近些年，伴随着食品行业的迅速发展趋势，食用添加剂在缓解食物的色香味俱全及食物质量等领域的功效愈发突显。现阶段较常用的食用添加剂有添加剂、甜味素、抗氧剂、添加剂等。为标准食用添加剂的应用，确保顾客的产品质量安全性，在我国GB2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》对各种食用添加剂的运用标准及相对应限定都进行了明文规定。在其中，糖精钠做为甜味素，在点心中不能应用，但鉴于其糖度高、质优价廉，经常被非法店家超出范围用以点心生产过程；脱氢乙酸做为添加剂，在点心中的应用限定为0.59/kg，但超限定应用脱氢乙酸的状况屡有报导。因而，监督机构务必对点心中糖精钠、脱氢乙酸的需求量开展严格要求。

在我国国家行业标准，GB5009.28及GB5009.12一分别要求了食品类中糖精钠和脱氢乙酸的检查方式 ，但二者不可以一起检验。参考文献有关糖精钠的测量方法关键有液相色谱仪法和液质联用法；脱氢乙酸的测量方法关键有：液相色谱仪法、气相色谱分析、液质联用法及气场法。在其中高效液相法因使用简易、不用衍化化、应用低成本等优势，仍是当前测量食用添加剂的优选方式 。徐渊金等报导了糖精钠和脱氢乙酸与此同时测量的方式 ，方式应用紫外线探测器判定定量分析，因为紫外线探测器只靠保存期判定，没法预防与总体目标成分保存期相仿的残渣成分的影响，对栽培基质繁杂的点心试品来讲，通常会使测定結果较高，乃至造成 阳性結果发生；王健等报导了HPLC迅速测量月饼中5种添加物的方式 ，方式选用等度过柱，脱氢乙酸的色谱仪峰显著托尾。对于以上方式存在的不足，文中从色谱仪分离出来、判定、定量分析等领域对高效液相色谱色谱法与此同时检验点心中糖精钠和脱氢乙酸干了提升和改善。方式 选用二极管列阵探测器，在获得被测化学物质OD值的与此同时，还能开展光谱图的较为，提升判定的精确性。根据提升流动性相的类型、过柱梯度方向及离子交换柱，完成糖精钠和脱氢乙酸的与此同时测量，且使脱氢乙酸的托尾状况获得抑止，提升 了方式定量分析的精确性。方式的创建，解决了点心中糖精钠和脱氢乙酸无法与此同时测量的难点，减少了剖析時间，提升 了工作效能，为食品安全监管工作人员给予有益的服务支持。

一、原材料与方式

1、原材料与实验试剂

工业甲醇(色谱纯，英国Fisher企业)；乙酸铵(分析纯，国药控股有限责任公司)；氢氧化钠溶液(分析纯，国药控股有限责任公司)；磷酸二氢钠(分析纯，国药控股有限责任公司)；脱氢乙酸(CAS：520-45-6，标准物质：纯净度≥99.5％；法国Dr企业)，二水合糖精钠(CAS：82385-42-0，标准物质：1.0mg/mL，纯净度≥99.5％；中国计量科学院)。0.45μm微孔滤膜：有机化学系。

2、仪器设备与机器设备

高效率液相色谱：配二极管列阵探测器(e2695，英国waters企业)；电子分析天平(感量0.1mg，MS204，梅特勒企业)；电子分析天平(感量lmg，MS303，梅特勒企业)；超声波清洗器(宁波新芝有限责任公司企业)；离心脱水机(3-18k，法国sigma企业)；旋涡混合器(英国IKA企业)。

3、方式与流程

（1）标液配置

精确称量脱氢乙酸标准物质100mg(精准至0.1mg)于100mL容量瓶中，用10mL0.1mol/L氢氧化钠溶液水溶液融解，并自来水滴定剂至标尺。各自汲取一定容积的脱氢乙酸储备液及糖精钠标液于100mL容量瓶中，自来水滴定剂。配置成浓度值先后为0.4μg/mL、1.01μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL的混和规范切削液。

（2）色谱仪标准

离子交换柱：AtlanfisT3(250mm*4.6mm，5μm，英国waters企业)；流动性相A为工业甲醇，B为10mmol/L醋酸铵(冰醋酸调PH=5.5)，过柱梯度方向为：0～5min，16％A，5.1min～15min，28％A，15.1min～20min，80％A，20.1min，16％A，维持10min；柱温：35℃；气相容积：10μL；检验光波长：230nm。

（3）试品解决

称量试品2g(精准至0.001g)，放置25mL离心管架中，添加约10mL水、0.5mL0.5mol/L氢氧化钠溶液水溶液，振摇，超声波10min，取下，再各自添加lmL0.42mol/L磷酸二氢钠水溶液和1mL0.5mol/L氢氧化钠溶液水溶液，用劲振摇后，自来水滴定剂至标尺，混匀。静放分层次，取上清液过0.45μm有机滤膜，渗沥液供高效率液相色谱仪测量。

二、結果与探讨

1、试品前解决方式提升

点心试品带有人体脂肪、蛋白质、木薯淀粉、糖原等各种成份，栽培基质繁杂，对前解决需要较高。本方式科学研究了不一样混凝剂对总体目标剖析物利用率的危害。较为了氢氧化钠溶液和磷酸二氢钠沉积管理体系及亚铁氰化钾和乙酸锌沉积管理体系的积累实际效果。不一样加标水准的试品经二种沉积方法解决后所得的利用率的较为见表1。由表1发觉，试品经氢氧化钠溶液和磷酸二氢钠沉积后，二种剖析物的利用率显著高过用亚铁氰化钾和乙酸锌沉积的试品。试验还调查了混凝剂的使用量(0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL)对目的物利用率的危害。混凝剂使用量小，沉积实际效果较差；使用量大，易造成很多絮状物沉积，对目的物造成差异水平的吸咐，使利用率减少(图1，混凝剂的使用量以磷酸二氢钠的使用量表明)。综合性考虑到，挑选lmL0.5mol/L氢氧化钠溶液和lmL磷酸二氢钠水溶液为试品混凝剂。

方式还较为了试品获取时，氢氧化钠溶液的加盟对脱氢乙酸利用率的危害。发觉试品添加0.5mL氢氧化钠溶液，能明显增强脱氢乙酸的获取利用率，这也是因为氢氧化钠溶液的添加，使试样中的脱氢乙酸转换为水溶很强的脱氢乙酸钠，进而扩大了总体目标物的在水相获取管理体系中的溶解性，方式的利用率获得提升。

2、色谱仪标准的提升

（1）离子交换柱的挑选

完成糖精钠和脱氢乙酸的与此同时测量，挑选适宜的离子交换柱尤其重要。试验调查了SemetryC18，XbrigdeC18及AtalatisT3C18色谱柱的分离出来实际效果。結果发觉，三种离子交换柱对糖精钠和脱氢乙酸都是有不错的保存，可是，SemetryC18及XbrigdeC18色谱柱，糖精钠和脱氢乙酸的保存期十分贴近，仅借助更改流动性看中工业甲醇的占比难以达到二者的基准线分离出来，且脱氢乙酸托尾比较严重，比较严重危害定量分析的精确性。选用AtalatisT3C18色谱柱，能非常好解决了脱氢乙酸的托尾难题，与一般C18色谱柱对比，峰形获得了很大地改进。

（2）流动性相提升

脱氢乙酸的电离常数为4.1，根据调整pH，使脱氢乙酸以单一分子结构方式或彻底正离子方式存有，峰形对称性，而糖精钠的保存不会受到流动性相pH的危害。根据提升，挑选醋酸铵流动性相的pH为5.5。根据提升流动性相梯度方向，使糖精钠和脱氢乙酸的保存期适度，与残渣非常好的分离出来。在提升的流动性相标准下，糖精钠、脱氢乙酸混和标液色谱(5μg/mL)见图2。