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建立满山红叶HPLC指纹图谱并测定杜鹃素含量(一)

来源:郑州天顺食品添加剂有限公司 发布时间:2021-09-22 10:04:32 关注: 0 次
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满山红来自杜鹃科杜鹃属绿色植物兴安杜鹃(Rhododendron dauricum L.)的叶。满山红在治疗咳喘层面作用突显,常见来医治慢性支气管炎,漫性急性支气管炎等[2]。满山红以黄酮类类、香豆素类、有机物类、桂皮醛类等成分为主导,在其中药力功效突显的是黄酮类化合物、多糖类[3],包含杜鹃花素、三奈酚、金丝桃苷等。中草药带有的成分繁杂,危害其成分类型和成分的要素也许多,因而必须标准中草药的产品质量标准。中药材指纹图谱能够 使获得的有效化学信息利润最大化,具有把控中药材商品的品质的功效[4]。因而创建中药材指纹图谱实际意义重特大,也为事后中草药科学研究打下基础。

1 仪器设备与原材料

1.1 关键仪器设备
英国Agilent企业的1260型高效率液相色谱;英国THERMO企业的G10S UV-Vis型紫外线光度计;昆山市超声波仪器设备公司的KQ-250DE型医疗数控机床超声波清洗器;法国赛多利斯企业的BP211D型天平秤(d=0.01 mg);天津泰斯特仪器设备公司的98-1-B型电子器件温度控制电加热套。

1.2 试验原材料

1.2.1 实验试剂

试验中高效率液相色谱应用的是英国Fishers企业生产制造的色谱仪级工业甲醇、乙腈和苯甲酸,水为超纯水系统;此外试验使用的实验试剂为分析纯。

1.2.2 试药

杜鹃花素(生产批号:201605)为中国药品生物制药检定所生产制造。

1.2.3 中药饮片来源于

满山红中药材购于黑龙江省五林、黑龙江省林口、吉林通化,每一个原产地5批中药材,分别是五林01~05、林口01~05、通化01~05,共15批,序号分别是S1~S15。由中科院长春市应用化学研究室质谱分析核心皮面凤副研究员评定为兴安杜鹃Rhododendron dauricum L.叶。

2 方式与結果

2.1 标准品水溶液的制取

将杜鹃花素标准品高精密称重,加入适量工业甲醇做成每1 mL含0.1 mg的水溶液,即得。

2.2 供试品水溶液的制取

采用满山红叶100 g,选用流回法获取2回,第一回添加12倍水,置放30 min,流回获取30 min,过200目压滤机滤布,渗沥液预留;残渣第2回添加10倍水,获取20 min,过200目压滤机滤布,合拼2次渗沥液,缓解压力浓缩至500 mL,干冻,取干冻粉0.1 g,添加20 mL水超声波获取(输出功率100W,頻率40 KHz)60 min,放到室内温度,混匀,过0.45 μm的微孔滤膜,即得。

2.3 色谱仪标准的明确

2.3.1 色谱仪标准

选用Shim-Pack XR-ODS Ⅲ (2.0 mmi.d×150 mm)离子交换柱,用工业甲醇-0.3%苯甲酸溶液为流动性相系统软件梯度方向过柱,流动速度为0.2 mL·min-1,梯度方向过柱,检验光波长为297 nm,柱温为25 ℃,气相量为10 μL。梯度方向见表1。

2.3.2 空缺有机溶剂影响调查

将工业甲醇做为空缺有机溶剂,依照“2.3.1”项色谱仪标准,逐渐检验。满山红叶的指纹图谱不会受到空缺有机溶剂危害。见图1。

2.3.3 标准品和供试品峰核对

将“2.1”项的标准品水溶液和“2.2”项的供试品水溶液,依照“2.3.1”项的色谱仪标准,用高效率液相色谱检验。数据显示选定中药材中带有杜鹃花素。标准品色谱见图2,供试品色谱见图3。

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