目地 选用超高效率液相色谱仪-串联质谱技术性，创建二类医疗器械中8类13种抗菌素的检查方式。方式 试品经工业甲醇或乙腈获取后，经Waters HSS T3离子交换柱(100 mm×2.1 mm， 1.8μm)分离出来，三重四级杆串连质谱仪器检验。結果 13种选中的抗菌素在4～100μg/L范畴内线性相关优良，相关系数r均超过0.991，方法检出限为2～25μg/kg。在3种不一样制剂的二类医疗器械中，低、中、高3个浓度值加标水准的利用率为71.2%～130.4%，相对性相对标准偏差均低于11.3%，达到二类医疗器械中抗菌素违反规定加上的检查规定。应用创建的方式 ，在一份膏霜制剂的二类医疗器械中检查出氧氟沙星，成分为21.1 mg/kg，其他试品中都未验出有关化学物质。结果 该办法简易、靠谱、再现性好，遮盖的抗生素种类多。

抗菌素做为一种农药杀菌剂，被普遍使用于临床医学、养殖业、水产品养殖等领域。但因为抗菌素的很多应用，其抗药性遭受很多的关心。大家都知道，二类医疗器械也具备消灭病菌的功效。有别于欧美国家等资本主义国家，在我国未将二类医疗器械列入药品开展管理方法，原国家卫生部《消毒产品生产企业卫生规范》(2009年版)第五章第三十条明确提出“二类医疗器械严禁采用抗菌素、抗真菌药、生长激素等原材料”。殊不知，一部分制造业企业依然违反规定加上抗菌素类药，以提升消毒杀菌或抗抗菌实际效果，用以假冒二类医疗器械和抗抗菌商品，这不但加深了抗生素类的过度使用状况，与此同时也给消毒杀菌和抗抗菌商品的可靠运用导致安全隐患。

现阶段世界各国对抗菌素的检验具体涉及自然环境样版、微生物样版、肉食品、奶制品、护肤品等，而有关二类医疗器械中抗菌素检验的探究非常少，很少有的消息也只包含了一两大类抗菌素的检验，未有多类型抗菌素检验的报导。原国家卫生部数次机构集中整治行動，严厉打击违反规定加上个人行为，因为沒有健全的办法和相对应的国家行业标准，现阶段依然没法对相关产品开展合理管控。现阶段抗菌素的检查办法有酶联免疫法、毛细管电泳法、气象色谱仪-质谱分析联使用方法、液相色谱仪法及液相色谱仪-质谱分析联使用方法等。本方式根据超高效率液相色谱仪-串联质谱(ulta high perfomance chromatography tandem mass spectrometry，UPLC-MS/MS)，创建了对不一样制剂的二类医疗器械中四环素类(四环素、土霉素、金霉素、米诺环素、强力霉素)、大环内酯(罗红霉素)、β-内酰胺类(头孢拉定)、磺胺类(磺胺嘧啶)、氟喹诺酮(氧氟沙星、环丙沙星)、林可氟苯类(克林霉素)、氟苯咪唑类(奥硝挫)、氯霉素类(氯霉素)8类13种抗菌素的检查方式。

1 原材料与方式

1.1 仪器设备和实验试剂

30 A超高效率液相色谱(日本安捷伦仪器企业)，QTRAP 5500三重四级杆串连质谱仪器(英国AB SCIEX企业)，Waters HSS T3离子交换柱(100 mm×2.1 mm， 1.8 μm，英国Waters企业)。

抗菌素国家标准物质包含四环素、土霉素、金霉素、米诺环素、强力霉素、罗红霉素、头孢拉定、磺胺嘧啶、氧氟沙星、环丙沙星、克林霉素、奥硝挫、氯霉素，同位素标记物包含四环素-D6、土霉素-13C22-15N2、米诺环素-D6、强力霉素-D3、磺胺嘧啶-D6、头孢氨苄-D5、左氧-D8、环丙沙星-D5、罗红霉素13C-D3、克林霉素-D3、奥硝挫-D4、氯霉素-D5，均购自法国Dr. Ehrenstorfer GmbH及其德国Romerlabs俩家企业。色谱仪级的工业甲醇、乙腈购自Merck企业。色谱仪级的苯甲酸购自阿拉丁。分析纯的氧化钠购自国药控股。MS级水购自飞世尔企业。0.22 μm涤纶膜购自津滕企业。试品来自于生产厂家复检试品(非抗菌素新项目检验试品)，储存在4 ℃冰柜中。

1.2 标液配置

各自精确称量各标准物质及放射性核素内标10 mg，用工业甲醇融解并滴定剂于10 mL容量瓶中，配出浓度值为约1.0 mg/mL的规范贮备液，-20 ℃冷藏遮光储存。各自精确汲取适当各单一规范贮备液于25 mL容量瓶中，用工业甲醇稀释液至标尺，配置成含量为10 μg/mL的混和规范正中间液，4 ℃冷冻遮光储存；各自汲取适当单一内标贮备液于10 mL容量瓶中，用工业甲醇稀释液至标尺，配置成5 μg/mL的混和内标正中间液，4 ℃冷冻遮光储存。

1.3 试品前解决

液态制剂：称量0.2 g(精准至1 mg)混和均衡的试品，放置15 mL离心管架中，先添加10.0 μL混和内标正中间液，加上3.0 mL工业甲醇，涡流1 min使试品分散化，超声波获取10 min，添加0.15 g氧化钠，涡流搅拌，9000 r/min离心式5 min，汲取上清液，滤纸过虑，取0.8 mL渗沥液至气相瓶中，添加0.2 mL水，混和匀称，供超高效率液相色谱仪-串联质谱测量。

疑胶制剂：称量0.2 g(精准至1 mg)混和均衡的试品，放置15 mL离心管架中，先添加10.0 μL混和内标正中间液，加上3.0 mL乙腈，涡流1 min使试品分散化，超声波获取10 min，9000 r/min离心式5 min，汲取上清液，滤纸过虑，取0.8 mL渗沥液至气相瓶中，再添加0.2 mL水，混和匀称，供超高效率液相色谱仪-串联质谱测量。

膏霜制剂：称量0.2 g(精准至1 mg)混和均衡的试品，放置15 mL离心管架中，先添加10.0 μL混和内标正中间液，加上3.0 mL工业甲醇，涡流1 min使试品分散化，超声波获取10 min，9000 r/min离心式5 min，汲取上清液，滤纸过虑，取0.8 mL渗沥液至气相瓶中，添加0.2 mL水，混和匀称，供超高效率液相色谱仪-串联质谱测量。

1.4 仪器设备标准

1.4.1 色谱仪标准

离子交换柱：Waters HSS T3离子交换柱(100 mm×2.1 mm，1.8 μm)；流动性相：A相为0.1%苯甲酸溶液，B相为乙腈；流动速度0.3 mL/min；柱温40 ℃；气相容积5 μL；梯度方向过柱程序流程见表1。

1.4.2 质谱分析标准

水解方法：ESI 和ESI-与此同时扫描仪；离子源溫度：550 ℃；毛细血管工作电压： 5.5 kV(ESI )和 -4.5 kV(ESI-)；气帘气：30 psi；做雾化气：65 psi；輔助气：65 psi；检测方式：多反映检测(MRM)方式，各总体目标化学物质的质谱分析主要参数见表2。

1.5 校正曲线制作

在以上色谱仪标准和质谱分析标准下制作校正曲线，该线条的纵轴为被测成分i定量分析正离子峰总面积Ai与内标物定量分析正离子峰总面积Ais比例Ai/Ais，横坐标轴为试品中被测成分i的成分Ci。

1.6 方法检出限和定量限的明确

选择没有总体目标化学物质的试品，添加较低浓度的混和规范正中间液，依照1.3节解决后上机操作检验，得到各总体目标剖析物的频率稳定度数据信息，依据加标量，依照3倍频率稳定度(S/N=3)做为方法检出限、10倍频率稳定度(S/N=10)做为定量限的标准测算方法检出限和定量限。