二、結果与剖析

1、提升的衍化实验试剂成分

挑选丹磺酰氯做为衍化剂，其填加量提升結果见图1。在丹磺酰氯加上量5～10mg/mL范畴，伴随着填加量的提升，各微生物胺的峰总面积提升；当丹磺酰氯加上量高于或等于10mg/mL时，各微生物胺峰总面积不会再精密零部件加上量的提高而提升，基本上维持不会改变，说明所衍化的微生物胺做到饱和。选择10mg/mL的丹磺酰氯水溶液做为本实验的衍化实验试剂。

2、提升的色谱仪标准

较为ThermoHypersilGOLDC18柱（柱长250mm，柱內径4.6mm，柱填充料粒度5μm）与安捷伦仪器InertsilODS-4C18柱（柱长150mm，柱內径4.6mm，柱填充料粒度5μm）对各微生物胺的分离出来实际效果。经250mm离子交换柱分离出来后，9种微生物胺在37min内彼此之间分离出来且峰形对称性。经150mm离子交换柱分离出来后，37min内色谱中仅有8种微生物胺的排出峰，没法在37min内分离出来9种微生物胺。

3、提升的过柱标准

流动性相A与B的占比见表1。根据不断地调节流动性相A与B的成分，获得最佳过柱程序流程计划方案2。选用计划方案2对9种微生物胺混标水溶液开展过柱分离出来，各微生物胺排出峰彼此之间分离出来实际效果不错。

4、提升的试验方案

较为提纯解决对微生物胺含量检测的危害。计划方案1立即对微生物胺衍化，而计划方案2在对微生物胺衍化以前开展提纯聚集解决。选择尸胺、硫酸吡哆胺与β-苯乙胺3种微生物胺，较为提纯解决对微生物胺检验作用的危害，結果见表2。剖析得知，对微生物胺提纯解决后再衍化，微生物胺损害水平减少，在试品繁杂的栽培基质中对微生物胺的检验实际效果更好，这表明对试品开展提纯、净化处理的必要性。

5、线性相关与方法检出限

依照所确立的方式 ，将配置好的梯度方向系列产品标液（50.00，25.00，5.00，1.00，0.50，0.25，0.20，0.10，0.05mg/L）开展线形实验。对规范物质的量浓度（X）对其峰总面积（Y）开展线性回归方程线性拟合，根据R²开展关联性点评。9种微生物胺的方法检出限（LOD）与定量限（LOQ）根据3倍频率稳定度（S/N=3）与10倍频率稳定度（S/N=10）测算，結果见表3。提升的色谱仪标准程序流程过柱后，混标中各微生物胺色谱仪峰图如图所示1所显示，各微生物胺加标米酒试品中的色谱仪峰图如图所示2所显示。

由表3得知，9种微生物胺在0.5～50mg/L浓度值范畴，该办法有着优良的线性相关，相关系数rR2均超过0.998。方法检出限范畴0.07～0.22mg/L，定量限范畴0.07～0.73mg/L。分析图表1与图2后发觉37min过柱与分离出来后，9种混和微生物胺色谱仪峰依次排出，被取得成功分离出来。

6、加标回收

选择3种微生物胺做加标回收实验，向米酒试品中添加3种浓度值水准的混和标液，加标量各自为1.0，5.0，10.0mg/L，其浓度值均在线形范畴。用所确立的办法开展前解决与测量，各加标水准试品平行测定3份，結果见表4。3种微生物胺加标回收率在83.30%～114.70%中间，相对性相对标准偏差（RＳD）均小于4.56%，表明该办法对微生物胺的检验結果比较精确，可重复性好。

7、具体试品剖析

用所确立的办法剖析米酒与纯粮酒中微生物胺成分，結果见表5和表6。由表5得知，米酒中带有8种微生物胺，总成分为29.39mg/L，各微生物胺成分均有差别。色胺与尸胺为该米酒试品中的关键微生物胺，成分各自为（18.06±0.012）mg/L与（4.28±0.059）mg/L，β-苯乙胺成分为（1.21±0.021）mg/L，腐胺成分为（2.15±0.002）mg/L，硫酸吡哆胺成分为（2.45±0.028）mg/L，组织胺成分为（0.40±0.049）mg/L，酪胺成分为（0.75±0.003）mg/L，亚精胺成分为（0.09±0.003）mg/L，精胺未验出。纯粮酒检验結果见表6。纯粮酒中微生物胺总成分在3.83～7.94mg/L中间，在其中组织胺在4种纯粮酒中被验出，精胺只在一种纯粮酒中验出，其他7种微生物胺在5种纯粮酒中都被验出。较为米酒与纯粮酒中各微生物胺成分能够 发觉，米酒中的微生物胺总成分高过纯粮酒。这与以前科学研究报导一致。尽管二者均选用酿制加工工艺，可是中后期加工工艺不一样，米酒不用水蒸气蒸馏解决，而纯粮酒需水蒸气蒸馏解决，水蒸气蒸馏后酒质中微生物胺成分大大减少。此外，催化反应碳水化合物脱羧反应转化成微生物胺的脱羧酶，在pH4.04～4.33的米酒酿制环节中被诱发生成，造成 米酒中微生物胺成分相比较多。

三、结果

选用HPLC-紫外线测定法，丹磺酰氯柱前衍化梯度方向分离出来过柱米酒与纯粮酒中的微生物胺，在37min内完成了二种酒质中9种微生物胺的分离出来。较为剖析米酒与纯粮酒中微生物胺成分，結果该方式精确性好，可快速检测9种微生物胺成分。