目地选用HPLC测定方法不一样原产地和不一样生长发育年代北苍术[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]中赤芍素的成分。方式搜集不一样來源的北苍术试品,以工业甲醇为有机溶剂,选用超声波获取法获取,选用HPLC测定方法赤芍素的成分,采用DiamonsilC18(250mm×4.6mm,5μL)离子交换柱,流动性相为工业甲醇-水(79∶21),检验光波长为340nm,流动速度1mL/min,柱温25℃,进样量20μL。結果赤芍素的线形范畴为0.1875~0.6000mg/mL,方式精度、可重复性、可靠性优良;加样利用率为95.4%。不一样原产地北苍术中赤芍素的成分为0.3232%~0.5959%,阿荣旗产北苍术中药饮片中赤芍素成分最大。3年生、4年生、5年生苍术中赤芍素的成分各自为:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%。结果本方式简单、迅速、精确,适用北苍术中赤芍素的含水量测量。
2015年版《中国药典》要求,赤芍的主要来源有2种,分别是茅苍术(Atractylodeslancea(Thunb.)DC)和北苍术(Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.)。茅苍术关键产自江苏省、湖北省、河南省等省;北苍术关键产于内蒙古、山西省、黑龙江省、吉林省等省。研究表明赤芍的关键成分为高压聚乙烯炔和倍半萜类物质,具备防癌、抗菌、抗病毒治疗等药用价值,临床医学上常见于病毒性感染疾病的治疗。北苍术的原绿色植物遍布范围普遍,全国各地环境要素各有不同,危害赤芍中草药的品质。本科学研究创建了HPLC法,测量不一样来源于北苍术中赤芍素的成分,现报导如下所示。
1仪器设备与试药
1.1仪器设备
Waters2695型液相色谱(沃特世高新科技有限责任公司),MDF-492型超低温冰箱(日本三洋公司),DFT200C型快速多用途破碎机(永康市敏业物资贸易有限责任公司),CPX3800H-C型超声波清洗机(日本BRAN-SONIC企业),DHG-9240A型控温鼓风干燥箱(常州市国旺仪器设备生产制造有限责任公司),PALL水提纯系统软件(英国PallCorporation企业),ML203T/02型十万级电子分析天平(法国梅特勒-托利多仪器设备有限责任公司),MDF-492型超低温冰箱(日本三洋公司)。
1.2实验试剂
工业甲醇(色谱纯,德国默克企业,生产批号:603-001-00-x),95%酒精(天津市福晨化学药品厂,生产批号:20171110),乙醚(沸程60~90℃,天津市福晨化学药品厂,生产批号:20171201),赤芍素标准物质(我国食品药品安全检验研究所,生产批号:111924-201806)。
1.3中药材
市面上中药饮片的原产地各自来源于内蒙古阿荣旗、赤峰市、莫力达瓦达斡尔族自治旗(通称“莫旗”)、扎兰屯;3年生、4年生、5年生种植北苍术地下茎均采自于蒙古族自治州莫力达瓦旗多热博热其勒村(通称“多热”),先后标识为1~7号。经齐齐哈尔市医科院药学院王晓丽副教授职称评定为北苍术[Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.]的地下茎。
2方式与結果
2.1水溶液制取方式
2.1.1标准品水溶液
称量赤芍素标准物质适当,工业甲醇融解,超声波10min,制取20μg/mL的水溶液,经0.45μm的微孔滤膜滤过,预留。
2.1.2供试品水溶液
取“1.3”项下不一样來源的北苍术中药饮片,破碎后过三号筛,各自称量0.2g,放置具塞锥形瓶中,添加工业甲醇50mL,用封口膜密封性后,称取净重,超声波获取(输出功率250W,頻率40KHz)1h,制冷至常温后,称取净重,用工业甲醇补充缺少的净重,用0.45μm过虑活性炭过滤,取续渗沥液,预留。
2.2色谱仪标准
DiamonsilC18离子交换柱(4.6mm×250mm,5μL),流动性相工业甲醇-水(79∶21)等度过柱,流动速度1.0mL/min,检验光波长340nm,进样量20μL。
2.3方法学调查
2.3.1线性相关调查
高精密称量标准品60mg,工业甲醇滴定剂至10mL,搅拌,移取1mL至10mL容量瓶中,用工业甲醇滴定剂至标尺,标识为1号。从2号中汲取5mL水溶液,用工业甲醇滴定剂至标尺,标识为2号。依此类推,得3、4、5、六号水溶液。按“2.1”项色谱仪标准下开展测量。以峰总面积为纵轴(Y),标准品浓度值为横坐标轴(X)开展回归分析,得线性回归方程为Y=2715.1X-9.6694(r=0.9998),标准品浓度值在0.01875~0.6000mg/mL范畴内线性相关优良。
2.3.2精度实验
汲取“2.1.2”项下供试品水溶液20μL,按“2.2”项色谱仪标准,持续气相6次,测量峰总面积,经测算RSD为0.49%,说明仪器设备精度优良。
2.3.3可重复性实验
汲取“2.1.1”项下对比水溶液20μL,按“2.2”项下色谱仪标准,持续气相6次,测量赤芍素峰总面积,经测算RSD为1.79%,说明方式可重复性优良。
2.3.4可靠性实验
汲取“2.1.1”项下供试品水溶液20μL,按“2.2”项下色谱仪标准,各自在0、2、4、6、8、10h时气相,测量赤芍素峰总面积RSD为1.74%,说明供试品水溶液在10h内可靠性优良。
2.3.5加样利用率实验
称量11号粉末状0.1000g,共6份,各自添加“2.1.1”项下对比水溶液5mL,放置50mL锥形瓶中,用工业甲醇滴定剂至标尺,超声波获取1h后过0.45μm微孔滤膜,取续渗沥液,按“2.2”项下色谱仪标准测量,测算利用率为95.4%,见表1。
各自称量1~花了7天时间赤芍试品0.2g,每一份中药材制取3份平行面样,按“2.1.2”项下方式制取供试品水溶液,按“22..22”项色谱仪标准测量,結果不一样产区的赤芍中赤芍素的成分为0.3200%~0.5599%,阿荣旗中药饮片中赤芍素成分最大。三年生、四年生、5年生苍术中赤芍素的成分各自为:(0.3500±0.0048)%、(0.4550±0.0030)%、(0.3350±0.0118)%,见表2。
3探讨
成分测量数据显示,四年生人力种植北苍术的赤芍素比三年生和5年生的成分高,以指标值成份的成分为根据,本试验结果显示北苍术的最好种植時间为四年,与市面上中药饮片对比,内蒙古自治区莫旗的人力仿天然的栽种赤芍中赤芍素的成分符合规定。赤芍中挥发物化学成分是关键活力成份,为独特的次生新陈代谢物质,其成分受基因遗传、个体发育和环境破坏的危害。内蒙古为暖温带大陆性气候,阿荣旗、莫旗、扎兰屯及多热位于内蒙古自治区东部地区,坐落于大兴安岭地区东麓中区,气侯展现出春温、夏升、秋降、三九严寒的特性,强烈的温度差有益于地区内北苍术身体化学物质累积。本方式简单、迅速、精确,适用北苍术中赤芍素的含水量测量。