在50mL离心管架中添加5.4g硫酸铵(硫酸铵的物质的量为18%),4.2g黑色素粗提液,各自添加9.0g、10.5g、12.0g、13.5g、15.0gPEG源液,调整管理体系pH为5,双水相提纯后的可选择性指数和原花青素与糖原残渣的扩散系数結果如图2所显示。
由图2得知,伴随着PEG质量浓度的提升,原花青素与糖原残渣的扩散系数都呈下滑的发展趋势,原花青素的减少力度更高一些,可选择性指数k存有先降低后升高再降低的发展趋势,在PEG质量浓度为16%做到最大。
在50mL离心管架中添加5.4g硫酸铵,12.0gPEG6000源液(PEG质量浓度为16%),4.2g黑色素粗提液,各自调整管理体系pH为1、2、3、4、5,双水相提纯結果如图所示3所显示。
如图所示3得知,伴随着pH的扩大,可选择性指数先上升后减少,在pH为3时到达最大,缘故有可能是由于卷心菜黑色素归属于矢车菊类黑色素,在pH为3时黑色素大多数呈分子结构的状态存有,更加容易被提纯到上看中,因而促使测出的K花较大。
在50mL离心管架中添加5.4g硫酸铵,12.0gPEG6000源液(PEG质量浓度为16%),调整管理体系pH为3,各自添加1.8g、2.4g、3.0g、3.6g、4.2g黑色素粗提液,双水相提纯結果如图4所显示。
如图4得知,伴随着料液添加量的增加,可选择性指数展现先上升后降低的发展趋势,在料液添加量为12%时,可选择性指数做到最大。当料液添加量超出12%时,下非常中原花青素的成分逐渐升高,造成 K花逐渐降低,可选择性指数k逐渐出现下降趋势。
从以上能够看得出,硫酸铵的增加量仍然是越大,可选择性指数越高,但试验全过程不适合再提高了,缘故是一方面过高的硫酸铵浓度值非常容易在下相进行析出结晶体,另一方面提升了产品成本与在上相黑色素中的含量,因而确认为20%。四个要素的危害顺序为:粗提液的使用量>pH>硫酸铵的使用量>PEG的使用量,综合性单一要素试验,最好试验标准:粗提液的物质的量为12%,硫酸铵质量浓度为20%,pH为3.5,PEG的质质量浓度为15%,原花青素的可选择性指数为750.26。
选用PEG/硫酸铵双水相管理体系提纯提纯卷心菜中原花青素。正交试验最好的提纯标准为:粗提液的物质的量为12%,硫酸铵质量浓度为20%,pH为3.5,PEG的物质的量为15%,原花青素的可选择性指数为750.26。尽管应用PEG6000/硫酸铵双水相管理体系对卷心菜黑色素有有效的可选择性,可以完成卷心菜黑色素与其说糖原成分的分离出来,而且原花青素的扩散系数K花对可选择性指数的危害的程度远高于含糖量的扩散系数K糖,但事后怎样完成高聚物和原花青素的分离出来仍是公司生产制造所面对的难点。