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超临界C02法优化番茄红素脂质体的配方工艺(一)

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-22 10:09:58 关注: 0 次
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番茄素普遍出现于自然的完善鲜红色果子之中,在其中西红柿、甜瓜、番石榴中成分较高。在身体的一些人体器官,比如:血夜、消化系统和肝部中也存有番茄素。番茄素的化学结构式为C40H56,含较多的烃基,呈开链条式构造,因而具备较强的抗氧化。可根据一系列的生理学生化反应,具有防范心脑血管疾病、操纵心肌梗塞、提升免疫功能和防衰老等各种至关重要的生理作用。

因为番茄素是脂溶性植物色素,并且不饱和脂肪开链条式构造使其具备较弱的可靠性,易空气氧化水解反应,产生异构化。这在较大水平上限定了番茄素的运用与开发设计。脂质体具备两亲性,将番茄素包埋在这其中,可有效性的提升番茄素的使用使用价值,比较大层度上激发其生物活性。提升番茄素的消化吸收可靠性。

现阶段制取脂质体的办法具体有酒精引入法、髙压匀质法、塑料薄膜超声波法等。这种方式因为引入了较多的有机溶液,且操作流程复杂。造成 所配制的脂质体构造不稳定。超临界萃取C02法与这种方式对比,具备低碳环保,实际操作标准柔和,操作流程简便易行,所制作出的脂质体无毒性没害且构造稳定性的优势。脂质体的秘方构成会危害脂质体的构造,从而危害所述药品的稳定度及在人体内的微生物使用率。因而本试验根据提升番茄素脂质体的秘方构成以求提升脂质体的可靠性,提升番茄素在人体内中的微生物使用率。为番茄素的开发给予参照根据。

一、仪器设备与原材料

1、实验室仪器

MV-10ASFE超临界流体提纯系统软件(上海市waters企业),Alpha2—4LDplus冷冻式干燥机,UV-5200紫外线光度计(上海市元析仪器设备有限责任公司),KQ-250DE型数控机床超声波清洗设备(昆山市超声波仪器设备有限责任公司),TGl6-WS台式离心机,电子器件电子分析天平(上海市越平仪器设备有限责任公司)。

2、试验原材料

C02,纯净度≥99.5%(哈尔滨市卿华化工气体有限责任公司),番茄素标准物质,成分≥98%(瑞楚生物技术有限责任公司),番茄素(LY)粗提物(市面上),大豆卵磷脂(PC)(天津收复生物化工研究室),碳水化合物(CH)≥99%(BeijingBiotoppedScience&TechnologyCo.Ltd),磷酸二氢钠(天津市博迪化工厂股权有限责任公司),磷酸氢二钠(天津天力化学药品有限责任公司),工业乙醇(天津富宇生物化工有限责任公司),甲苯,正己烷(天津富宇生物化工有限责任公司),色谱仪级正己烷(天津科密欧化学药品有限责任公司)。

二、方式与結果

1、实验方法

(1)番茄素标曲的制作

高精密称量番茄素标准物质20mg,向当中添加正己烷:酒精(V:V)为2:1的有机溶液充足融解并滴定剂至200mL,制取番茄素规范贮备液。各自高精密移加入适量贮备液取至10mL容量瓶中,做成浓度值为10、15、20、25、30μg/mL的系列产品标液,在474nm处,以番茄素浓度值为横坐标轴,OD值为纵轴,平行测定3次,制作标曲,結果如图所示1所显示。获得线性回归方程为:Y=16.24x 0.027,R2=0.994(X为番茄素浓度值,Y为水溶液在474nm处的OD值)。说明此浓度值范畴内,浓度值与OD值有不错的线性相关。

(2)超临界萃取CO2法制取番茄素脂质体

称加入适量番茄素粗提物、大豆卵磷脂、碳水化合物并添加工业乙醇,超声波10min,获得淡黄色乳浊液。将乳浊液添加提纯釜中,将聚磷酸盐缓存融解添加搜集瓶中。设置各技术参数开展制取,待反映完成后,就可以在搜集瓶中获得番茄素脂质体乳浊液。

(3)包裹率测量

向制取好的番茄素脂质体乳浊液里将入3mL甲苯:正己烷(V:V)=2:1的有机溶液,3000r/min离心式5min,离心式2次,搜集上清液开展OD值测量,以空缺脂质体为对比,在474nm处测量OD值。带到标准方程中,测算分散的番茄素成分W游。依照以下计算公式包裹率:

式中:W为总的番茄素的品质(g);

W为分散的番茄素的品质(g)。

(4)单要素实验

当超临界萃取溫度45℃,气体压强140Pa,時间30min,带入剂流速6mL/min时,以脂质体包裹率是响应值,调查碳水化合物与大豆卵磷脂质量比(g:g)3:20、1:4、7:20、9:20、11:20,聚磷酸盐缓冲液pH(6.0、6.5、7.0、7.5、8.0),番茄素与大豆卵磷脂质量比(g:g)1:100、1:50、3:100、1:25、1:20对番茄素脂质体包裹率的危害。

(5)响应面法试验设计

依据单要素实验效果和Box-Benhnken实验结构设计,挑选对番茄素脂质体危害明显的秘方构成要素开展响应面试验设计,如表1所显示。

(6)认证试验

选用Designexpert8开展相对应斜面提升实验,依据推算出的最佳脂质体秘方构成实体模型,开展3次平行面实验。

2、結果与剖析

(1)番茄素标曲

番茄素标曲如图所示1所显示,获得线性回归方程为:Y=0.0160X 0.027,R2=0.9939(X为番茄素浓度值,Y为OD值)。表明此浓度值范畴内,浓度值与OD值有不错的线性相关。

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