F3菌种经LB液体培养基活性后,按4%接种量注射至LB液体培养基,37℃连续培养72h,不一样时间点的纤维素酶活力結果如图所示5所显示。
由图5得知,伴随着培育時间的增加,F3菌种纤维素酶活力呈持续上升发展趋势,48h时酶促反应最大,纤维素酶魅力为15.97U/mL,接着纤维素酶活力呈下降趋势,故最好塑造時间确认为48h,这有别于别的科学研究新闻报道中枯草芽孢菌纤维素酶魅力最好塑造時间3d~4d。
活性的F3菌种按4%接种量注射至LB液体培养基,不一样塑造溫度下F3菌种纤维素酶魅力的转变結果如图所示6所显示。伴随着气温的上升,F3菌种产纤维素酶的魅力呈先升高再降低的发展趋势,在其中仍然以37℃塑造溫度标准下酶魅力最大,但35℃与37℃二种塑造溫度对F3菌种纤维素酶魅力的危害差别不明显(p>0.05),其产纤维素酶的最好塑造溫度与别的科学研究报导的解木薯淀粉枯草芽孢菌存有很大差别,表明溫度对解木薯淀粉枯草芽孢菌纤维素酶魅力的危害具备非常明显的菌种非特异。
F3菌种经活性后,各自按不一样接种量注射至LB液体培养基中37℃塑造48h,纤维素酶魅力检验結果如图所示7所显示。接种量为6%时,F3菌种的纤维素酶魅力最大为17.62U/mL,但与4%接种量时其酶魅力差别不明显(p>0.05),这与别的科学研究报导相近。
活性的F3菌种各自按6%接种量注射至不一样原始pH的LB液体培养基中,37℃塑造48h,纤维素酶魅力检验結果如图所示8所显示。
由图8得知,培养液原始pH对F3菌种产纤维素酶的魅力危害明显,在其中以原始pH为pH7.0时纤维素酶魅力最大,达18.22U/mL,显著高过其他原始pH时菌种生产的纤维素酶魅力(p<0.05)。除此之外,从不一样原始pH标准下菌种的发育情况看,原始pH为pH11.0时,F3菌种的细胞培养液相对性回应,这表明F3菌种不合适在pH11.0的酸性标准生长发育,这也致使了此标准下其产酶工作能力较弱。对比于pH7.0标准,F3菌种在pH3.0的酸碱性情况下涨势都不强,但仍具备一定的酶促反应,而何颂捷等报导的解木薯淀粉枯草芽孢菌在pH3.0的原始pH下无法生长发育,故无纤维素酶活力。从而表明,F3菌种比较适合在弱酸性情况下生长发育。
依据单要素实验結果,依照表1中选定的要素及水准,开展正交实验提升,結果如表2所显示。4种要素对F3菌种产纤维素酶魅力的危害尺寸次序先后为:培养液原始pH>塑造時间>塑造溫度>接种量,纤维素酶魅力提升的最好组成为A2B2C2D3。依照最好搭配的培育标准开展塑造,即LB液体培养基的原始pH调为pH7.0,按6%接种量注射F3菌种,在37℃塑造溫度下连续培养60h,解木薯淀粉枯草芽孢菌F3菌种细胞培养液中纤维素酶魅力可以达到21.14U/mL,对比于正交实验提升前最大酶活提升了16.03%。F3菌种生产纤维素酶的魅力显著高过林晓琼等报导的解木薯淀粉枯草芽孢菌,具备不确定性的使用使用价值。
从大自然中发掘具备纤维素酶活力的微生物資源有着关键实际意义。原文中从发醇水豆豉中分开到一株可产纤维素酶的解木薯淀粉枯草芽孢菌绿色植物亚种F3菌种,根据单要素及正交实验提升了其液态塑造的最好产酶标准,即塑造温度37℃、接种量6%、原始pH为pH7.0、发酵时间60h,纤维素酶魅力可以达到21.14U/mL。