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纸莎草的化学成分研究(一)

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-23 09:07:16 关注: 0 次
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纸莎草(Cyperuspapyrus)为莎草科(Cyperaceae)沙草属(Cyperus)绿色植物,是一种又高又大的水生物或水湿生植物。纸莎草又被称为纸草、印度沙草或印度纸草,原生在欧洲地区南边、非州北边及其小亚细亚地域,是组成较水深中植物群落的关键绿色植物。纸莎草是古埃及文明的一个主要构成部分,古代埃及运用其制作的撰写媒介,曾被西方人和比利时人应用,历3000年长盛不衰,直到公年8新世纪,我国造纸术的发明传入中东地区替代了莎草纸。

纸莎草具备较强的水质净化处理作用,多被培植和改进为水质景观植物。现阶段世界各国对纸莎草的分析关键在其污水净化作用层面,有关其成分的探讨很少,生物活性层面除开护肤美白功效外很少有报导。纸莎草的同科同为绿色植物沙草(C.rotundus)的干躁地下茎为《中国药典》载于的常用中药香附,具备解热镇痛和抗感染等活力,临床医学常见于治疗痛经、月经失衡和胃肠紊乱等症状。核因素-κB(NF-κB)是体细胞内主要的核转录因子,它参加人体的炎症介质和体液免疫全过程,NF-κB转录因子的过多激话,与人们包含癌病以外的多种多样发炎关联性病症的产生发展趋势密切相关,因而抑止NF-κB转录因子的过多活性,有可能变成有关疾病的治疗方式。为了更好地深入分析纸莎草有机化学及活力成份,对纸莎草整株开展了科学研究,从这当中分离出来评定了19个化学物质,并看到了9个对TNF-α诱发激话的NF-κB转录因子有抑制效果的活力化学物质。

1试验一部分

1.1绿色植物原材料

纸莎草整株由昆明市植分生物科技有限责任公司于2018年8月收集于昆明市马金铺,试品经云南省中国医药大学李国栋副教授职称评定为纸莎草的狼把草(Cyperuspapyrus),标本采集(YMU-ZF20180917)储存于中华民族药資源有机化学国家民委-国家教育部重点实验室。

1.2仪器设备与实验试剂

制取、半制取HPLC及LC/MS流动性相常用有机溶液为色谱仪级工业甲醇和乙腈(霍尼韦尔,英国),水为矿泉水(娃哈哈集团,我国);其他化学药品均为分析纯;SephadexLH-20(GEHealthcare,英国);柱色谱仪用MCIGELCHP20/P120填充料(三菱化学,日本);薄层色谱环氧树脂板GF254;柱色谱仪用硅橡胶(60~100、100~200、200~300、300~400目);铬黑T:10%磷钼酸-乙醇溶液和小茴香醛、10%盐酸-乙醇溶液(105℃加温着色)、5%盐酸-乙醇溶液、碘;DMEM培养液、胎牛血清、谷氨酰胺(BiologicalIndustries,非洲);Lipofectamine2000(ThermoFisher,英国);阿昔洛韦(Aladdin,我国);双荧光素酶报告基因诊断试剂盒(Promega,英国)。

EYELAN-1100全自动旋转蒸发器(上海市爱朗,我国);EYELAOSB-2100恒温水浴锅(上海市爱朗,我国);NP7000泵-NU3000制取高效液相(江苏省汉邦,我国);6420TripleQuadLC/MS(Agilent,英国);1260Infinity半制取高效率液相色谱仪(Agilent,英国);DRX-400和DRX-600型数字乳腺机(Bruker,法国);BS124S型电子器件电子分析天平(Sartorius,法国);SpectraMaxi3x型酶标仪(MolecularDevices,英国);5424R型离心脱水机(Eppendorf,法国);二氧化碳恒温箱(ThermoFisher,英国);5977MSD旋光仪(Agilent,英国)。

1.3实验方法与流程

1.3.1获取与分离出来

纸莎草(12kg)干躁试品破碎后,用95%工业甲醇浸法获取6次,每一次48h,合拼萃取液,萃取液经过虑、缓解压力浓缩后得中药浸膏1kg。将提取液中药浸膏混悬在适当温开水中,先后用乙醚、乙酸丁酯和正丁醇各提纯3次,合拼提取液获得乙醚一部分中药浸膏75g,乙酸丁酯一部分中药浸膏100g和正丁醇一部分中药浸膏12g。

乙醚一部分中药浸膏(75g)首先用MCI除黑色素及分离出来,过柱梯度方向为50%、70%、90%、100%工业甲醇/水,经TLC检验合拼同样成分,共获得10个成分,各自记作FrA.1~FrA.10。70%工业甲醇/水过柱一部分(FrA.4)用60~100目硅橡胶拌样开展正相硅橡胶柱色谱仪分离出来,过柱梯度方向系统软件为乙醚∶二氯甲烷(1∶0~0∶1),经TLC检验合拼同样成分,共获得五个成分,各自记作A4.1~A4.5。

A4.2依次用硅橡胶及SephadexLH-20柱层析分离出来,获得化学物质1(10.5mg)和7(7mg)。A4.3依次用硅橡胶及SephadexLH-20柱层析分离纯化,获得化学物质2(20mg)和9(10mg)。70%工业甲醇/水过柱一部分(FrA.5)用60~100目硅橡胶拌样开展柱色谱仪分离出来,过柱系统软件为乙醚∶二氯甲烷=1∶0→0∶1,经TLC检验合拼同样成分,共获得4个成分,各自记作A5.1~A5.4。A5.3依次用硅橡胶与SephadexLH-20柱层析(过柱剂:工业甲醇)分离纯化,获得化学物质3(8mg)和4(9mg)。90%工业甲醇/水过柱一部分(FrA.8)用制取高效率液相色谱仪开展色谱仪分离出来,共获得五个成分,各自记作A8.1~A8.5。

A8.3依次用硅橡胶与SephadexLH-20柱层析分离纯化,获得化学物质5(22.5mg)、6(10mg)和8(8mg)。乙酸丁酯一部分中药浸膏(100g)首先用MCI除黑色素及分离出来,过柱梯度方向系统软件为50%、70%、90%、100%工业甲醇/水,经TLC检验合拼同样成分,共获得八个成分,各自记作FrB.1~FrB.8。70%工业甲醇/水一部分(FrB.4)用60~100目硅橡胶拌样开展柱色谱仪分离出来,过柱梯度方向系统软件为乙醚∶乙酸丁酯(1∶0→0∶1),经TLC检验合拼同样成分,共获得五个成分,各自记作B4.1~B4.5。B4.2依次用硅橡胶与SephadexLH-20柱层析分离纯化,获得化学物质11(14mg)和19(23mg)。B4.3依次用硅橡胶柱层析和半制取高效率液相色谱仪开展色谱仪分离纯化,各自获得化学物质10(18mg,tR=35min)和14(14mg,tR=40min)。

B4.4依次用硅橡胶与SephadexLH-20柱层析(过柱剂:工业甲醇)分离纯化,获得化学物质15(15mg)。90%工业甲醇/水一部分(FrB.7)用60~100目硅橡胶拌样开展柱色谱仪分离出来,过柱梯度方向系统软件为乙醚∶乙酸丁酯(1∶0→0∶1),经TLC检验合拼同样成分,共获得6个成分,各自记作B7.1~B7.6。B7.3依次用硅橡胶与SephadexLH-20柱层析分离纯化,获得化学物质12(12mg)。B7.4依次用硅橡胶柱层析、SephadexLH-20柱层析和半制取高效率液相色谱仪开展色谱仪分离纯化,各自获得化学物质13(10mg,tR=30min)和16(8mg,tR=36min)。B7.5依次用硅橡胶柱层析与SephadexLH-20(过柱剂:工业甲醇)分离纯化,获得化学物质17(20mg)和18(10mg)。

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