黄皮肤属绿色植物归属于芸香科Rutaceae，全球约有30种，关键分散于东半球的亚热带和亚热带地区。遍布于国内的黄皮肤属绿色植物约有10种及其2变异，在其中1种为引入种植种，集中化遍布于海南省、广西省、广东省及其云南省等南边省份。黄皮肤属绿色植物大多数为民俗药用价值，药用价值有悠久的历史，效果明显，具备理气止疼、祛毒消结的作用，常见于治感冒、类风湿关节炎及其胃疼等。当代绿色植物有机化学研究表明黄皮肤属绿色植物中含有香豆素类、黄酮类、木脂素类、倍半萜类、黄酮类苷类、二萜类及其柠檬苦素类等多种多样结构的化学物质，当代药学研究表明黄皮肤属绿色植物中剥离获得的成分具备抗感染活力、抗癌活力、抗真菌药活力、抗病毒治疗活力、神经系统维护活力及其护肝活力等各种生物活性。假黄皮肤Clausena excavata为芸香科黄皮肤属绿色植物，遍布于国内的海南省、云南省、广东省、广西省、福建省、中国台湾等省份。假黄皮肤为民俗药植，具备理气、止疼、祛风、祛湿的作用。当代绿色植物有机化学和药理学活力研究表明假黄皮肤中含有结构特征丰富多彩、生物活性明显的成分。

本研究组在早期分析中对假黄皮肤枝干的90%酒精提取液的抗类风湿关节炎活力实现了基本点评，结果显示假黄皮肤枝干的90%酒精提取液具备明显的抗类风湿关节炎活力。为了更好地更有效地综合利用该药植資源，充分运用其功效与作用，本研究组对假黄皮肤枝干的90%酒精提取液中的成分开展了体系科学研究，从这当中分离出来获得了19个化学物质，各自评定为：苔色酸甲酯(1)、丁香花脂素(2)、lenisin A(3)、东莨菪素(4)、欧前胡素酚(5)、N-benzoyltyrarnine methyl ether(6)、N-p-coumaroyltyramine(7)、aurantiamide acetate(8)、1H-indole-3-carboxaldehyde(9)、furostifoline(10)、clausenalansine E(11)、3-formylcarbazole(12)、clausine L(13)、clausine E(14)、methyl carbazole-3-carboxyaate(15)、glycosinin(16)、murrayafoline A(17)、clausine H(18)和2, 7-dihydroxy-3-formyl-1-(3'-methyl-2'-butenyl)carbazole(19)。在其中化学物质1～11为初次从假黄皮肤中剥离获得，化学物质1、2、10为初次从黄皮肤属绿色植物中剥离获得。除此之外，根据对化学物质1～19的身体之外抑止MH7A滑囊纤维细胞繁衍的活力开展点评化学物质1～19的抗类风湿关节炎活力，结果显示化学物质10～19主要表现出了比较明显的抗类风湿关节炎活力，他们对MH7A滑囊纤维细胞繁衍的抑止活力的IC50为(27.63±0.18)～(235.67±2.16) μmol·L^-1。

1 原材料

中低电压制取色谱仪(法国Buchi企业)；Agilent 1200分析型高效率液相色谱(英国Agilent Technologies有限责任公司)；Cosmosil C18剖析型离子交换柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；Cosmosil C18制取型离子交换柱(20 mm×250 mm，5 μm)；Thermo Fisher UltiMate 3000制取型高效率液相色谱(英国Thermo Fisher Scientific公司)；Finnigan LCQ Advantange MAX 质谱仪器(英国Thermo Fisher Scientific公司)；Bruker AV-400型超导体数字乳腺机(法国Bruker企业)；Sephadex LH-20疑胶(英国Amersham Blosclences企业)；层析硅橡胶GF254和柱色谱仪硅橡胶(青岛海洋化工企业)；ODS色谱原材料(C18，10～40 μm，法国Merck企业)；N-1001型旋转蒸发器(日本EYELA企业)；YOKO-ZX紫外线剖析暗箱(武汉市药科新科研开发有限责任公司)；4001N电子分析天平(上海市民桥高精密高新科技仪器设备有限责任公司)；OLYM PUS-IX70型微生物倒置显微镜(日本Olym-pus企业)；Tecan Infinite Pro全光波长多用途酶标仪(法国Tecan企业)；BHC-1300B2型净化工作台(苏州市万通气体技术性有限责任公司)；Thermo HERAcell 240i型CO2控温细胞培养箱(英国Thermo Fisher Scientific公司)；噻唑蓝(英国Sigma企业)；F12培养液、聚磷酸盐缓冲溶液、蛋白酶、胎牛血清和法抗(英国Hyclone公司)；MH7A滑囊纤维细胞来自英国方式塑造物集库存ATCC(American type culture collection)细胞库，购自于上海市冠导生物技术有限责任公司。别的实验试剂均为分析纯实验试剂或是色谱仪实验试剂 (西陇化工股权有限责任公司)。

假黄皮肤枝干于2019年10月收集于云南省西双版纳傣族自治州云南西双版纳国家保护区，经海南省师范学校亚热带药用价值資源有机化学国家教育部重点实验室付艳辉研究者评定为芸香科黄皮肤属绿色植物假黄皮肤C. excavata的枝干，凭据标本采集(No.CLEX20191002)储存于海南省师范学校海南省师范学校亚热带药用价值資源有机化学国家教育部重点实验室绿色植物标本室。

2 获取分离出来

将晾干的假黄皮肤枝干19.8 kg破碎完用90%酒精浸法获取3次，每一次获取7 d，得酒精获取总中药浸膏(1 113.8 g)。酒精获取总中药浸膏(1 110.0 g)经硅橡胶柱色谱仪分离出来，以乙醚-工业甲醇管理体系为过柱剂开展梯度方向过柱(100:0～35:65)，获得八个流分Fr.1～Fr.8。Fr. 2(48.7 g)经正相反ODS柱色谱仪分离出来，以工业甲醇-水管理体系为过柱剂开展梯度方向过柱(65:35～100:0)，获得6个亚流分(Fr.2A～Fr.2F)。Fr.2B(6.2 g)经硅橡胶柱色谱仪开展分离出来，以乙醚-甲苯管理体系为过柱剂开展梯度方向过柱(95:5～30:70)，再经制取型HPLC(DAD探测器；检验光波长为210、230、254、280 nm)制取(乙腈-水65:35)获得化学物质1 (21.3 mg)、7 (54.2 mg)、12 (63.6 mg)、14 (6.3 mg)和17 (21.5 mg)；Fr.2C(5.7 g)经硅橡胶柱色谱仪开展分离出来，以乙醚-甲苯(80:20～25:73)为过柱剂开展梯度方向过柱，再经制取型HPLC(DAD探测器；检验光波长为210、230、254、280 nm)制取(工业甲醇-水73:27)获得化学物质2 (42.1 mg)、8 (7.9 mg)、13 (8.6 mg)、16 (53.5 mg)、18 (74.1 mg)；Fr. 3(55.3 g)经正相反ODS柱色谱仪分离出来，以工业甲醇-水管理体系为过柱剂开展梯度方向过柱(55:45～100:0)，获得七个亚流分(Fr.3A～Fr.3G)；Fr.3B(6.7 g)经硅橡胶柱色谱仪开展分离出来，以乙醚-甲苯管理体系为过柱剂开展梯度方向过柱(85:15～20:80)，再经制取型HPLC(DAD探测器；检验光波长为210、230、254、280 nm)制取(乙腈-水58:42)获得化学物质3 (7.8 mg)、4 (9.3 mg)、9 (15.8 mg)、15 (87.3 mg)；Fr. 4(64.6 g)经正相反ODS柱色谱仪分离出来，以工业甲醇-水管理体系为过柱剂开展梯度方向过柱(45:55～100:0)，获得6个亚流分(Fr.4A～Fr.4F)；Fr.4B (8.3 g)经硅橡胶柱色谱仪分离出来，以乙醚-甲苯为过柱剂开展梯度方向过柱(80:20～30:70)，经Sephadex LH-20疑胶柱色谱仪(工业甲醇-水70:30)提纯后寄内制取型HPLC(DAD探测器；检验光波长为210、230、254、280 nm)制取(工业甲醇-水60:40)获得化学物质5 (8.7 mg)、6 (9.7 mg)、10 (31.6 mg)、11 (42.5 mg)、19 (22.3 mg)。

3 构造评定

化学物质1 乳白色无定形粉末状，三氯化铁显色反应呈阳性；C9H10O4，ESI-MS m/z 183 ；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 11.78 (1H, s, 2-OH), 6.28 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-5), 6.23 (1H, d, J = 2.5 Hz, H-3), 3.91 (3H, s, 7-OCH3), 2.47 (3H, s, 6-CH3)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 172.3 (C-7), 165.5 (C-2), 160.9 (C-4), 144.0 (C-6), 111.6 (C-5), 105.6 (C-1), 101.4 (C-3), 52.0 (7-OCH3), 24.4 (6-CH3)。之上数据信息与资料中消息的苔色酸甲酯的波谱数据信息基本一致，故评定化学物质1为苔色酸甲酯。

化学物质2 乳白色无定形粉末状，三氯化铁显色反应呈阳性；C22H26O8，ESI-MS m/z 419 ；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 5.59 (1H, s, H-10, 14, 16, 20), 4.72 (1H, d, J = 4.2 Hz, H-2), 4.28 (1H, dd, J = 9.0, 7.2 Hz, H-4β, 8β), 3.91 (1H, dd, J = 9.0, 3.6 Hz, H-4α, 8α), 3.89 (3H, s, 11, 13, 17, 19-OCH3), 3.10 (1H, m, H-5)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 147.3 (C-11, 13, 17, 19), 134.4 (C-12, 18), 132.2 (C-9, 15), 102.8 (C-10, 14, 16, 20), 86.2 (C-2, 7), 71.9 (C-4, 8), 56.5 (11, 13, 17, 19-OCH3), 54.4 (C-1)。之上数据信息与资料中消息的丁香花脂素的波谱数据信息基本一致，故评定化学物质2为丁香花脂素。

化学物质3 乳白色无定形粉末状；C16H24O5, ESI-MS m/z 297 ；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 6.41 (2H, s, H-2, 6), 5.94 (1H, m, H-8), 5.10 (2H, m, H-9), 4.41 (1H, dd, J = 10.6, 2.5 Hz, H-1'α), 3.86 (1H, dd, 10.6, 8.2 Hz, H-1'β) 3.63 (1H, dd, J = 8.2, 2.5 Hz, H-2'), 3.85 (6H, s, 3, 5-OCH3), 3.33 (2H, d, J = 6.8 Hz, H-7), 1.25(3H, s, H-5'), 1.25 (3H, s, H-4')；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 152.9 (C-3, 5), 137.1 (C-1), 136.4 (C-8), 135.3 (C-4), 116.3 (C-9), 105.5 (C-2, 6), 75.9 (C-2'), 75.7 (C-1'), 71.5 (C-3'), 56.2 (3, 5-OCH3), 40.7 (C-7), 26.9 (C-5'), 25.1 (C-4')。之上数据信息与资料中消息的lenisin A的波谱数据信息基本一致，故评定化学物质3为lenisin A。

化学物质4 浅黄色不定形粉末状，异羟肟酸铁显色反映呈阳性；C10H8O4, ESI-MS m/z 193 ；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7.60 (1H, d, J = 9.8 Hz, H-4), 6.91 (1H, s, H-8), 6.84 (1H, s, H-5), 6.26 (1H, d, J = 9.8 Hz, H-3), 3.95 (3H, s, 6-OCH3)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 161.5 (C-2), 150.3 (C-6), 149.7 (C-9), 144.0 (C-7), 143.3 (C-4), 113.4 (C-3), 111.5 (C-10), 107.5 (C-5), 103.2 (C-8), 56.4 (6-OCH3)。之上数据信息与资料中消息的东莨菪素的波谱数据信息基本一致，故评定化学物质4为东莨菪素。

化学物质5 浅黄色不定形粉末状，异羟肟酸铁显色反映呈阳性；C14H14O3, ESI-MS m/z 231 ；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7.63 (1H, d, J = 9.8 Hz, H-4), 7.22 (1H, d, J = 8.6 Hz, H-5), 6.81 (1H, d, J = 8.6 Hz, H-6), 6.24 (1H, d, J = 9.8 Hz, H-3), 5.28 (1H, dd, J = 7.2, 5.7 Hz, H-2'), 3.61 (2H, d, J = 7.2 Hz, H-1'), 1.85 (3H, s, H-4'), 1.75 (3H, s, H-5')；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 161.9 (C-2), 158.5 (C-7), 153.3 (C-9), 144.3 (C-4), 136.0 (C-3'), 126.7 (C-5), 120.5 (C-2'), 115.0 (C-8), 113.3 (C-3), 112.9 (C-10), 112.6 (C-6), 26.0 (C-4'), 22.2 (C-1'), 18.1 (C-5')。之上数据信息与文献资料报导的欧前胡素酚的波谱数据信息基本一致，故评定化学物质5为欧前胡素酚。

化学物质6 乳白色不定形粉末状，改进碘化铋钾显色反应呈阳性；C16H17NO2, ESI-MS m/z 256 ；1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 8.54 (1H, br t, NH), 7.81 (2H, m, H-2, 6), 7.50 (1H, m, H-4), 7.45 (2H, m, H-3, 5), 7.15 (2H, d, J = 8.6, H-2', 6'), 6.86(2H, d, J = 8.6, H-3', 5'), 3.71 (3H, s, 4'-OCH3), 3.45 (2H, t, J = 7.0, H-8'), 2.77 (2H, t, J = 7.0, H-7')；13C-NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ: 166.2 (C-7), 157.8 (C-4'), 134.7 (C-1), 131.5 (C-4), 131.2 (C-1'), 129.7 (C-2, 6), 128.4 (C-3, 5), 127.2 (C-2', 6'), 113.9 (C-3', 5'), 55.1 (4'-OCH3), 41.2 (C-8'), 34.3 (C-7')。之上数据信息与文献资料报导的N-benzoyltyrarnine methyl ether的波谱数据信息基本一致，故评定化学物质6为N-benzoyltyrarnine methyl ether。

化学物质7 乳白色不定形粉末状，改进碘化铋钾显色反应呈阳性；C17H17NO3, ESI-MS m/z 284 ；1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ: 7.37 (2H, d, J = 8.2 Hz, H-2', 6'), 7.29 (1H, d, J = 15.8 Hz, H-β), 7.00 (2H, d, J = 8.0 Hz, H-2'', 6''), 6.67 (2H, d, J = 8.0 Hz, H-3'', 5''), 6.77 (2H, d, J = 8.2 Hz, H-3', 5'), 6.38 (1H, d, J = 15.8 Hz, H-α), 3.30 (2H, t, J = 7.4 Hz, H-2), 2.63 (2H, t, J = 7.4 Hz, H-l)；13C-NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ: 165.6 (C=O), 159.0 (C-4''), 155.7 (C-4'), 138.9 (C-β), 129.7 (C-2', 6'), 129.7 (C-1'), 129.4 (C-2'', 6''), 126.0 (C-1''), 118.7 (C-α), 115.9 (C-3', 5'), 115.3 (C-3'', 5''), 40.9 (C-1), 34.5 (C-2)。之上数据信息与文献资料报导的N-p-coumaroyltyramine的波谱数据信息基本一致，故评定化学物质7为N-p-coumaroyltyramine。

化学物质8 乳白色不定形粉末状，改进碘化铋钾显色反应呈阳性；C27H30N2O4, ESI-MS m/z 447 ；1H-NMR (CDCl3, 400 MHz) δ: 7.72 (2H, m, H-3', 7'), 7.52 (1 H, m, H-5'), 7.44 (2H, m, H-4', 6'), 7.31 (2H, m, H-19), 7.29 (1H, m, H-17), 7.27 (2H, m, H-18), 7.26 (2H, m, H-16), 7.24 (2H, m, H-15), 7.17 (1H, m, H-10), 7.14 (2H, m, H-8, 12), 7.06 (2H, m, H-9, 11), 6.81 (1H, d, J = 7.7 Hz, 1-NH), 6.07 (1 H, d, J = 8.6 Hz, 4-NH), 4.78 (1H, d, J = 8.1, 5.9 Hz, H-2), 4.34 (1H, d, J = 8.1, 5.9 Hz, H-5), 3.82 (1H, dd, J = 11.3, 4.2 Hz, H-20), 3.93 (1H, dd, J = 11.3, 4.9 Hz, H-20), 3.06 (1H, dd, J = 13.7, 8.3 Hz, H-13), 3.21 (1H, dd, J = 13.7, 5.9 Hz, H-13), 2.76 (2H, m, H-6), 2.02 (3H, s, H-2'')；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ: 170.9 (C-1''), 170.4 (C-3), 167.3 (C-1'), 136.8 (C-7), 136.7 (C-14), 133.8 (C-2'), 132.1 (C-5'), 129.4 (C-16, 18), 129.3 (C-9, 11), 129.0 (C-15), 128.9 (C-4', 6'), 128.8 (C-8), 128.6 (C-19), 127.3 (C-13), 127.2 (C-3', C-7'), 126.9 (C-10), 64.7 (C-20), 55.1 (C-2), 49.6 (C-5), 38.6 (C-13), 37.6 (C-6), 20.94 (C-2'')。之上数据信息与文献资料报导的aurantiamide acetate的波谱数据信息基本一致，故评定化学物质8为aurantiamide acetate。