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液相色谱内标法测定婴幼儿配方食品中色氨酸含量(一)

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-23 09:34:36 关注: 0 次
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以α-羟基-谷氨酸为内标物,创建了碱水解反应-高效液相色谱色谱分析测量婴幼儿配方奶粉及独特医药学主要用途宝宝秘方食品类中谷氨酸成分的方式 。试品经碱溶液水解反应,C18柱分离出来,莹光探测器检验;内标法定量分析,校准水解反应全过程谷氨酸的损害,减少栽培基质相互间的差别,提升定量分析結果的精确性;在普遍试品成分水准加标,试品的利用率为92.5%~97.4%中间,相对性相对标准偏差<3.11%,试验室间误差<6.7%。方式使用简易、精确度高,可重复性好,适用婴幼儿配方奶粉及独特医药学主要用途宝宝秘方食品类中谷氨酸的精确判定定量分析。

谷氨酸是身体的必须氨基酸之一,参加人体蛋白的生成和新陈代谢调整,它是维生素b3、5-5羟色胺、褪黑色素等生物活性成分的磷酸激酶物,危害蛋白、糖原和人体脂肪等营养元素的新陈代谢。当身体欠缺谷氨酸的时候会造成肌肤疾病、玻璃体衰退及心肌纤维化等症状。相比于成年人,婴儿阶段成长发育快速,在该阶段谷氨酸以及类化合物对脑部的生长发育和对进餐-饱腹、睡眠质量-覺醒规律性等神经系统个人行为调整发展趋势尤为重要,因而一定要确保婴幼儿食品中营养元素的占比和品质。针对消化阻碍、代谢紊乱或特殊病症情况的小孩对营养或饮食有更加特别的要求。

婴幼儿配方奶粉和独特医药学主要用途宝宝秘方食品类做为特殊群体的食品来源于,其营养元素构成在国家行业标准上都有特别要求,对谷氨酸的占比和加上方式都是有相应的规定,但缺少相对应的检查办法规范。现阶段,测量谷氨酸的检查办法有包含光度法、电解法、碳水化合物检测仪法、高效液相色谱色谱法、液相色谱仪串联质谱法和离子色谱法等,液相色谱仪方式的非特异和定量分析精确性均有优点。谷氨酸多以蛋白的方式出现于试品中,需水解反应为化合态后才可以测量。现阶段一般采取的碱水解反应方式长期在高溫、浓度较高的烧碱溶液标准下开展,谷氨酸有一定损害,且在不一样的栽培基质中谷氨酸的损害水平不完全一致。

本分析在經典碱水解反应方式的根基上引进构造与谷氨酸类似的内标物α-羟基谷氨酸,以内标法定量分析,使同一水解反应标准与此同时适用婴幼儿配方奶粉和独特医药学秘方婴幼儿配方食品类(乳蛋白一部分水解反应秘方、乳蛋白深度水解秘方和碳水化合物秘方)中谷氨酸成分的精确测量。

1原材料与方式

1.1 原材料与实验试剂

谷氨酸标准物质(C11H12N2O2,CAS号:73-22-3,纯净度:99.7%),法国Dr.Ehrenstorfer企业;α-羟基-谷氨酸标准物质(C12H14N2O2,CAS号:110117-83-4,纯净度:98%),上海市甄准生物技术有限责任公司;工业甲醇(色谱纯),英国Merck企业;醋酸铵(色谱纯),英国Fisher Chemical企业;甲酸(色谱纯),Fisher Chemical企业色;氢氧化锂(分析纯),国药控股化学药品有限责任公司;硫酸(分析纯),国药控股化学药品有限责任公司;聚四氟乙烯材料水解反应管,带外螺纹口外盖,里衬聚四氟乙烯密封垫片;水相微孔滤膜(0.22 μm,上海安谱);NIST秘方奶粉质量控制样1849a((184±10)mg/100g, k=2)、NIST秘方奶粉质量控制样1869((228±24)mg/100g, k=2)、婴幼儿配方奶粉和独特医药学秘方婴儿食品(乳蛋白一部分水解反应秘方、乳蛋白深度水解秘方和碳水化合物秘方),均为市面上。试验室自来水合乎 GB /T 6682 要求的一级水规定。

1.2标液配置

谷氨酸标液(100 μg/mL):精确称量10.0 mg谷氨酸标准物质自来水融解后滴定剂至100 mL;内标切削液(1 mg/mL):称量10 mg α-羟基-谷氨酸标准物质自来水融解后滴定剂至10 mL。

1.3仪器设备与机器设备

Thermo Ultimate 3000高效率液相色谱装有莹光探测器,英国Thermo Fisher企业;KQ-800DE超声清洗仪,宁波新芝生物技术股权有限责任公司;MS204TS电子分析天平,法国梅特勒企业;DHG-9243BS-Ⅲ电热干燥箱,上海市幼芽医疗机械生产制造有限责任公司;MS 3 basic涡流切换阀,法国IKA企业;IQ 7000超纯水仪;英国 Millipore 企业。

1.4试品前解决

精确称量混和均衡的液体试件200 mg(精准到1 mg)于装有密封垫片的具塞外螺纹口聚四氟乙烯离心管架中,先后添加0.5 mL内标切削液、5 mL氢氧化锂水溶液(4 mol/L),涡流搅拌后于超音波震荡器中波动5 min,确保试品充分分解后,放置110 ℃烘干箱中水解反应20 h。取下水解反应管,待制冷至常温后,用盐酸溶液(4 mol/L)调pH值至3~8,将水解反应液所有迁移至50 mL容量瓶中并自来水滴定剂,搅拌后经0.22 μm水相微孔滤膜过虑预留。

1.5仪器设备标准

离子交换柱:Xbridge C18(3.5 μm, 150 mm×4.6 mm);流动性相:A为乙酸铵水溶液(10 mmol/L,pH =4.0),B为工业甲醇,梯度方向过柱,过柱程序流程见表1;柱温:35 ℃;气相容积:5 μL;莹光探测器激起光波长280 nm,发送光波长346 nm。梯度方向过柱程序流程见表1,每一次气相前原始流动性相占比均衡5 min。

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