伴随着家禽养殖行业呈规模化、产业化、商业化的、密度高的发展趋势，禽畜病虫害展现高频率化、复杂发展趋势，为减少病发与身亡产生的财产损失，饲料被普遍用来防止和医治禽畜病症，或者以亚医治使用量加上于精饲料中以推动小动物生长发育、改进小动物产品质量和提升精饲料使用率。但一部分禽畜养殖厂工作人员缺少对药品伤害的认识及科学研究服药的具体指导，或受资金权益迫使，不安全用药，乃至不法乱用各种饲料，且不严格执行休药期，造成 禽畜商品中饲料残余超标准状况经常发生。不管饲料残余水准多少，根据长时间的食物网蓄集到一定量之后对身体造成副作用，如过敏症状，泌尿生殖系统、泌尿系统、心肌损害等，一些药品还具备不确定性的致畸性、致癌物质，或致心搏骤停乃至身亡。除此之外，病菌在长时间接触到这种较低浓度的药品后，非常容易提升病毒感染的抗药性及基因变异的概率，进而变弱人们疾病的治疗实际效果，使公共卫生服务遭遇严重的考验和威协。饲料残余还会继续使禽畜出口产品遇阻，危害禽畜业的身体健康连续快速发展和國家的社会经济的发展。因而，进行饲料残余的检验科学研究，标准服药，以具体指导生产制造，确保食品卫生安全，提升人民健康水准，提高禽畜设备的竞争能力。

现阶段，饲料残余的检查办法有酶联免疫法、微生物法、电解法、气相色谱分析、高效液相色谱色谱法及高效率液相色谱仪-串联质谱法(HPLC-MS/MS)等。在其中，微生物法和酶联免疫法的检验結果很容易发生阳性；高效液相色谱色谱法和气相色谱分析的敏感度低、可选择性差，且多聚集于单一类型饲料的剖析，进行一个试品中有类药测量需采取不一样的方式 ，前处理方式用时、繁杂，检验低效能高价位；超高效率液相色谱仪-串联质谱法具备高通量测序、高可选择性、高分离度、高灵敏、高检验效果等优点，是饲料多残余检验的优选方式 。生鸡蛋、鸡脯肉试品栽培基质繁杂且饲料大多数为少量乃至痕量元素残余，而我国需求的残余限定较低，给检查工作中产生极大挑戰。尽管饲料多残余检验已经有较多参考文献报导，但末见与此同时测量生鸡蛋和鸡脯肉中磺胺类、氟喹诺酮、氯霉素类、金刚烷胺类饲料残余的报导。

本科学研究拟创建超高效率液相色谱仪-串联质谱法一起测量生鸡蛋和鸡脯肉中磺胺类、氟喹诺酮、氯霉素类和金刚烷胺类饲料残余，期待为禽类产品中饲料残余的检查给予合理方式。

1试验一部分

1.1仪器设备与设备

1290超高效率液相色谱、ZORBAXC18色谱柱(50mm×2.1mm×1.8μm)：英国Agilent企业商品；QTRAP5500三重四极杆/线形正离子阱质谱仪器：英国ABSciex企业商品；涡旋振荡器：英国ThermoScientific公司商品；JD200-2电子分析天平：沈阳市企密安电子器件有限责任公司商品；TGL-15B型快速台式离心机：上海安亭科学研究仪器厂商品；旋转蒸发器：法国海道尔夫企业商品。

1.2试品与实验试剂

磺胺二甲异噁唑、磺胺嘧啶、磺胺羟基异噁唑、磺胺噻唑、磺胺羟基嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺喹噁林、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺甲噻二唑、恩诺沙星、环丙沙星、环丙沙星、达氟沙星、氟罗沙星、培氟沙星、洛美沙星、氧氟沙星、金刚烷胺、金刚乙胺、金刚烷胺-D15(10mg/L)，恩诺沙星-D5、环丙沙星-D5、环丙沙星-D8、磺胺邻二甲氧嘧啶-D3、磺胺间二甲氧嘧啶-D6、氯霉素-D5水溶液国家标准物质(5mg/L)，氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素水溶液国家标准物质(100mg/L)：均购于农业农村部农业产品产品质量标准研究所；工业甲醇、乙腈：色谱纯，法国Merck企业商品；苯甲酸：色谱纯，英国Sigma企业商品；无水硫酸钠、乙酸铵、氧化钠、正己烷、环己烷、硫酸(优级纯)、氢氧化钠(分析纯，成分25%～28%)、磷酸氢二钾(分析纯)：上海市国药控股商品；PSA、C18填充料(50μm)：我国迪马科技有限公司商品；二甲亚砜：分析纯，天津市风船化学药品高新科技有限责任公司商品；试验自来水：自做超纯水系统。

1.3水溶液配置

用工业甲醇稀释液各饲料水溶液国家标准物质：金刚烷胺、金刚乙胺、氯霉素配置成0.1mg/L，氟喹诺酮、磺胺类、甲砜霉素、氟甲砜霉素配置成1.0mg/L，7种内标均配置为0.5mg/L储备液，于4℃下遮光储存。系列产品标液用工业甲醇配置，在用现配。

0.2mol/L硫酸溶液的配制：取1.5mL硫酸(36%～38%)，用超纯水系统滴定剂至100mL。

1.4试品前解决

1.4.1试品获取

称量5.00g(精准至0.01g)匀质试件于50mL塑胶离心管架中，添加30μL0.5mg/L内标水溶液、5.0mL盐酸溶液，涡流至试品分散化后，加15.0mL乙腈和7～9g氧化钠至溶剂呈过饱和，涡流获取5～7min，以5000r/min离心式5min，取下乙腈层至50mL离心管架中，向沉渣里加15.0mL乙腈反复获取1次，合拼2次萃取液，待净化处理。

1.4.2试品净化处理

向以上待净化处理萃取液中添加8～10mL正己烷-环己烷混和水溶液(1∶1，V/V)，涡流1min，以5000r/min离心式5min，取乙腈层浓缩至干，添加2.0mL0.2%苯甲酸-乙酸丁酯水溶液融解残余物，过0.22μm滤纸后再将渗沥液蒸干，添加1.0mL0.2%苯甲酸-甲醇溶液复溶，待净化处理。

将30mgC18和60mgPSA吸咐原材料搅拌，添加下方垫有过滤纸的2.0mL塑胶医疗注射针中，再添加2.0mL0.2%苯甲酸-甲醇溶液渗滤，去除渗滤液，将以上1.0mL待净化处理水溶液迁移至净化处理柱，使其在作用力的作用下排出，接受净化处理液，过0.22μm滤纸，待UHPLC-MS/MS测量。

1.5试验标准

1.5.1色谱仪标准

流动性相：A为0.1%苯甲酸-溶液(含0.1mmol/L乙酸铵)，B为0.2%苯甲酸-甲醇溶液；流动速度0.2mL/min；柱温35℃；进样量2.0μL；梯度方向过柱程序流程：0.00～3.00min(10%～40%B)，3.00～6.00min(40%～95%B)，6.00～8.00min(95%B)，8.00～8.20min(95%～10%B)，8.20～10.00min(10%B)。

1.5.2质谱分析标准

ESI离子源；离子源溫度550℃；喷雾器气(GS1)工作压力0.379MPa；輔助加温气(GS2)工作压力0.379MPa；气帘气工作压力0.241MPa；正、空气负离子方式与此同时扫描仪，在其中氯霉素类药为空气负离子方式扫描仪，喷雾器工作电压-4500V，多反映检测方式(MRM)；磺胺类、氟喹诺酮、金刚烷胺类为共价键方式扫描仪，喷雾器工作电压5500V，多反映检测方式，别的质谱分析主要参数列于表1。