马郁兰如今全球世界各国普遍种植。马郁兰中富含各种化合物，主要成分为黄酮类化合物、多糖类、萜类、有机物类和其它类，萜类是成分较多的一类，现阶段早已分离出来评定的有机化合物有迷迭香酸、鼠尾草酚、鼠尾草酸、齐墩果酸和熊果酸。迷迭香酸可溶于工业甲醇、酒精溶液、水，而难溶解乙醚、乙醚等有机溶液；耐热工作能力强，可承受长期性240℃高溫煎炸而维持高抗氧化能力，可替代热不稳定的超氧化物歧化酶SOD做为氧自由基去除剂。迷迭香酸在不一样绿色植物中的成分各不相同，其使用使用价值也不尽相同。迷迭香酸获取提纯方式关键存水说法、有机溶液获取法、超声波輔助获取法、微波加热輔助获取法、膜分离设备、大孔树脂吸咐法、结晶法等。水说法既获取出水溶相关成分，与此同时也明确提出一些水溶残渣，似水说法分离出来的迷迭香酸粗品中包含较多的焦糖色素、蛋白质和核甘酸残渣，为事后提纯提升了艰难。超音波和微波加热輔助获取法具备获取高效率、获取时间较短的优势，但均为輔助获取方式，且需超声波或微波设备。有机溶液获取法还可以有效的降低一些水溶残渣的总混，有利于后期的剥离和提纯。现阶段选用酒精获取获得的迷迭香酸粗品成分基本上在3～6%。

文中以5%成分的迷迭香酸粗品为原材料，甄选萃取剂类型、提纯時间、频次、時间等要素，使设备中迷迭香酸成分超过≥35%（GB1886.172—2016《食品添加剂迷迭香提取物》规定超过5%），而且完成褪色，为执行迷迭香酸的工业生产及运用给予参照。

1 原材料与方式

1.1 原材料与实验试剂

试验常用乙酸丁酯、乙酸甲酯、医用乙醚、乙醚、正丁醇、三氯甲烷、正己烷、重络酸、硫酸钴、硫酸等分析纯实验试剂均购置国药控股化学药品有限责任公司。马郁兰干叶由河南省逸佳农业生态有限责任公司给予。迷迭香酸标准物质（成分：98%），购自西安市利时生物技术有限责任公司。

1.2 仪器设备与机器设备

1260高效率液相色谱：安捷伦科技有限责任公司；752N紫外线由此可见光度计：上海精密仪器设备有限责任公司；GL-20G-C快速冷冻离心机：上海安亭科学研究仪器厂；BSA224S-CW电子分析天平：赛多利斯仪器设备（北京市）有限责任公司；RE-52A旋转蒸发仪：上海亚荣生物化学仪器厂；RNF-0460卷式膜多用途检样机器设备：厦门市世达膜高新科技有限责任公司；YC-1800喷雾干燥设备：上海市雅程实验仪器有限责任公司；20升多用途获取系统软件：河南省宁烁实验仪器有限责任公司。

1.3 迷迭香酸粗品制取

取马郁兰干叶按1∶10加含75%酒精溶液（pH=2），添加到20L提纯罐里，85℃流回获取1.0h，释放提取液，再添加8倍75%酒精溶液（pH=2），流回获取1.0h离心式后，合拼萃取液，过四层沙布，多效蒸发仪浓缩水蒸气蒸馏出乙醇，卷式活性炭过滤，喷雾干燥机得成分约为5%粗品。

1.4 迷迭香酸成分及饱和度测量

1.4.1 标准物质及试品配置

用工业甲醇融解标准物质配备成0.2mg/mL迷迭香酸标液。

将被测迷迭香酸粗品配置为2mg/mL的溶液（pH=2），测量饱和度和迷迭香酸成分。

1.4.2 高效液相色谱色谱分析测量迷迭香酸成分

色谱仪标准：二极管列阵探测器（DAD），流动性相为工业甲醇∶水=60∶40，流动速度为1mL/min，气相量为10μL。

1.4.3 饱和度标曲的制作及褪色率的测算

（1）饱和度标曲的制作

规范色度单位：1L水里融解有1mg铂和0.5mg钴，称该水溶液所具备的饱和度为1度。500饱和度规范应用液配置：称量0.0437g重络酸和1.0g硫酸钴，放水融解后再次添加0.5mL盐酸，配出500mL的水溶液。以纯净水为对比液，在340nm～360nm的光波长范畴内测量500饱和度规范应用液的OD值，挑选出较大消化吸收光波长。各自用移液器移取1mL、2mL、3mL、4mL500饱和度规范应用液到四个5mL容量瓶中，加蒸溜水滴定剂（稀释液后，饱和度各自是100、200、300、400）。在较大光波长处测吸光度值。以水溶液饱和度为横坐标轴，以吸光度数值纵轴，制作饱和度标曲。

（2）测算褪色率：

将萃取液稀释液一定的倍率，在较大光波长处测吸光度值，将吸光度值带入饱和度线形线性回归方程，求取商品饱和度。褪色率按住式测算：
 

1.5 提纯有机溶剂的挑选

称量9份10g原材料，用60mL酸水融解，离心式除去不溶物。各自用1.0倍大小的医用乙醚、乙酸丁酯、乙酸甲酯、甲基叔丁基醚、医用乙醚、乙醚、正丁醇、三氯甲烷、正己烷开展提纯，共提纯2次，选用高效率液相色谱检验左右看中迷迭香酸的成分，明确最好的两相分派加工工艺。

1.6 气相色谱分析加工工艺提升实验方案设计

1.6.1 正丁醇提纯水相和含醇水相迷迭香酸的分配原则

各自用15%酒精和纯净水融解成分为90%的迷迭香酸试品配置成0.2mg/mL样液，添加等大小的正丁醇开展提纯，各反复3份，测量左右看中迷迭香酸的成分。

1.6.2 正丁醇提纯不一样pH水相迷迭香酸的分配原则

各自以不一样pH的水相融解成分为90%的迷迭香酸试品，用等容积正丁醇提纯，分相后，高效液相色谱色谱法检验左右看中迷迭香酸的成分及分配原则。

1.6.3 萃取剂的挑选

按料液比1∶8添加酸水融解马郁兰粗提物，离心式除去不溶物，各自用医用乙醚、乙酸甲酯、乙酸丁酯、甲基叔丁基醚、三氯甲烷、正丁醇、乙醚、正己烷提纯依照1∶1的容积比开展提纯，共提纯2次，检验2次提纯后上相和最终的下相迷迭香酸的成分。

1.6.4 四种萃取剂的对比实验

采用成分为5%的迷迭香酸粗品，用pH2～3的酸水融解配置为1mg/mL样液，各自用等大小的正丁醇、乙酸甲酯、乙酸丁酯和乙酸甲酯提纯后，测量所得的商品的饱和度及迷迭香酸的成分，明确最好的萃取剂。

1.6.5 正交实验设计方案

设计方案L₉（3⁴）的三要素三水准正交试验调查萃取剂类型、提纯水相的pH和萃取剂使用量（为水相的倍率）对褪色率及成分的危害。

1.7 数据处理方法

选用SPSS16手机软件开展数据统计分析。