在饮品生产加工领域中,一般添加各种各样食用添加剂用于改进饮品的口味、质量和颜色,并能延长保存期。饮品中常用的食用添加剂包含甜味素(糖精钠)、人造黑色素(日落黄、亮蓝、苋菜红、诱惑红、柠檬黄、焦糖色)、添加剂(山梨酸、苯甲醛)及咖啡碱等。虽然在我国国家行业标准中早已明文规定了食用添加剂容许采用的标准和使用量,但长期性、很多服用带有食用添加剂的饮品,一样会对身体健康产生一定的风险性。因而,检验饮品中多种多样食用添加剂的成分对确保食品卫生安全具备关键实际意义。
近些年,与此同时检验多种多样食用添加剂的办法愈来愈多,常见的检查办法有高效液相色谱色谱法、薄层色谱法、质谱分析联使用方法、气相色谱分析、极谱法等。殊不知,针对多组分混合物质的剖析,绝大多数方式均存在一定的局限。如薄层色谱法测量多组分混合物质时,操作流程繁杂,且定量分析精确度较弱;色谱仪一质谱分析联使用方法尽管在屏幕分辨率和敏感度这方面有一定优点,但其仪器设备价格昂贵、不容易普遍推广;极谱法易受各种影响要素的危害,判定比较艰难;液相色谱仪法是当前使用最普遍的统计分析方法,但传统式的液相色谱仪法针对与此同时检验多组分混合物质时,剖析用时长、气相量大、检验高效率低。
本科学研究运用极高液相色谱仪技术性与此同时快速检测日落黄、亮蓝、苋菜红、诱惑红、柠檬黄、焦糖色、山梨酸、苯甲醛、糖精钠及咖啡碱等10种食用添加剂,可大幅提高多种多样成分的分离出来工作能力,提升 了剖析速率及敏感度,为食品卫生安全的检查带来了必不可少的服务支持。
1、关键设备和实验试剂
仪器设备:超高效率液相色谱[watersAcquiryH-Class,配二极管列阵探测器(PDA),Empower3色谱仪工作平台];ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×50mm,1.7μm);紫外线由此可见光度计(SP-1900UV);汉语显示屏超声波清洗器(昆山市美美哒超声波仪器设备有限责任公司);TB-214型1/万分之一电子分析天平(北京市赛多利斯);快速冷冻离心机(T11eIulloFisher);超纯水机(Millipore公司);0.22μm微孔滤膜过滤装置。
标准物质:日落黄、亮蓝、苋菜红、柠檬黄、焦糖色、咖啡碱标准物质浓度值均为0.5mg/mL,诱惑红、混和水溶液(苯甲醛、山梨酸、糖精钠)标准物质浓度值均为1.0mg/mL,均购白中国计量科学院。
实验试剂:乙酸铵(优级纯、CNWAmmoniumacetateforHPLC);工业甲醇(色谱纯、英国MERCK企业);乙腈(色谱纯、英国MERCK企业);试验自来水均由Milli-Q超纯水机制得。50μg/mL10种添加物混和规范贮备液配备:各自精确汲取2.5mL浓度值均为0.5m∥mL的日落黄、亮蓝、苋菜红、柠檬黄、焦糖色、咖啡碱标准物质及1.25mL浓度值均为1.0mL诱惑红、混和水溶液(苯甲醛、山梨酸、糖精钠)标准物质于25mL容量瓶中,自来水滴定剂至标尺。
混和规范系列产品:精确汲取一定容积的混和规范贮备液(50μg/mL)各自配置成浓度值为0、0.05、1.0、5.0、10.0、20.0、40.0、50.0μg/m标液系列产品。
2、色谱仪标准
离子交换柱为ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×50mm,1.7μm),柱温30℃,进样量:3μL,流动速度为0.15mL/min,检验光波长为230nm。流动性相各自为工业甲醇(A)和0.02mol/L乙酸铵(B),流动性相的梯度方向过柱程序流程如下所示表所显示:
1、试验标准的提升
(1)离子交换柱的挑选
本实验考查了离子交换柱ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×50mm,1.7μm)与色谱仪ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×100mm,1.7μm)的分离出来实际效果。结果显示,挑选柱长为100mm的离子交换柱时,每组分离出来峰時间增加,而且色谱仪峰响应值低;而挑选柱长为50mm离子交换柱时,全部成分混合物质可在10min内达到迅速剥离的必须 ,所得的峰形锐利且分离度好。因而,本实验挑选ACQUITYUPLCBEHC18(2.1mm×50mm,1.7μm)做为方式最好离子交换柱。
(2)检验光波长的挑选
用紫外线-由此可见光度计在200~800nm光波长处对10种食用添加剂开展扫描仪,自来水作对照品。
其基本色峰:焦糖色428nm、日落黄475nm、引诱红506nm、烟脂红511nm、苋菜红522nm、亮蓝637nm、苯甲醛228nm、山梨酸248nm、糖精钠251nm、咖啡碱273nm,可基本判定判断10种食用添加剂在紫外线-由此可见光度计的最高消化吸收光波长。再运用UPLC-PDA探测器在200~600nm光波长范畴内对混和标液开展扫描仪,发觉在230nm光波长处10种食用添加剂分离度好、敏感度高,故最后挑选230nm做为检验光波长。
(3)流动性相的挑选
本实验各自调查乙腈/工业甲醇-乙酸铵缓冲溶液,乙腈/工业甲醇-磷酸二氢钾缓冲溶液,乙腈/工业甲醇-水缓冲溶液做为流动性相管理体系的分离出来实际效果。结果显示,当流动性相为工业甲醇-乙酸铵缓冲溶液时,10种总体目标物完成彻底分离出来,与此同时本实验对乙酸铵物质的量浓度各自为10、20、40mmol/L开展了较为。结果显示,当乙酸铵浓度值低于20mmol/L时,苯甲醛和山梨酸色谱仪峰无法得到彻底分离出来,亮蓝和咖啡碱色谱仪峰重合在一起(见图3a);当乙酸铵浓度值超过20mmol/L时,各成分分离度差,危害方式无法判定(见图3b)。除此之外,当流动性看中酸盐物质的量浓度过高,非常容易造成UPLC离子交换柱阻塞,危害离子交换柱的柱效。因此本实验采用工业甲醇-20mmol/L乙酸铵水溶液做为流动性相管理体系,不但能够改进分离出来效率,还可以做到减少现场采样的目地。