5、最陡上坡试验

挑选适宜的步幅，对X₂、X₂、X₆，3个明显要素开展最陡上坡试验，結果如表3所显示，随X₂，X₂，X₆成分的提升，发酵物中黑色素OD值值(Y)先上升后减少，在第3组做到最大，因而以第3组浓度值做为响应面试验的定位点。

6、响应面实验方案设计及結果

依据最陡上坡试验結果，对X₂，X₂，X₆开展响应面设计方案，各要素水准如表4所显示，响应面试验设计及結果如表5所显示。对试验结论开展数学方程线性拟合，获得黑色素吸光度值(Y)与3个显著性差异要素的二次回归分析：

吸光度值=1.0037 0.0204X₂ 0.0489X₄ 0.0442X₆-0.1100X₂X₂-0.0925X₄X₄-0.1522X₆X₆-0.0132X₂X₄ 0.0595X₂X₆ 0.0640X₄X₆

有回归分析的方差分析(表6)得知：F=8.08、P=0.017(P＜0.05)表明回归分析明显，决定系数R²=0.9357(R²＞0.85)，失拟项P=0.052(P＞0.05)表明失拟项不明显、回归分析拟合程度优良。由表7得知X₂X₂，X₄X₄的P值低于0.05，说明NaN0₃、MgS0₄·7H₂0的二次项模型拟合具备明显危害，X₆X₆的P值低于0.01，说明CS的二次项模型拟合具备极明显危害，而一次项和交互项的显著性差异较弱，也证实了各要素与响应值中间并不是线性相关。

运用Minitabl7获得该实体模型X₂、X₄、X₆的极大值各自为0.1313、0.3333、0.2323，融合最陡上坡实验方案设计的基本原理获得X₂、X₄、X₆的实际值各自为0.6803、0.0366、14.4646，操作过程中可用X₂=0.68、X₄=0.037、X₆=14.5，故提升后的发醇培养液的成份为：NaNO₃ 0.68g/L，K₂HPO₄ 0.48g/L，MgSO₄·7H₂O 0.037g/L，CaCl₂·2H₂O 0.036g/L，葡萄糖水18g/L，CS14.5mL/L，TM1mL/L。历经可重复性试验获得提升后培养液中黑色素OD值数值1.004，是提升前0.612的1.64倍。

三、结果

（1）细菌DT06造成的淡黄色黑色素是一种新黑色素，为多甲基化学物质。

（2）DT06黑色素有优良的抗氧化和可靠性，具备潜在性使用使用价值。

（3）培养液提升后DT06黑色素的生产量是提升前的1.64倍。