测量荼叶中茶氨酸实际操作更加繁杂。紫外线光度法测量相对性敏感度较低，红外光谱法的定量分析测量属半定量，茶氨酸中有酚类物质构造贴近均为儿茶酸类构造，与此同时茶氨酸中多种多样活力成份化学物质的类别和成分及其占比对点评荼叶质量和开展别的带有茶氨酸绿色植物种类辨别具备关键实际意义。

本科学研究运用高效液相色谱色谱法创建了与此同时测量6种关键茶氨酸的与此同时定性分析方式 ，该办法还可以用以荼叶等绿色植物商品中茶氨酸类型及成分的检验，对绿色植物评定和质量确定具备关键实际意义。白牡丹茶归属于轻度半发酵茶，绿茶叶属未半发酵茶，均属在我国六大茶种类。白牡丹茶因特有的身心健康使用价值及可常年存放的特性而备受顾客和股民的亲睐，销售量与市场份额持续飙升，2013年～2016年，全国各地白牡丹茶总产量持续四年维持了15%上下的增长幅度。不一样获取标准对荼叶中主要成分的总混有影响。本科学研究运用响应面法提升荼叶中不一样获取方式 的提炼加工工艺，挑选 最佳获取加工工艺，在这个基础上运用高效率液相色谱仪进行不一样荼叶中茶氨酸类型和成分定量分析测量，为茶叶种类和绿色植物种类辨别给予至关重要的方法学适用。

1 原材料与方式

1.1 实验试剂与原材料

没食子酸标准物质（纯净度均≥98%）、没食子酸儿茶酸没食子酸酯标准物质（纯净度均≥98%）、表儿茶素标准物质（纯净度均≥98%）、表没食子酸儿茶酸标准物质（纯净度均≥98%）、表儿茶素没食子酸酯标准物质（纯净度均≥98%）、表没食子酸儿茶酸没食子酸酯标准物质（纯净度均≥98%），福林酚试剂（分析纯），工业甲醇（色谱纯）、苯甲酸（色谱纯）、工业乙醇（分析纯），实验试剂均购自阿拉丁企业。白牡丹茶试品：贡眉白茶（原产地福建福鼎，2018年），绿茶叶试品：竹叶青（原产地四川）。

1.2 仪器设备与机器设备

高效率液相色谱仪（Agilent1260）：安捷伦科技（我国）有限责任公司；剖析电子分析天平（AR224CN）：奥豪斯进出口贸易（上海市）有限责任公司；超声波清洗机（SB-120DT）：上海市予腾生物技术有限责任公司；集快热式控温加温磁力搅拌器（DF-101S）：上海市凌科实业公司發展有限责任公司；中药材粉碎机（DFT150）：上海新诺实验仪器有限责任公司；紫外线-由此可见光度计（UV-1800PC-DS2）：上海美谱达仪器设备有限责任公司。

1.3 实验方式

1.3.1 试品制取

取荼叶试品破碎，精确称量0.5g荼叶破碎过80目筛，干躁至恒重备用。

1.3.2 获取加工工艺提升

本试验运用响应面法提升荼叶中茶氨酸获取加工工艺。

1.3.2.1 单要素试验

选择超声波获取和开水萃取法二种获取方式 ，获取時间、获取溫度、非均相比、有机溶剂浓度值4个单要素，运用单要素试验明确获取标准范畴。

1.3.2.2 CCD响应面法获取

依据单要素实验結果，各自选择溫度、乙醇浓度、获取時间做为回应自变量，自变量的水准以-1、0、1表明，以荼叶提取液中总酚成分为响应值，利用计算机DesignExpert8.0.6开展三要素三水准实验方案设计和数据统计分析。荼叶中茶氨酸获取秘方提升试验设计如表1所显示。

1.3.2.3 总酚成分的测量

精确称量没食子酸标准物质200mg加小量70％酒精将试品融化，用70％酒精滴定剂至100mL混匀，静放。再用移液器汲取20mL，用70％酒精滴定剂至100mL，混匀，配出浓度值为400μg/mL的没食子酸标液，备用。精确汲取没食子酸标液0mL、0.05mL、0.1mL、0.15mL、0.2mL、0.25mL于试管婴儿中。各自添加纯净水2.0mL、1.95mL、1.9mL、1mL、1.85mL、1.8mL、1.75mL再各添加福林实验试剂1mL，充足震荡后静放3～4min，各自添加10％碳酸钾1mL于25℃，混匀放置恒温水浴槽中反映2h，与此同时做实验试剂空缺，于765nm下测量OD值，以成分对OD值开展平行线重归，测算线性回归方程。将萃取液离心式，取上清液，按标曲制作的测定法，先后添加实验试剂，以实验试剂空缺作对照品，在765nm处测量OD值，测算茶氨酸成分做为响应值。