2、线形与精度调查

（1）标曲水溶液制取

GC：高精密量取标准品贮备液0.5、1.0、2.0、4.0、5.0mL各自放置10mL量瓶中，用工业乙醇滴定剂，得标曲水溶液，按离子交换柱：AgilentZORBAXEclipseXDB-C18(4.6x250mm，5μm)，流动性相为工业甲醇(A)-20mmo/L乙酸铵水溶液(B)，梯度方向过柱(0～8min，10%A；8.1～20min，30%A；20.1～30min，10%A)，流动速度为1.0mL/min，气相量为10uL，柱温为35℃，检验光波长为210nm。HPLC：高精密量取标准品贮备液0.04、0.4、1.0、1.5、2.0mL各自放置10mL量瓶中，用50%甲醇溶液滴定剂，得标曲水溶液。

GC-MS：高精密量取标准品贮备液1mL置10mL量瓶中，加工业乙醇做成浓度值为100μg/mL的标准品应用液，再高精密量取0、0.4、0.2、0.5、1.0、2.0mL各自放置10mL量瓶中，用工业乙醇滴定剂，得标曲水溶液，按色谱仪标准:离子交换柱为J&WDB-624UI(60mx0.25mmx1.4μm)，提温程序流程为原始溫度60℃，维持1min，以50℃/min提温至150℃，维持2min，再用10℃/min提温至250℃，维持26min；载气为氮气，原始总流量1mL/min，维持20min，以2mL/min升到2mL/min，维持20min，气相口溫度250℃，分离比10:1，进样量1μL。

（2）测量結果

各自以峰总面积为纵轴，浓度值为横坐标轴，得线形线性回归方程和相关系数r，测量結果如表1所显示。结果显示，三种办法的相关系数r均做到＞0.999，且精度RSD均＜2%，说明线形和精度优良。

3、方法检出限和定量限

高精密量取各标准品水溶液，以频率稳定度S/N=3和S/N=10为根据各自做成方法检出限水溶液和定量限水溶液，GC、HPLC、GC-MS三种办法的方法检出限各自5mgkg、10mg/kg和2mg/kg；定量限各自为17mg/kg、33mg/kg和6.7mg/kg。由此可见，GC-MS的方法检出限最少，敏感度相对性较高，HPLC的方法检出限相对性较高，敏感度相对性较低。

4、利用率调查

取己知成分的某原浆、油类0.5g各9份，依据曲线图范畴，按低、中、浓度较高的各自高精密添加分别的标准品贮备液(GC添加1、3、5mL，HPLC添加1、2、3mL，GC-MS添加0.1、0.3、0.5mL)，每一个浓度值3份，按分别的水溶液制取方式制取利用率水溶液，三种办法的利用率测量結果如表2所显示。结果显示，三种办法的利用率均在90%～100%中间，方式的精确性优良。

5、可靠性调查

取三种方式配制的标曲圆心浓度值水溶液和利用率调查的试品水溶液，在常温情况下，各自于0、0.5、1、2、4、8、16、24h时在不同的色谱仪标准下测量，测算各时间点苯甲醇峰总面积的RSD%。GC为1.1%、1.3%，HPLC为0.8%、0.9%，GC-MS为1.4%、1.3%，均低于2%，说明三种方式在常温下有着优良的可靠性，能达到平时检测的要求。

6、试品前解决办法的调查

根据GB5009.28-201方式，取含蛋白的试品1.0g，添加适量的苯甲醇国家标准物质，再添加92g/L亚铁氰化钾和183g/L乙酸锌水溶液各0.5mL后，高精密称量苯甲醇标准品25mg放置10mL量瓶中，加50%甲醇溶液稀释液并滴定剂，得标准品贮备液。取试品搅拌，高精密称量1.0g放置25mL量瓶中，加适当50%甲醇溶液超声波获取10min，制冷至常温后滴定剂，0.22μm滤纸滤过，得试品水溶液高效液相色谱色谱法项下制取试品水溶液并测量成分，并与未添加蛋白混凝剂的加标试品水溶液测量結果开展较为。结果显示，蛋白混凝剂对苯甲醇的测量无危害。

根据GB5009.139-2014方式，取含苯甲醇的试品1.0g，放置25mL量瓶中，加适当50%甲醇溶液超声波获取10min后滴定剂至标尺，再添加0.5g轻质氧化镁搅拌，0.22μm滤纸滤过后按离子交换柱：AgilentZORBAXEclipseXDB-C18(4.6x250mm，5μm)，流动性相为工业甲醇(A)-20mmo/L乙酸铵水溶液(B)，梯度方向过柱(0～8min，10%A；8.1～20min，30%A；20.1～30min，10%A)，流动速度为1.0mL/min，气相量为10uL，柱温为35℃，检验光波长为210nm色谱仪标准测量成分，并与未添加氧化镁的试品测量結果开展较为。结果显示，轻质氧化镁对苯甲醇的测量无危害。

根据GB5009.140-2003方式，取含苯甲醇的试品1.0mL，放置中性化三氧化二铝(100～200目)柱中，用50%甲醇溶液过柱至25mL容量瓶中，0.22μm滤纸滤过后测量成分，并与未过中性化三氧化二铝柱的试品测量結果开展较为。结果显示，中性化三氧化二铝柱对苯甲醇的测量无危害。

7、试品的测量

搜集市面上的40批液态型保健品，高精密称量苯甲醇标准品50mg放置50mL量瓶中，加工业乙醇稀释液并滴定剂，得标准品贮备液。取试品搅拌，高精密称量1.0g，放置10mL量瓶中，加工业乙醇融解并超声波获取10min，制冷至常温后滴定剂，0.22μm滤纸滤过，得试品水溶液。高精密称量苯甲醇标准品25mg放置10mL量瓶中，加50%甲醇溶液稀释液并滴定剂，得标准品贮备液。取试品搅拌，高精密称量1.0g放置25mL量瓶中，加适当50%甲醇溶液超声波获取10min，制冷至常温后滴定剂，0.22μm滤纸滤过，得试品水溶液。标准品贮备液同气相色谱分析项下贮备液。取试品搅拌，高精密称量1.0g，放置10mL量瓶中，加工业乙醇融解并超声波获取10min后滴定剂，0.22μm滤纸滤过，高精密量取续渗沥液0.1mL放置10mL量瓶中，加工业乙醇滴定剂，得试品水溶液。

在离子交换柱:J&WDB-WAX(60mx0.25mmx0.25μm)，提温程序流程为原始溫度150℃，10℃/min升至180℃，维持3min，20℃/min升至230℃，维持5min；载气为N2，恒流电源速率1.0mL/min，分离比10:1，探测器溫度250℃，气相口溫度240℃，进样量1μL。离子交换柱:AgilentZORBAXEclipseXDB-C18(4.6x250mm，5μm)，流动性相为工业甲醇(A)-20mmo/L乙酸铵水溶液(B)，梯度方向过柱(0～8min，10%A；8.1～20min，30%A；20.1～30min，10%A)，流动速度为1.0mL/min，气相量为10uL，柱温为35C，检验光波长为210nm。色谱仪标准:离子交换柱为J&WDB–624UI(60mx0.25mmx1.4μm)，提温程序流程为原始溫度60℃，维持1min，以50℃/min提温至150℃，维持2min，再用10℃/min提温至250℃，维持26min；载气为氮气，原始总流量1mL/min，维持20min，以2mL/min升到2mL/min，维持20min，气相口溫度250℃，分离比10:1，进样量1μL标准下测量，依据苯甲醇标曲范畴调节试品的稀释液容积，结果显示，有7批试品验出含苯甲醇，三种办法的检测結果一致(见表3)，相对性相对标准偏差均低于5%。

7、三种方式较为

GC是测量挥发物或半挥发物成份的优选方式，其敏感度好，进样量小，检验高效率较高，检验低成本，可是仅选用保存期判定，当试品中有残渣影响时，必须调节提温程序代码最好分离出来实际效果。

HPLC是试验室最广泛应用的检验方式，在测量苯甲醇成分时，能够依据光谱图开展判定判断，但因为苯甲醇的最高消化吸收光波长在210nm周边，属尾端消化吸收，沒有显著的消化吸收特点，当有残渣影响时，很有可能会危害判断的精确性。但从文中的检测結果看，本方式与测量光波长相仿的10-甲基癸烯酸等作用性指标值的分离度很高，受残渣影响较少。

GC-MS对比前两类方式 ，其敏感度最大，依据质谱图判定判断，并可精确定量分析，但仪器设备应用和维护保养费用较高，强烈推荐做为GC和HPLC的輔助判断方式。

三、结果

文中创建的三种苯甲醇测定法实际操作简易，精确性高，可靠性好，试验室可依据标准选用合适的检测方式。三种方式对比，强烈推荐应用HPLC法完成测量，GC-MS法輔助判断，也可立即选用GC-MS法，提升检测高效率。

《保健食品备案产品可用辅料及其使用规定(2019年版)》中要求的苯甲醛以及醋酸盐在液态中药制剂中的最高用量为1g/kg；在GB/T2731-2017《日用香精》1161中要求，苄醇(即苯甲醇)在第一类加香商品(唇用商品、小玩具)中，最大限定为0.2%(即2g/kg)；依据JECFA明确提出的苄基化学物质的总应用限制值规定0～5mgkg休重(以苯甲醛剂量计)，以成人休重60kg测算，苯甲醛类ADI为0～300mg/d这好多个规范均可做为制订食品类或保健品中苯甲醇限定的参照根据。