2、色谱仪和质谱分析标准的提升
（1）流动性相的挑选
正相反色谱仪的流动性相一般由水和有机溶液（如工业甲醇、乙腈）等构成，因为一些被测物正负极较强，流动性相的过柱工作能力不适合过强，与此同时待分离出来的16种添加物有一些正负极相仿，保存期相仿，选用乙腈为有机相时造成 好多个成分“共排出”状况较工业甲醇比较严重，而工业甲醇可让16种添加物的保存期相对性延迟时间，与此同时工业甲醇能够 提升离子化水平，峰总面积相比乙腈为流动性相时大，故挑选工业甲醇为研究的有机相；又因为流动性相要进到质谱仪器，加上一定量的缓冲液能够 提升响应值，因此考虑到工业甲醇-苯甲酸溶液、工业甲醇-乙酸铵水溶液、工业甲醇-甲酸溶液3种流动性相管理体系。

以被测物在离子交换柱上的分离度、峰形、敏感度等为调查指标值对3种流动性相管理体系实现了较为。结果显示，管理体系中加入了乙酸铵不但更有益于分离出来化学物质在离子交换柱上的保存，并且可以提升黑色素类化合物的水解化水平，提升数据信号回应，从各化学物质分离度、峰形、响应值及其保存期的可靠性等标准开展整体考量，工业甲醇-10mmol/L乙酸铵做为流动性相时，好于其他二种流动性相，故试验采用工业甲醇-10mmol/L乙酸铵为流动性相开展梯度方向过柱。
（2）柱温的挑选
柱温可以危害离子交换柱的柱效、可选择性、敏感度和可靠性，柱温的更改立即危害分离出来作用及分离出来速度。上升柱温，离子交换柱内离子交换法速度随着上升，有益于提升柱效、减少剖析時间。本试验调查了柱温各自为30℃、35℃、40℃时，16种添加物保存期及响应值的区别，发觉当柱温为30℃时，16种添加物有13种出峰時间均汇集在3～4min，分离度差；提升柱温至35℃时，柱效提升，分离度和敏感度均有改进，再次提升柱温，分离出来状况无显著转变。充分考虑离子交换柱在相比较低气温下使用期限较长，本试验设置柱温为35℃。提升情况下16种添加物的MRM质谱图见图1。

（3）质谱分析标准的挑选
为取得最好的精确度和分离出来实际效果，依据16种添加物的分子式特点，在正、负二种水解方式下提升被测物的母正离子和特点子离子及其对应的质谱分析主要参数。取浓度值为1mg/L的16种化学物质单标液先后选用不接离子交换柱立即气相方法开展质谱分析全扫描仪检验，获得总体目标剖析物一级质谱图，再用氩气负电子该母正离子，获得其二级质谱图，运用设备的全自动调优作用，各自对Q1、Q3、CE等完成提升，明确16种添加物的母正离子和子离子的最好质谱分析标准，以硬度比较大的子离子做为定量分析正离子，抗压强度稍小的子离子为判定正离子。
3、方法学点评
（1）方式的线形范畴和方法检出限
将含16种被测物的混和规范贮备液加上至稀释液5倍的空缺红酒试品中，各自配置系列产品混和规范切削液。

离子交换柱：AcquityUPLCHSST₃柱（100mm×2.1mm,1.8µm，英国Waters企业）。流动性相：（A）工业甲醇和（B）10mmol/L乙酸铵溶液，流动速度0.35mL/min；梯度方向过柱程序流程为：0min，工业甲醇的摩尔分数为10%；0～3min，工业甲醇的摩尔分数从10%升到90%，并维持2.5min，5.5～5.51min；工业甲醇的摩尔分数从90%降到10%；5.51min～6.5min，工业甲醇的摩尔分数维持10%。柱温为35℃；气相容积：2μL。

分析仪：LCMS-8050；离子源：电喷雾器离子源（ESI）；扫描仪方法：正空气负离子与此同时扫描仪；离子源插口工作电压：0.5kV；做雾化气：N23.0L/min；干躁气：N210L/min；撞击气：氩气；DL溫度：250℃；加热器溫度：400℃；逐行扫描：多反映检测(MRM)；停留時间：15ms；时间延迟：3ms；以各成分定量分析离子色谱仪峰范围对相对的浓度值制作各被测物的规范工作中曲线图，结果显示，线性相关优良，相关系数r（r²）都是在0.995之上。

用红酒试品低加标水准测算各成分的方法检出限和定量限，用频率稳定度为3明确方式的方法检出限（LOD），用频率稳定度为10明确方式的定量限（LOQ），各成分在红酒试品中的方法检出限范畴在0.2～2μg/L中间。結果见表2。

（2）精度和利用率
用少量移液器向空缺红酒试品中精确添加一定量的16种待测物混和标液，配出低、中、高3个浓度值水准开展利用率试验。各自精确称量16种添加物标准物质于10mL深棕色容量瓶中，自来水或工业甲醇融解并滴定剂，配置成浓度值为1mg/mL的单标贮备液，于-18℃下遮光储存。用工业甲醇稀释液并配置正中间浓度值的规范切削液，于4℃遮光储存。

依据须要用流动性相逐步稀释液，配置成合理含量的混和规范切削液，现配现用。取红酒试品2.0mL于10mL容量瓶中，用超纯水系统滴定剂，超声波搅拌，过0.22μm滤纸，渗沥液供测量。

离子交换柱：AcquityUPLCHSST3柱（100mm×2.1mm,1.8µm，英国Waters企业）。

流动性相：（A）工业甲醇和（B）10mmol/L乙酸铵溶液，流动速度0.35mL/min；梯度方向过柱程序流程为：0min，工业甲醇的摩尔分数为10%；0～3min，工业甲醇的摩尔分数从10%升到90%，并维持2.5min，5.5～5.51min；工业甲醇的摩尔分数从90%降到10%；5.51min～6.5min，工业甲醇的摩尔分数维持10%。

柱温为35℃；气相容积：2μL。

分析仪：LCMS-8050；离子源：电喷雾器离子源（ESI）；扫描仪方法：正空气负离子与此同时扫描仪；离子源插口工作电压：0.5kV；做雾化气：N23.0L/min；干躁气：N210L/min；撞击气：氩气；DL溫度：250℃；加热器溫度：400℃；逐行扫描：多反映检测(MRM)；停留時间：15ms；时间延迟：3ms。

开展6次反复试验，测算其利用率及相对性相对标准偏差（RSD）。结果显示，各总体目标物均值利用率在89.1%～106.4%中间，相对性相对标准偏差低于9.7%，方式的准确性和精度均合乎多残余剖析的规定。
4、具体试品的测量
按所确立的办法对购置的10批号红酒试品做好了16种添加物的筛选，每一个试品反复测量3次。所检红酒试品中有1个验出糖精钠和甜蜜素，成分各自为26.3μg/L、38.9μg/L，其他试品的检验结论均为呈阴性。呈阳性试品的MRM质谱图见图2。

三、结果
本科学研究创建了高效率液相色谱仪-串连质谱仪器与此同时测量红酒中甜味素、添加剂和黑色素成分的方式 ，前解决简易、剖析速度更快、精确度和敏感度高。具体试品的检验说明，该办法可以达到红酒甜味素、添加剂和黑色素残余的剖析规定，与国家标准方式对比，进一步提高了剖析工作效率和减少了剖析成本费，可以达到红酒中痕量元素剖析规定，特别适合大批红酒试品中16种添加物的判定和定性分析。