500饱和度水溶液在340nm~360nm光波长范畴内的吸光度值转变,获得较大光波长为352nm。配备100、200、300、400和500饱和度的水溶液,在352nm处测OD值数值0.175、0.382、0.543、0.694、0.872,得重归线性方程为:Y=0.001x 0.021,R2=0.997。
各自用15%酒精和纯净水融解成分为90%的迷迭香酸试品配置成0.2mg/mL样液,添加等大小的正丁醇开展提纯,各反复3份,测量左右看中迷迭香酸的成分,結果以下表所显示:
由实验数据信息得知:正丁醇提纯15%酒精融解的试品,在其中70%上下的迷迭香酸依然在酒精溶液中;正丁醇提纯水相融解的试品,近70%的迷迭香酸分派在有机相。故采用水融解迷迭香酸试品。
各自以不一样pH的水相融解成分为90%的迷迭香酸试品,用等容积正丁醇提纯,分相后,高效液相色谱色谱法检验左右相,結果如下所示:
由实验数据信息得知:迷迭香酸在左右相的分派比在pH0.1~3时,98%之上的迷迭香酸分派在有机相。挑选pH2~3的水相不但可高效率获取迷迭香酸,与此同时还可除去酸碱性情况下不溶解上相的残渣。
所有用酸水融解,料液比1∶8,离心式除去不溶物,各自用医用乙醚、乙酸甲酯、乙酸丁酯、甲基叔丁基醚、三氯甲烷、正丁醇、乙醚、正己烷提纯依照1∶1的容积比开展提纯,共提纯2次,检验2次提纯后上相和最终的下相迷迭香酸的成分。其结果显示以下表3所显示。
试验数据显示:用正丁醇提纯时,上相的迷迭香酸总数最大,次之是乙酸甲酯、乙酸丁酯和医用乙醚。提纯2次就可以。
采用成分为5%的迷迭香酸粗品,用pH2~3的酸水融解配置为1mg/mL样液,各自用等大小的正丁醇、乙酸甲酯、乙酸丁酯和乙酸甲酯提纯后,测量所得的商品的饱和度及迷迭香酸的成分,結果如下所示:
由表4結果得知:不一样萃取剂提纯粗品成分从5.33%提升到12.21%~21.31%,用乙酸甲酯提纯实际效果最好是。
选择1斤成分5.33%粗品加pH=3的酸水7500mL(15倍)融解,离心式去沉积,卷式活性炭过滤,多效蒸发仪浓缩水相为2500mL。用正丁醇5000mL提纯2次,旋转蒸发仪浓缩得迷迭香酸商品(饱和度为4127,成分约20%)。以该商品为原材料,设计方案L9(34)的三要素三水准正交试验调查萃取剂类型、提纯水相的pH和萃取剂使用量(为水相的倍率)对褪色率及成分的危害,提纯频次为1次。結果如下所示:
对以上結果开展方差分析,結果见下表:
经方差分析知,A要素对褪色率的危害为明显水准。B要素对成分危害为明显水准。综合性指标值A要素和B要素做到明显水准,应调节在最佳水准,C要素不明显,能够在随意水准。挑选的最好水准组成为A1B2C1,即:乙酸甲酯提纯,水相pH为3,1.5倍容积提纯1次,迷迭香酸成分从20%提升 到50%。
文中将含水量为5%上下的迷迭香酸粗品用正丁醇提纯2次,用pH为3的酸水融解经乙酸甲酯提纯后,所得的商品中迷迭香酸成分做到50%之上,达到《GB1886.172—2016食品安全国家标准食品添加剂迷迭香提取物》规定,简单化了加工工艺操作流程,常用机器设备简易,且解决了迷迭香酸粗品色调深而干扰其在食物中的加上难题,能为公司工业生产一定纯净度的迷迭香酸商品给予参照。