4、身体之外抗氧化性活力实验

（1）对DPPH的清理工作能力

①DPPH溶液的配制氧自由基

高精密称量19.716mgDPPH，用乙醇融解滴定剂于250mL容量瓶中，得C=0.2mmol／L的水溶液，于40℃电冰箱遮光储存。

②试品溶剂的制取

各自称量烘干的黑果腺肋花楸提取液干中药浸膏、矢车菊素、钛酸异丙酯矢车菊素、VC适当，融解而且配置成不一样浓度值的试品水溶液。各自取不一样浓度值的试品水溶液2mL于10mL比色管中，按论文参考文献上述方式实现实际操作，在517am处测量OD值A_空缺，A_试品，A_对比。依照计算公式黑果腺肋花楸提取液、矢车菊素、钛酸异丙酯矢车菊素、VC对DPPH氧自由基的清除率。

DPPH氧自由基清除率／％=(A_空缺一A_试品 A_对比)／A_空缺×100

式中，A_空缺-纯净水替代供试品水溶液与DPPH水溶液反映后的OD值值；A_试品-各供试品水溶液与DPPH水溶液反映后的OD值值；A_对比-各供试品水溶液与工业乙醇反映后的OD值值。

（2）FRAP测定方法总的抗氧化能力

①FRAP切削液的配置

各自配置0.2mol／L乙酸钠缓冲溶液(pH=3.6)，10mmol／LTPl亿水溶液(溶解40mmol／L硫酸)，20mmol／LFeCl₃水溶液。将以上三者按容积比10:1:1混和。

②FeSO₄标曲的制取

精准称量0.01419FeSO₄，融解并滴定剂至50mL容量瓶中，即得浓度值为lmmol／LFeSO₄水溶液。汲取该水溶液适当，配置成浓度值为2.82、8.46、14.10、19.74、25.38、28.20、33.84μg／mL的水溶液。取各水溶液添加3mLFRAP切削液，搅拌后于37℃反映10min，于593nm处测量OD值，以含量为横坐标轴，OD值为纵轴，制订复原力标曲，列举线性拟合方程式。

③被测物总抗氧化性活力测量

各自称量烘干的黑果腺肋花楸提取液干中药浸膏、矢车菊素、钛酸异丙酯矢车菊素、VC适当，融解而且配置成不一样浓度值的试品水溶液。各自取不一样浓度值的试品水溶液3mL于10mL比色管中，按论文参考文献上述方式实现实际操作，在593nm处测量OD值值。

(3)钼酸铵测定方法总的抗氧化能力

①钼酸铵反映机制的配置各自称量

2.13g倍他米松、0.99g钼酸铵、6.67mL盐酸溶解200mL水里，搅拌。

②VC标曲的制取

精准称量0.02599VC，用纯净水融解并滴定剂至50mL容量瓶中，即得浓度值为0.5mg／mL维他命C水溶液。汲取该水溶液适当，配置成浓度值为25、50、75、100、200、250tg／mL的水溶液。汲取O.5mL不一样含量的水溶液，添加到5mL钼酸铵反映系统中，反映试管婴儿于95℃水浴90min。反映液充足制冷至常温后，于695am处测量OD值，以含量为横坐标轴，OD值为纵轴，制订VC抗氧化能力标曲，列举线性拟合方程式。

③被测物总抗氧化性活力测量各自称量干

燥的黑果腺肋花楸提取液干中药浸膏、矢车菊素、钛酸异丙酯矢车菊素适当，融解而且配置成不一样浓度值的试品水溶液。各自取不一样浓度值的试品水溶液0.5mL添加到5mL钼酸铵反映系统中，按论文参考文献上述方式实现实际操作，在695nm处测量OD值值。被测物的总抗氧化能力以等同于是多少浓度值的VC来表明。

二、結果与剖析

（1）色谱仪标准的挑选

离子交换柱为大连市依利特ODS₂C₁₈(4.6mm×250mm，5μm)；流动性相：A为工业甲醇，B为0.2％硫酸铵溶液(W)，程序流程为0～30min，40％A；流动速度：0.8mL／min；柱温：30℃；进样量：20μL；检验光波长为276nm。钛酸异丙酯矢车菊素的保存期为24.21min，理论塔板数为21917，与邻近峰的分离度为2.28。HPLC色谱见图1。

2、流动性相标准的挑选

实验结果显示适合的流动性相为工业甲醇-O.2％硫酸铵溶液(V:V=40:60)，可以将黑果腺肋花楸提取液中的钛酸异丙酯矢车菊素与其它化学物质分离，保存期适度，依照钛酸异丙酯矢车菊素最高值测算理论塔板数为21917，与邻近峰的分离度为2.28，故挑选在所述流动性相标准下完成有关实验。

3、供试品水溶液制取方式的提升实验結果

（1）正交实验結果

称量黑果腺肋花楸提取液9份，每一份0.5g，放进圆底烧瓶中，按正交试验表开展实验，結果见表2。

正交实验结果显示：供试品水溶液制取方式的最佳计划方案为A₃B₃C₂，各要素的危害的大小为：水解反应時间＞水解反应溫度＞有机溶剂酸浓度值，明确供试品水溶液制取方式的最佳计划方案为：水解反应溫度为100℃、水解反应時间为120min、酸浓度值为3％硫酸工业甲醇溶液。

（2）加工工艺可靠性认证实验

三次实验結果钛酸异丙酯矢车菊素的峰总面积各自为1379.85、1382.57、1380.43，均值为1380.95，其钛酸异丙酯矢车菊素成分各自为1.8660、1.8527、1.8523mg／g，均值为1.8570mg／g，RSD为0.78％，结果显示，甄选的供试品水溶液制取方式加工工艺相对稳定。