干茶颜色是绿茶叶的第一感观因素,也是荼叶生产过程中鉴定在产品品质的主要参照根据。脂溶性黑色素是绿茶叶干茶颜色的首要物质条件,关键包含叶绿素和胡罗卜素。叶绿素属吡咯类翠绿色黑色素,是危害绿茶叶干茶绿色颜色的关键成份。胡罗卜素就是指一类具备淡黄色到橘红色的多种多样有色板块化学物质,是组成干茶淡黄色颜色的关键因素,与此同时对普洱茶的香味质量有主动危害。现阶段荼叶中已发现41种叶绿素和38类型胡罗卜素,但因为欠缺相关脂溶性黑色素成分与绿茶叶干茶颜色的关联性科学研究,无法表现各黑色素成分对干茶颜色质量的功效。

现阶段测量荼叶中脂溶性着色剂的办法有光度法、薄层色谱法和液相色谱仪法等。光度法定量分析精确性和敏感度稍低,薄层色谱法评定的黑色素成分有可能是混合物质且用时久,现阶段多选用高效液相色谱色谱法检验荼叶中脂溶性黑色素。但中国用以检验荼叶中脂溶性着色剂的办法大多数存有分离出来实际效果不太理想化,可测量黑色素类型少等难题。ZAPATA等根据应用C8反方向离子交换柱,并在流动性看中加上吡啶/醋酸溶液以改进峰形所确立的脂溶性黑色素统计分析方法具备分离度好,可评定成分多等优势,国际性上对其运用日益增加,但在我国的茶学行业运用尚不普遍。

制作工艺对绿茶叶脂溶性着色剂的干扰很大。研究表明,绿茶叶生产加工中脂溶性黑色素在酶、热和机械设备外力作用等要素的效果下产生溶解,转化成一系列叶绿素和胡罗卜素的化合物。结束是产生绿茶叶“白汤绿叶子”质量的重要工艺流程,与此同时也是叶绿素溶解产生脱镁叶绿素最明显的环节。摊青对条型绿茶叶的光合强度危害并不大,但提升摊青工作压力和频次会扩大叶绿素的毁坏率。胡罗卜素成分在绿茶叶生产过程中明显降低,尤其是经结束和干躁后减幅各自做到52%和67%。干躁方法对脂溶性黑色素危害比较大,低温干燥和微波干燥机解决有助于降低绿茶叶叶绿素和β-胡罗卜素等脂溶性着色剂的损害。出香味是绿茶叶生产加工中提高荼叶香味质量的主要工艺流程,但在提升香味的与此同时,较难确保绿茶叶“三绿”的颜色质量规定。现阶段少见相关出香味工艺流程对脂溶性黑色素成分及干茶颜色危害的科学研究。

本探讨选用高效率液相色谱仪-二极管列阵探测器对绿茶叶生产过程中在产品的脂溶性黑色素开展测量,与此同时选用色度计检测在产品外型颜色的转变 ,致力于表明脂溶性黑色素在绿茶叶生产加工中的变化趋势以及与干茶颜色的相互关系,研究危害绿茶叶颜色的重要黑色素成份,为绿茶叶颜色质量的管控给予理论来源。

1 原材料与方式

1.1 实验原材料

1.1.1 原材料与实验试剂

茶茶青原材料：重庆巴渝特早,一芽一叶,2018年9月采于重庆重庆巴南区。黄体生成素(98%)、玉米黄素(98%)、β-胡罗卜素(98%),上海源叶生物技术有限责任公司；叶绿素a(90%)、叶绿素b(90%),上海市迈瑞尔有机化学技术性有限责任公司；脱镁叶绿素a(95%),英国FrontierScientific公司；甲苯、工业甲醇、乙腈、没有水吡啶、冰乙酸,均为色谱纯,成都科龙化工厂试剂厂。

1.1.2 仪器设备与机器设备

M20A高效率液相色谱,日本安捷伦仪器企业；UltraScanPRO色差仪,英国HunterLab企业；雷磁pHS25型pH计,上海仪电仪器设备股权有限责任公司；5810R冷冻离心机,法国艾本德企业。

1.2 实验方式

1.2.1 试品制取

茶青原材料生产成绿茶叶茶青的加工工艺如下所示：

摊青(室内温度,10h)→结束(320℃,1min)→摊青(室内温度,空压10min-挤压10min-压力30min-挤压10min)→干躁(110℃,20min)

生产过程样选用液态氮固样,低温干燥后破碎过40目筛密封性。试品均放置-40℃冰柜存放预留,每一个试品反复抽样3次。

选择生产制造上常见的3个出香味溫度,即80、100、120℃对绿霉茶开展出香味解决,在其中80℃出香味,每过60min抽样,总共6次,试品各自序号T101、T102、T103、T104、T105、T106；100℃出香味每过45min抽样,总共6次,试品各自序号T201、T202、T203、T204、T205、T206；120℃出香味每过30min抽样,总共6次,试品各自序号T301、T302、T303、T304、T305、T306。出香味制取的试品破碎过40目筛后装进密封袋,放置-40℃冰柜存放预留,每一个试品反复抽样3次。

1.2.2 色素提取与HPLC剖析标准

精确称量0.100g试品于事先制冷的研钵中,添加80%甲苯溶液(-4℃)2mL碾磨至匀浆状,经冷藏离心式(-20℃,4000r/min,10min)后迁移上清液。反复以上实际操作,合拼上清液,滴定剂至5mL,过0.45μm有机膜,引入样品瓶被测。HPLC剖析标准论文参考文献ZAPATA等、邓春梅等的方式 ,并依据具体情况做适度改动。离子交换柱:WatersC8柱(150mm×4.6mm,3.5μm)；流动性相A:V(工业甲醇)∶V(乙腈)∶V(吡啶/醋酸溶液)=50∶25∶25；流动性相B:V(工业甲醇)∶V(乙腈)∶V(甲苯)=20∶60∶20；吡啶/冰醋酸溶液的配制如下所示:20mL吡啶溶解900mL超纯水系统,迟缓滴入冰醋酸直至pH值变成5.0,接着用超纯水系统滴定剂到1L；流动速度为1mL/min,柱温箱溫度25℃；梯度方向过柱程序流程:0-22-28-38-40min,0%B-40%B-95%B-95%B-0%B；气相容积:10μL:检验光波长340～740nm。

1.2.3 黑色素成分判定定性分析

参照SUZUKI等及陈丽等的检验结论中的有效期限和特点消化吸收光波长对色谱仪峰开展判定,选用外标法开展定量分析,标曲如表1所显示。各成分在430nm处均有一定硬度的消化吸收峰,因而选用430nm下的峰总面积开展定量分析测算。因为荼叶脂溶性黑色素类型多样且绝大多数黑色素沒有商业化标准物质售卖,在本实验中沒有标准品的成分依据文献资料报导的更换计算方式开展定量分析,即叶绿素a同分异构体用叶绿素a标曲定量分析,叶绿素b同分异构体用叶绿素b标准曲线图定量分析,其他无标准品的叶绿素成分及胡罗卜素成分各自依据脱镁叶绿素a和黄体生成素的标曲定量分析。

1.2.4 干茶偏色的检验

选用L^∗-a^∗-b^∗表色调。取40目下的试品粉末状,用色差仪测量其L^∗、a^∗、b^∗,每一个试品反复测量3次。

1.2.5 数据统计分析

选用SPSS25.0开展单要素和多要素方差分析；选用SIMCA14.1开展偏最小二乘剖析；选用Origin2019做图。