薇菜做为服用蔬菜水果已经有悠久的历史，以往在荒年是救杂草，已经踏入高档餐桌，其经济收益为一般蔬菜水果的4～5倍。天然的薇菜细嫩味美，营养丰富，未进行的叶子尤其佳品。薇菜既可生鲜，又可腌制、制干，是向日本出入口的大宗商品土特产山野菜。清煮薇菜中具体带有添加剂和甜味素，因为日本的规范苛刻，因而检验出入口食品类中的食用添加剂成分做到规范，针对中国食用添加剂成分的检查也是一种确保。

在我国规范检验办法有很多，如滴定法、酶活性测定、薄层色谱法、气相色谱分析等，但全是对试品各自解决开展不一样办法的测量，沒有与此同时监测的方式 。如今相对性优秀的检测中心都是在科学研究这5种食用添加剂与此同时监测的方式 ，对于于差异的栽培基质应用不一样方式，现阶段依照检验试品的差异大概能够分成肉类食品、健康饮品、奶制品、含油率高的栽培基质和一般栽培基质等检验方式。在中国国家标准中，最开始发生针对食用添加剂检验的是在2003年，那时候的检验对于于独立的添加物且方式比较落伍。此方法选用一种简易的前解决方式，应用的试品为清煮薇菜，栽培基质简易容易得到，用高效液相色谱色谱法对5种添加物与此同时气相，一次检验获得多种多样結果，大大的减少了人力资源、物力资源和時间，結果精确靠谱。

一、原材料与方式

1、原材料与实验试剂

工业甲醇（色谱纯）：FisherScientific公司；乙酸铵（分析纯）、称量1.54g乙酸铵放水融解并稀释液至1000mL，静放，过0.45μm直径滤纸，硫酸（分析纯）：量取100mL硫酸，与100mL水完全混和，静放）；氢氧化钠、医用乙醚（分析纯）：天津科密欧化学药品有限责任公司；试验自来水为名创优品纯净水

2、仪器设备与机器设备

LX—130离心脱水机（温度控制）日本TOMY企业；UW402S电子分析天平，梅特勒一托利多有限责任公司；UMV一2多管涡流切换阀，北京市优晟协同高新科技有限责任公司；Agilent一1100高效率液相色谱，安捷伦公司；50mL离心管架、10mL容量瓶、移液器、一次性塑料吸管、pH试纸、0.5μm水溶性滤纸等。

3、试品前解决

大部分试品中出现很多大分子物质，如蛋白、人体脂肪等，必须 应用混凝剂开展清洁解决，如乙酸锌、亚铁氰化钾等，但本试品不带有以上大分子物质，故不用开展净化处理实际操作。

此方法为反说法，将要试品中的食用添加剂先正获取到医用乙醚层中，后自来水反获取至隔水层中，定量分析检验隔水层中的食用添加剂。

将清煮薇菜经粉碎处置后，称量2.0g试品于50mL离心管架中，放水10mL和0.5mL硫酸（1 1）开展碱化解决。添加医用乙醚8mL波动获取2次（共16mL），合拼萃取液。将萃取液波动，离心式（4000r／nlin，5min），弃掉下一层隔水层，向萃取液中精确添加10.0mL水，加氢氧化钠调整pH为7～8，波动离心式（4000r／min，5min），取下一层隔水层过0.45μm水溶性滤纸。

4、标准物质配置

国家标准物质纯品溶液稀释，配置成10mg／L浓度值的贮备液，将贮备液稀释液成0.01，0.03，0.05，0.07，0.09，0.10rng／mL的标液，用以测量标曲。

5、离子交换柱标准

WatersSymmetryShieldC18（150mm×4.6mm，5μm）离子交换柱，流动性相为0.02mol／L乙酸铵一工业甲醇（100 5）缓冲液，检验光波长为220mm，紫外线探测器，柱温25℃，流动速度1mL／min，进样量10μL。

6、精准度测量

为确保实验精准度，取6份试品各自序号1，2，3，4，5，6，各称量2g于50mL离心管架中，添加10mL水和0.5mL硫酸（1 1）开展碱化解决。各自添加8mL医用乙醚获取2次（共16mL），合拼萃取液经波动离心式（4000r／min）5min，弃去下一层隔水层，精确添加10.0mL水，用氢氧化钠调整pH为7～8，波动离心式（4000r／rnjn，5min），取下一层隔水层过0.45μm水溶性滤纸。

7、精确度测量

为确保实验方式获取到的添加物成分的实效性，人为因素地为试品中加上定量分析国家标准物质开展检验，根据利用率分辨样本的检验效果是不是合理。很多研究证实，当利用率在85％～110％中间时，結果靠谱。向试品中添加1mg／L的混标水溶液，与试品开展一样的前解决流程，经0.45μm滤纸过虑后入仪器检测。

二、結果与剖析

1、标曲的创建

对混标稀释液后浓度值为0.01，0.03，0.05，0.07，0.09，0.10mg／mL的规范系列产品水溶液开展测量，以浓度值为横坐标轴，峰总面积为纵轴，制作标曲，各自获得线性回归方程，见表1。安赛蜜、糖精钠、苯甲醛、山梨酸、脱氢乙酸钠这5种添加物的出峰图见图1，依照出峰的時间分别是安赛蜜、糖精钠、苯甲醛、山梨酸、脱氢乙酸钠。

由表1得知，该混标水溶液出峰時间分散化，在方法检出限浓度值范畴内呈优良线性相关。

由图1得知，5种添加物出峰间隔时间显著，且峰不会有重叠状况，即假如试品中包含以上5种添加物，谱图上会在对应部位出峰。

2、试品测量

对清煮薇菜应用反说法检验食用添加剂成分，其結果见表2，谱图见图2。

对比分析1和图2能够 看得出，图2中的谱图沒有在对应部位出峰，因此清煮薇菜试品中不带有安赛蜜、糖精钠、苯甲醛、山梨酸、脱氢乙酸钠这5种食用添加剂。

3、精准度实验

为确保试品的精准度，各自对清煮薇菜开展6次平行面实验，实验結果见表3。
 

由表3得知，开展6次平行面实验均无验出添加物，很有可能的具体情况是带有添加物，但成分小于方法检出限造成 未验出；另一种情形是均没有添加物，故无验出。以上2种状况均做到规范，結果判断为清煮薇菜不带有安赛蜜、糖精钠、苯甲醛、山梨酸、脱氢乙酸钠5种添加物。

4、精确度实验

为了更好地确保检验的精确度，开展回收利用实验，标曲见图3，結果见表4。

由图3和表4得知，人为因素添加带有混标底试品检验結果是带有防腐剂的，且同一种方式回收利用获得的添加物成分不一样。利用率能够 证实该方式获得的結果可靠，由于在前处理中获取获得的添加物会出现一定程度上的损害；当利用率小于100％时证实获取不彻底或是有损害；当利用率高过100％时，表明试品中另外也带有该添加物。此方法的相关系数r均在0.999之上，利用率在89％之上，表明实验結果靠谱。

5、結果测算

试品中山梨酸、苯甲醛、脱氢乙酸钠、安赛蜜、糖精钠的成分依照下式测算：

式中：X为试品中食用添加剂成分，mg／kg；A为气相容积中食用添加剂的成分，mg；V为试件稀释液容积，mL；m为试件品质，g。

三、探讨

实验说明：对试品开展粉碎、萃取法后，应用WatersSymmetryShieldC18（150mm×4.6mm，5μm）离子交换柱，流动性相为0.02mol／L乙酸铵一工业甲醇（100 5）缓冲液，检验光波长为220mm，紫外线探测器，柱温25℃，流动速度1mL／min，进样量10μL时，混标中安赛蜜、糖精钠、山梨酸、苯甲醛、脱氢乙酸钠的出峰時间各自为4.785，6.681，8.117，11.310，12.987min，试品中未验出。不一样利用率说明在实验过程环节中，会出现不明原因的损害，可能是获取時间不够，可能是获取实验试剂也有待改进，也有可能是现场采样不立即，造成 一部分添加物溶解。在国家标准中以清煮薇菜为例子，应用反说法检验5种食用添加剂，方式简单，能够节省大量的人力资源、物力资源，节约成本和資源，加速工作效能。