目地：讨论多重耐药铜绿假单胞菌的融合因素检验办法及对抗菌素的耐药性状况。方式：对医院2010年1月至2013年8月临床医学复检标本采集中分离出来挑选出的50株多重耐药铜绿假单胞菌开展了回顾性分析，选用K-B纸条法检验50株铜绿假单胞菌对环丙沙星、头孢噻肟、青霉素和亚胺培南等耐药性状况；用煮沸法获取50株铜绿假单胞菌的DNA模版；与此同时运用PCR技术性检验Ⅰ类融合子，根据转录组测序剖析其所带上的耐药性遗传基因。結果：本小组科学研究中，50株多种铜绿假单胞菌对下列4种药品形成的耐药性率各自为环丙沙星(18%)、头孢噻肟(32%)、亚胺培南(36%)和青霉素(46%)，提醒铜绿假单胞菌对抗菌素的抗药性有统计学意义(P<0.05)；其50株铜绿假单胞菌中Ⅰ类融合子验出为9株，检验检出率为18%。Ⅰ类融合子呈阳性菌种多重耐药率是85.2%，Ⅰ类融合子呈阴性菌种多重耐药率是19.8%，呈阳性菌种多重耐药率显著高过呈阴性菌种，P＜0.05。结果：融合子是产生铜绿假单胞菌多重耐药的主要要素，临床医学要充足高度重视融合因素受体的病菌多重耐药遗传基因水准，进而可减少病人的患病率。

铜绿假单胞菌(PA)是医学上较常用的病菌，这类病菌可造成医院感染。而融合子是一种病菌遗传基因捕捉和体现的基因遗传企业，是病菌遗传基因中可挪动遗传信息，带上结构域非特异资产重组系统软件成分，并可将很多耐药性遗传基因盒融合在一起，进而产生多重耐药。尤其是Ⅰ类融合子可带上多种多样耐药性遗传基因，这对全人类的身体健康产生了严重危害。为讨论并剖析多重耐药铜绿假单胞菌的融合因素检验办法和抗药性，将医院临床医学复检标本采集中分离出来挑选出的50株多重耐药铜绿假单胞菌开展了深入分析科学研究，现汇报如下所示。

1 原材料与方式

1.1菌种来源于及评定本科学研究选中医院2010年1月-2013年8月临床医学复检标本采集中所分离出来挑选出的50株多重耐药铜绿假单胞菌为研究对象，这种铜绿假单胞菌均为医院临床医学检验的痰液、小便、胆液及胸腔水等标本采集中检测提取的。病原菌均选用（法国的生物梅里埃企业）生产制造生产加工的ATB-Expression评定仪开展评定。

1.2实验试剂与仪器设备本实验操作中采用的环丙沙星和头孢噻肟购自（北京天坛药品微生物科研开发企业）；青霉素和MH培养液粉剂购自（杭州市天宇微生物菌种实验试剂有限责任公司）；亚胺培南（序号：CTO455B）购自（美国OXOID企业）；营养成分琼脂粉购自原国家卫生部（上海市生物制药研究室）；PCR实验试剂购自（广东医学院达安）实验试剂；仪器设备购自（上海市宏石企业）。

1.3方式①药品敏感性实验：K-B纸条法参考英国临床医学试验室规范联合会(NCCLS)安全操作规程开展；②DNA模版制取：取0.5mL无菌检测管添加50μL纯净水，挑菌小量新鮮病菌，50℃烧开10min，8000r/min离心式10min，取上清液预留；③融合子可变性区增加：以煮沸法获取病菌总DNA做为PCR模版，PCR反映系统为10×PCR Buffer(含Mg2＋15mmol/L)2.5μL，dNTPs2μL，Taq DNA聚合酶0.25μL，两根引物设计各0.5μL，模版DNA为1μL，加无菌水补充至25μL☆。反映标准：93℃2min，93℃30s，55℃30s，72℃60s,30个循环系统；72℃60s。PCR物质经琼脂糖电泳电泳原理后，紫外线杀菌灯下观查結果，并且用凝胶成像系统软件拍照并储存結果。PCR物质精彩片段送（上海生工生物技术有限责任公司）转录组测序，转录组测序結果与GeneBank中已经知道序列比对。

1.4统计学方法全部信息均选用SPSS10.0统计分析软件开展解析解决，计量资料选用t检验，计量资料选用检测，P<0.05为差别有统计学意义。

2 結果

本探究数据显示，50株多重耐药铜绿假单胞菌对下列4种药品的耐药性率各自为环丙沙星(18%)、头孢噻肟(32%)、亚胺培南(36%)和青霉素(46%)，提醒铜绿假单胞菌对抗菌素的抗药性具备统计学意义(P<0.05)。其50株铜绿假单胞菌中Ⅰ类融合子验出为9株，Ⅰ类融合子检验检出率为18%。Ⅰ类融合子呈阳性菌种多重耐药率是85.2%，Ⅰ类融合子呈阴性菌种多重耐药率是19.8%，呈阳性菌种多重耐药率显著高过呈阴性菌种，有统计学意义(P＜0.05)。

3 探讨

有資料说明，临床医学上铜绿假单胞菌耐药性体制十分复杂，发病原因也比较多，且这类病原菌的抗药性在不一样的地域中间，甚至同地域、不一样医疗机构中间造成铜绿假单胞菌耐药性的制度也各有不同。现阶段由于在我国临床医学抗菌药物的普遍应用，铜绿假单胞菌抗药性遗传基因的类别和总量也发生了较大的转变，并展现比较严重之发展趋势，尤其是临床医学上出現的多重耐药菌株，不但为病人的诊治产生了较大危害，与此同时也给院内感染操纵提供了比较大艰难。因而大家临床医生立即掌握铜绿假单胞菌耐药性遗传基因与耐药性体制，这对临床医学上安全用药具备关键实际意义。

我们知道，融合子是与细菌耐药性散播有关的遗传基因系统软件，是出现于病菌质粒、性染色体或转座子上的一种基因遗传构造，可捕捉耐药性遗传基因，使病菌主要表现为对抗菌素的多重耐药。尽管融合子相对性分子质量较小，但它可以借助融合酶从自然环境中捕捉耐药性遗传基因盒，并将耐药性遗传基因盒拼装在一起，产生很大的耐药性遗传基因多基因座，与此同时在遗传基因迁移和多重耐药的建立中起主导地位，耐药性遗传基因能力的多少能造成 病菌在临床医学上造成一定的抗药性，且可以加快病菌的传递速度，若一旦新产生的耐药性遗传基因被融合子捕捉，极有可能在病菌间普遍转移性肺癌，而且产生对新抗菌素的广泛抵抗性，这会给临床治疗产生较大艰难。有材料表明，Ⅰ类融合子在铜绿假单胞菌中遍布普遍，在抗药性形成的体制处起着关键功效，是造成 病菌多重耐药的重要。但大家从本分析的效果还可以看得出，分离出来出的50株铜绿假单胞菌对环丙沙星、头孢噻肟、亚胺培南和青霉素等4种药品有较高的耐药性率，其耐药性率各自18%、32%、36%和46%；而Ⅰ类融合子检验检出率为18%，融合子呈阳性菌种比呈阴性菌种多重耐药率高些（P<0.05），确认了融合子受体了多重耐药的造成。

总的来说，本分析对多重耐药铜绿假单胞菌临床医学分离出来株带上的I类融合子检验与有关抗药性开展了剖析，以进一步科学研究融合子在细菌耐药中的功效。大家临床医学医务人员思想观念应该有充足的了解，严苛把握本地域铜绿假单胞菌对抗菌素的抗药性，并增加检测幅度，在医学上应恰当合理使用抗菌素，以避免耐药菌的转移性肺癌，进而降低医院门诊患病率的产生。